公开(公告)号：CN106565831A

公开(公告)日：2017-04-19

申请号：CN201610834293.2

申请日：2016-09-20

Applicant: 浙江新银象生物工程有限公司 ,  浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  周斌 ,  陆跃乐 ,  朱勇刚 ,  范永仙 ,  陈艺强

IPC: C07K14/315 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/24

CPC classification number: C07K14/315

Abstract: 本发明提供了一种利用集成膜技术分离制备高纯度nisin的方法，所述方法为：将nisin酸化液用孔径为0.2～0.5μm的陶瓷膜进行微滤，对所得滤液进行双极膜电渗析，选取交联度3～7的阳离子交换膜和交联度10～13的阴离子交换膜，在直流电压5～50V、电流2～16A、温度15～45℃的条件下进行电渗析，将所得电渗析液用截留分子量为1000～3000的超滤膜进行浓缩，所得浓缩液进行喷雾干燥，即得高纯度nisin产品；本发明方法制备的nisin产品纯度高，产品nisin含量达20000～30000IU/g产品；且该方法无需传统的盐析工艺来纯化nisin，从而可以解决高盐废水等问题。

公开(公告)号：CN105713194A

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201610190931.1

申请日：2016-03-30

Applicant: 浙江新银象生物工程有限公司 ,  浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  朱勇刚 ,  陆跃乐 ,  周斌 ,  范永仙 ,  陈艺强 ,  金陈斌 ,  许峰

IPC: C08G69/10

CPC classification number: C08G69/10

Abstract: 本发明公开了一种提纯ε?聚赖氨酸的方法，所述方法为：将质量浓度75％以上的ε?聚赖氨酸粗品加入到去离子水中，配制成质量浓度30?50％的ε?聚赖氨酸水溶液，向水溶液中添加体积终浓度1?10％的有机溶剂，加热回流反应2h，随后缓慢降温至?5℃，搅拌结晶，过滤，获得滤饼a，将滤饼a干燥，获得ε?聚赖氨酸；采用本发明方法，可得到高纯度ε?聚赖氨酸(高于99.5％)，在该工艺中损失的聚赖氨酸产品均可回收利用，经真空干燥后，可得到高纯度ε?聚赖氨酸固体，便于储存和运输，更可应用于化妆品及医药等领域。

公开(公告)号：CN103113280B

公开(公告)日：2015-08-26

申请号：CN201310047509.7

申请日：2013-02-06

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 范永仙 ,  陈小龙 ,  李福革 ,  嘉晓勤 ,  沈寅初

IPC: C07D207/456 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了一种式（Ⅰ）所示3,4-二氯顺丁烯二酰亚胺类化合物及制备方法与在抑制油菜菌核病菌或灰霉病菌中的应用，本发明所述的3,4-二氯顺丁烯二酰亚胺类化合物，合成方法简单，操作简便，合成时间短，产率高；所述的3,4-二氯顺丁烯二酰亚胺类化合物对油菜菌核病菌和灰霉病菌的防治有所提高，并且其毒性比较低，对环境比较友好；式（Ⅰ）中，R为脂肪烃基、苯基、取代苯基或苯烷烃基，所述脂肪烃基为C1～C16直链烃基、支链烃基或环烷烃基。

公开(公告)号：CN103627721B

公开(公告)日：2015-08-05

申请号：CN201310505530.7

申请日：2013-10-22

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  范永仙 ,  朱廷恒 ,  薛海龙 ,  张力伟 ,  沈寅初

IPC: C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12N15/53 ,  C12R1/845

Abstract: 本发明提供了G6PDH基因在提高黑根霉对甾体C11α-羟基化能力中的应用，以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因工程菌的构建方法和构建后筛选获得的菌株。本发明通过分子生物学方法将G6PDH克隆至黑根霉中，改造菌种，拟在改造后的黑根霉细胞内实现G6PDH催化NADPH再生，向细胞色素P450酶系催化的反应提供所需要的辅酶，改善黑根霉对甾体C11α-羟基化的能力。本发明的有益效果主要体现在：按照本发明方法构建的基因工程菌，用于转化沃氏氧化物C11α-羟基化生产霉菌氧化物，相比出发菌株，生长快，原料利用率高，转化率和转化效率高，在甾体药物的开发和利用过程中具有深远的理论意义和较高的应用价值。

公开(公告)号：CN102382028B

公开(公告)日：2014-11-12

申请号：CN201110249201.1

申请日：2011-08-26

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  沈振忠 ,  李伟 ,  范永仙 ,  沈寅初

IPC: C07D207/448 ,  C07D207/452 ,  C07D403/04 ,  A01N43/36 ,  A01N43/52 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了一种式(I)所示的顺丁烯二酰亚胺类化合物，式(I)中，R为C1～C16的脂肪烃基、苯基或取代苯基；所述脂肪烃基为C1～C16直链烃基、C1～C16支链烃基或C1～C16环烷基；所述取代苯基的取代基为C1～C3烷基、对氯基、3，5-二氯基、2-甲基-3-硝基、苯并咪唑基、3，4，5-三氟基；所述的顺丁烯二酰亚胺类化合物的制备方法为：以2，3-二甲基顺丁烯二酸酐和有机胺为原料，于有机溶剂中，在催化剂、阻聚剂和/或脱水剂的作用下，经酰胺化反应和脱水闭环反应值得式(I)所示的顺丁烯二酰亚胺类化合物；本发明化合物制备方法简单、操作方便；不但提高了对油菜菌核病菌的抑制效果，而且毒性较低。

