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公开(公告)号:CN102405295A
公开(公告)日:2012-04-04
申请号:CN201080003094.8
申请日:2010-03-16
申请人: 松下电器产业株式会社
CPC分类号: C12Q1/6848 , C12Q2525/186 , C12Q2549/119
摘要: 本发明涉及具有高特异性的巢式PCR。本发明提供扩增目的序列1的方法,该方法可高效扩增单链目的序列,以及可显著抑制非特异性扩增。本发明的一实施方式中,在巢式PCR的第2阶段,混合与外侧正向引物(4of)互补、且不会为所述DNA聚合酶引发的DNA延伸反应提供起点的外侧正向封闭核酸(4ofb)。
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公开(公告)号:CN108018370A
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201711340871.8
申请日:2017-12-14
申请人: 广东省生物资源应用研究所
IPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12N15/11
CPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12Q2531/113 , C12Q2549/119 , C12Q2547/101
摘要: 本发明公开了一种冬虫夏草菌培养液中蝙蝠蛾拟青霉的检测引物组、检测试剂盒和检测方法。本发明以冬虫夏草菌培养液的基因组DNA为模板,采用本发明设计的检测引物组,进行2次单管特异PCR反应,通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,判断冬虫夏草菌培养液中蝙蝠蛾拟青霉的存在情况。本发明建立了一种通过常规PCR反应检测冬虫夏草菌培养液中蝙蝠蛾拟青霉的携带情况,只需DNA提取、PCR扩增和电泳检测三步即可完成对样品的检测,操作简单、易于掌握、准确性高,通过本发明的方法可以进一步开发检测试剂盒。本发明为排除携带蝙蝠蛾拟青霉的冬虫夏草菌培养液提供了新的方法,为提高冬虫夏草菌对蝠蛾幼虫的侵染率及其子座形成提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN103917660B
公开(公告)日:2018-03-23
申请号:CN201280031294.3
申请日:2012-05-18
申请人: 丹尼克博投资有限公司 , 曾庆平
IPC分类号: C12Q1/68
CPC分类号: C12Q1/6848 , C12Q2525/155 , C12Q2525/161 , C12Q2549/119
摘要: 本发明提供了通过广谱PCR来检测样品中的低丰度微生物DNA的方法、系统以及组合物。本发明的方法是基于一种新颖的策略,该策略用一种非细菌性标记序列来对靶DNA模板的5'端进行标记,从而使这些模板不同于PCR试剂中存在的内源性污染物。还提供了用于对这些模板和引物集进行标记以扩增这些经过标记的模板的融合探针。还提供了用于使本发明的方法便利并且自动化的系统和试剂盒。
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公开(公告)号:CN107312783A
公开(公告)日:2017-11-03
申请号:CN201710346626.1
申请日:2017-05-17
申请人: 运城学院
CPC分类号: C12N9/001 , C12N15/1096 , C12Y103/01077 , C12Q2531/113 , C12Q2549/119
摘要: 本发明公开了一种树莓花青素还原酶基因的全序列及制作方法,以树莓(Rubus idaeus L.)为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,克隆了树莓花青素还原酶基因(RiANR)的全长cDNA,该cDNA包含大小为1020bp的开放读码框,编码339个氨基酸的蛋白质,理论等电点5.81,理论分子量36413.8D,与原核表达SDS-PAGE电泳检测结果一致。本发明进行了树莓花青素还原酶RiANR基因的克隆与表达分析,为进一步探究树莓原花青素调控机制提供了基础材料,为通过遗传改良获得高原花青素含量的作物新品种提供重要的基因资源。
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公开(公告)号:CN107287304A
公开(公告)日:2017-10-24
申请号:CN201710519746.7
申请日:2017-06-30
申请人: 北京美莱博医学科技有限公司
CPC分类号: C12Q1/6876 , C12Q1/6827 , C12Q2600/156 , C12Q2549/119 , C12Q2527/107
摘要: 本发明提供一种基于HRM检测基因多态性的引物组合物的应用,该引物组合物包括正向引物F、反向引物R、SNP特异引物1和SNP特异引物2;正向引物F和反向引物R用于扩增基因中共有保守序列,正向引物F和SNP特异性引物1用于扩增等位基因1特异性序列,正向引物F和SNP特异性引物2用于扩增基因2特异序列;SNP特异引物1和SNP特异引物2其中之一为5’端增加了GC尾巴的修饰的SNP特异引物。本发明引物组合物应用于基于HRM检侧基因多态性时,其扩增出两个特异性片段,增加了各扩增产物Tm之间的差异,有效排除了假阳性结果,从而提高了结果的特异性和可靠性。
