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公开(公告)号：CN111718885B
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202010725236.7
申请日：2020-07-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌高效稳定的双质粒系统，属于基因工程领域。本发明构建了适用于双质粒转化的载体。省去了先在大肠杆菌中进行多拷贝复制，可直接进行枯草芽孢杆菌的转化，并且能够通过通过外源添加相应的诱导剂，诱导目的蛋白的表达。此系统表达效果稳定，以枯草芽孢杆菌为宿主，得到的产物安全无致病性，适用于多种生产场景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111269926A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN201911414867.0
申请日：2019-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种钴离子诱导型蛋白表达系统及应用，属于生物工程技术领域。本发明通过将响应钴离子的阻遏蛋白RcnR及其操纵序列rcnO与来源于枯草芽孢杆菌的强启动子Pveg构建在一起，得到了钴离子诱导型高效基因表达系统。当利用该系统表达腈水合酶时，以500μM钴离子作为诱导剂，酶活最高达到106.2±4.6U/mL，接近使用IPTG诱导系统的水平(121.4±4.0U/mL)。在利用该钴离子诱导型系统表达腈水合酶过程中，钴离子同时作为腈水合酶的诱导剂和金属配体，不需要额外添加化学诱导剂，降低了生产成本，简化了生产工艺。
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公开(公告)号：CN111718885A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN202010725236.7
申请日：2020-07-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌高效稳定的双质粒系统，属于基因工程领域。本发明构建了适用于双质粒转化的载体。省去了先在大肠杆菌中进行多拷贝复制，可直接进行枯草芽孢杆菌的转化，并且能够通过通过外源添加相应的诱导剂，诱导目的蛋白的表达。此系统表达效果稳定，以枯草芽孢杆菌为宿主，得到的产物安全无致病性，适用于多种生产场景。
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公开(公告)号：CN112553235B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202011449022.8
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种甘油诱导表达系统及在纳豆激酶生产中的应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明通过将PglpD与抗终止子GlpP共同构建至枯草芽孢杆菌高拷贝质粒上，使菌体的生长和蛋白的表达分开。在发酵初期，使菌体充分利用葡萄糖等优先利用的碳源完成生长和高效积累生物量的过程；直至葡萄糖耗尽，甘油自动诱导开始之后，蛋白得到高效表达。本发明用绿色荧光蛋白和纳豆激酶验证该表达系统的调控性能，该表达系统可广泛应用于对宿主菌压力较大的蛋白和代谢产物的生产上。
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公开(公告)号：CN111269926B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN201911414867.0
申请日：2019-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种钴离子诱导型蛋白表达系统及应用，属于生物工程技术领域。本发明通过将响应钴离子的阻遏蛋白RcnR及其操纵序列rcnO与来源于枯草芽孢杆菌的强启动子Pveg构建在一起，得到了钴离子诱导型高效基因表达系统。当利用该系统表达腈水合酶时，以500μM钴离子作为诱导剂，酶活最高达到106.2±4.6U/mL，接近使用IPTG诱导系统的水平(121.4±4.0U/mL)。在利用该钴离子诱导型系统表达腈水合酶过程中，钴离子同时作为腈水合酶的诱导剂和金属配体，不需要额外添加化学诱导剂，降低了生产成本，简化了生产工艺。
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公开(公告)号：CN112553235A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011449022.8
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种甘油诱导表达系统及在纳豆激酶生产中的应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明通过将PglpD与抗终止子GlpP共同构建至枯草芽孢杆菌高拷贝质粒上，使菌体的生长和蛋白的表达分开。在发酵初期，使菌体充分利用葡萄糖等优先利用的碳源完成生长和高效积累生物量的过程；直至葡萄糖耗尽，甘油自动诱导开始之后，蛋白得到高效表达。本发明用绿色荧光蛋白和纳豆激酶验证该表达系统的调控性能，该表达系统可广泛应用于对宿主菌压力较大的蛋白和代谢产物的生产上。
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