公开(公告)号：CN103880902A

公开(公告)日：2014-06-25

申请号：CN201410094966.6

申请日：2014-03-14

Applicant: 浙江新银象生物工程有限公司 ,  浙江工业大学

Inventor： 陆跃乐 ,  周斌 ,  陈小龙 ,  陈艺强 ,  范永仙 ,  朱勇刚

IPC: C07H17/08 ,  C07H1/06

Abstract: 本发明提供了一种纳他霉素针状结晶的制备方法，所述方法如下：将纳他霉素加入水中，调pH值为1～3或11～13，搅拌使其完全溶解后，再于5min～120min内缓慢（太快或太慢都不利针状结晶的形成）调pH至4～10，继续搅拌20～40min，获得纳他霉素针状结晶的悬浮液，悬浮液经干燥获得纳他霉素针状结晶。采用本发明方法，所得到的样品在水或75%乙醇中悬浮稳定好，长时间不发生沉淀，从而方便使用，在食品防腐上具有较好的市场应用前景。

公开(公告)号：CN101716512B

公开(公告)日：2011-07-27

申请号：CN200910154836.6

申请日：2009-11-24

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 周春晖 ,  童东绅 ,  李明燕 ,  俞卫华 ,  范永仙

IPC: B01J23/755 ,  C10L1/04

Abstract: 本发明公开了一种催化剂Ni-LDHs在油酸脱羧生成烃类物质的反应中的应用，所述催化剂Ni-LDHs是M、Al类水滑石或M、Al类水滑石在300～900℃焙烧得到的产物，所述的M为Ni或者为Ni和Mg的组合；所述M、Al类水滑石中M和Al的摩尔比为2∶1；Ni和Mg的摩尔比为1∶0～0.5。本发明以生物质油酸为原料进行脱羧反应制备低碳烷烃，是一个绿色的、可再生的反应过程，符合可持续发展的要求；以LDH材料为催化剂，该类材料原料价格便宜，合成方法简单，适合于大量生产，因此，本发明的工艺路线具有较佳的工业应用前景。

公开(公告)号：CN101864468A

公开(公告)日：2010-10-20

申请号：CN201010199312.1

申请日：2010-06-12

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  徐玉华 ,  范永仙 ,  嘉晓勤 ,  沈寅初

IPC: C12P17/16 ,  C12N1/20 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明提供一种变构酸的制备方法，将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中，配制成变构霉素溶液，再将脂肪酶溶解于缓冲液B中，配制酶液；将酶液加入到变构霉素溶液中，于25-40℃下反应0.5-5.0h，反应结束，将反应液pH调至4.0，用等体积的萃取溶剂A萃取；取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取，取有机层，用饱和盐水洗涤后再用Na2SO4干燥，真空蒸馏浓缩溶剂，得到变构酸粗品；将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂，取含变构酸的柱层析产品用丙酮重结晶，得到变构酸产品。本发明利用脂肪酶对发酵的变构霉素进行水解，获得变构酸，具有反应条件温和、反应专一、高效等优点。

公开(公告)号：CN119080886A

公开(公告)日：2024-12-06

申请号：CN202411263265.0

申请日：2024-09-10

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 范永仙 ,  付盼盼 ,  陈小龙

IPC: C07K11/02 ,  C07K1/16 ,  C07K1/14 ,  C07D273/00

Abstract: 本发明涉及微生物发酵领域，尤其涉及一种缬氨霉素分离纯化方法。一种缬氨霉素分离纯化方法，其特征在于，所述方法包括：（S.1）将含有缬氨霉素的发酵液离心除去上清得到菌丝体，用有机溶剂浸提菌丝体，浓缩提取液；（S.2）将提取液用石油醚萃取、水洗，破乳后收集石油醚相旋蒸浓缩得到粗提物；（S.3）使用柱层析的方法用不同比例的洗脱剂将石油醚粗提物按照极性进行梯度洗脱，进行减压浓缩；（S.4）使用有机溶剂进行结晶、收集、干燥得到缬氨霉素。本发明采用的工艺简单，使用的有机溶剂可进行回收；在获得样品阶段不需要使用半制备色谱通过HPLC分离，通过有机溶剂结晶的方法，提高了样品量，可进行批量生产，此方法得到的缬氨霉素收率高、纯度高。

公开(公告)号：CN112921060B

公开(公告)日：2024-06-07

申请号：CN202110280722.7

申请日：2021-03-16

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 陈小龙 ,  张珂睿 ,  范永仙 ,  陆跃乐 ,  叶康 ,  朱林江

IPC: C12P19/12

Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶在有机溶剂中催化合成脂肪酸蔗糖酯的方法。所述方法是以低毒有机溶剂作为反应介质，加入底物蔗糖和月桂酸乙烯酯，在脂肪酶催化下合成月桂酸蔗糖单酯，通过加入碱性物质可使脂肪酶去质子化，从而大幅提升脂肪酶活性。本发明实现了用生物法在低毒有机溶剂中获得较高蔗糖酯产量的目标，且催化产物几乎全为蔗糖单酯，极大地简化了产物的分离纯化，是一种绿色安全、低成本的生产方法。