一种菊花中多酚氧化酶快速高效提取测定方法

    公开(公告)号:CN106701695A

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201611079427.0

    申请日:2016-11-30

    申请人: 苏靖

    IPC分类号: C12N9/02 C12Q1/26

    摘要: 本发明公开了一种菊花中多酚氧化酶快速高效提取测定方法,在菊花中加入石英砂、聚乙烯吡咯烷酮以及柠檬酸‑磷酸缓冲液,研磨成匀浆,冷藏浸置,两次离心,即得粗酶液;将含有邻苯二酚的缓冲液与上述的粗酶液分别进行水浴锅保温,快速混合均匀后,倒入比色皿,同步记时,并用煮死的粗酶液作为对照;测ΔOD410nm波长处值的变化,根据时间以及波长值的变化计算多酚氧化酶的活力。本发明方法原料广,提取过程简化,反应速度快,测量时间快,测定结果精确,适用于新鲜菊花、不同温度热风干燥菊花、不同时间段微波干燥菊花、水蒸汽蒸菊花等任何加工方式的菊花中多酚氧化酶的测定。

    双孢蘑菇PPO基因片段及在降低PPO酶活性方面的应用

    公开(公告)号:CN105567709A

    公开(公告)日:2016-05-11

    申请号:CN201610099122.X

    申请日:2016-02-23

    IPC分类号: C12N15/53 C12N9/02 C12N1/15

    摘要: 一种双孢蘑菇PPO基因片段,如序列表SEQ ID NO:1所示,该片段在降低PPO酶活性方面的应用按如下四个步骤进行:一是分离克隆双孢蘑菇PPO基因的cDNA片段序列,二是双孢蘑菇PPO基因反义表达载体的构建,三是双孢蘑菇的遗传转化,四是转基因双孢蘑菇PPO酶活性水平和褐变程度的试验与测定。采用本方法获得的转基因双孢蘑菇子实体中PPO酶活性水平下降41%-62%,采后储藏褐变受到抑制,实现了利用反义PPO基因调控PPO酶活性水平,抑制双孢蘑菇采后褐变的目的,应用于改良双孢蘑菇易褐变品质具有广阔的前景。

    一种酶制剂,制备方法及其在降解苏丹红上的应用

    公开(公告)号:CN105274066A

    公开(公告)日:2016-01-27

    申请号:CN201510611552.0

    申请日:2015-12-02

    申请人: 三峡大学

    摘要: 本发明公开了一种降解苏丹红I, II, III, IV的酶制剂及其制备方法。包括如下步骤:(1)将单色云芝菌株由斜面培养基转接入种子液中培养,然后转入装有基础液体培养基的三角瓶中,振荡培养,发酵液经过滤得到菌丝体,菌丝体用磷酸缓冲液洗涤多次,随后收集菌丝体,低温保藏备用;(2)菌丝体加入液氮后研磨成均一粉末,加入磷酸缓冲液,离心后取上清液;(3)将上述粗酶液采用40%硫酸铵沉淀,离心得沉淀即为酶制品。本发明的产品酶制剂为天然来源的产物,具有工艺简单、适合大规模工业化生产等特点,制备的酶制剂可以有效降解苏丹红I, II, III, IV染料,具有降解效率高,降解周期短,降解后的溶液成分简单等特点,具有良好的应用前景。

    一种定点突变改造的基因工程酪氨酸酶

    公开(公告)号:CN104894078A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510252442.X

    申请日:2015-05-18

    申请人: 江南大学

    CPC分类号: C12N9/0059 C12Y110/03001

    摘要: 本发明涉及通过基因工程改造获得的链霉菌酪氨酸酶。本发明所述的一种定点突变改造的基因工程酪氨酸酶,其特征在于所述定点突变的基因工程链霉菌酪氨酸酶氨基酸序列相对于天然的链霉菌酪氨酸酶氨基酸序列的第7位谷氨酰胺突变为赖氨酸,第234位甘氨酸突变为脯氨酸。本发明所述的基因工程链霉菌酪氨酸酶最适温度相对于天然的链霉菌酪氨酸酶提高了10℃,在60℃下的半衰期提高了3倍,为其高效合成黑色素奠定了基础。