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公开(公告)号:CN106967850A
公开(公告)日:2017-07-21
申请号:CN201710346228.X
申请日:2017-05-17
申请人: 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC分类号: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2549/119
摘要: 本发明公开了一种手足口病混合感染中柯萨奇A组16型病毒的检测方法,该方法通过提取病毒RNA,用肠道病毒A组通用引物EntAF和 EntARo进行RT‑PCR扩增,然后用引物EntAF和EntARi进行半巢式PCR扩增,再根据肠道病毒A组通用引物和CV‑A16序列设计特异CV‑A16上游引物CA16AFO和下游引物CA16ARi,以RT‑PCR产物为模板进行巢式PCR扩增,取扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,即可鉴定。本发明所述方法具有操作简便、检测速度快、准确率高、成本低等优点,特别适用于大规模流行病调查。
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公开(公告)号:CN106868124A
公开(公告)日:2017-06-20
申请号:CN201710088498.5
申请日:2017-02-20
申请人: 昆明理工大学
CPC分类号: C12Q1/6886 , C12Q1/6848 , C12Q1/6858 , C12Q2600/154 , C12Q2523/125 , C12Q2531/113 , C12Q2549/119
摘要: 本发明公开了一种一组甲基化基因及其检测方法,所述一组甲基化基因为p16、DLEC1、CDH1、DAPK及RUNX3基因,DNA基因序列分别为:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5,在肺癌病人血浆游离DNA样品中,上述基因特定CpG位点发生高度甲基化。本发明的这些基因是肺癌生物标志物;可作为设计肺癌诊断试剂的基础,适用于医院肺癌早期辅助检测,可对肺癌高危人群做早期风险评估。
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公开(公告)号:CN106755361A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611110070.8
申请日:2016-12-06
申请人: 西南大学
CPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12Q2549/119
摘要: 本发明涉及一种基于巢式PCR的桑椹小粒性菌核病病原菌早期快速检测方法,包括以下步骤:(1)以CTAB法提取的组织样品DNA作为模板,采用通用引物ITS1/ITS4进行第一轮PCR扩增;(2)以第一轮产物为模板进行第二轮PCR扩增,巢式引物采用肉阜状杯盘菌的特异性引物,序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;(3)根据步骤(2)的扩增条带诊断桑椹小粒性菌核病。本发明的检测方法具有极佳的准确性及特异性,并大大提高了检测灵敏度。
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公开(公告)号:CN106434999A
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201611110715.8
申请日:2016-12-06
申请人: 西南大学
CPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12Q2549/119
摘要: 本发明涉及一种基于巢式PCR的桑椹缩小性菌核病病原菌早期快速检测方法,包括以下步骤:(1)以CTAB法提取的组织样品DNA作为模板,采用通用引物ITS1/ITS4进行第一轮PCR扩增;式引物采用核地杖菌的特异性引物,序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;(3)根据步骤(2)的扩增条带诊断桑椹缩小性菌核病。本发明的检测方法具有极佳的准确性及特异性,并大大提高了检测灵敏度。(2)以第一轮产物为模板进行第二轮PCR扩增,巢
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公开(公告)号:CN106283201A
公开(公告)日:2017-01-04
申请号:CN201610835573.5
申请日:2016-09-20
申请人: 中国医学科学院肿瘤医院
IPC分类号: C40B50/06
CPC分类号: C12Q1/6869 , C40B50/06 , C12Q2525/191 , C12Q2549/119 , C12Q2535/122
摘要: 本发明涉及构建TRB基因的可变区(V区)的测序文库的方法,和用于该方法的试剂盒。进一步地,所述测序文库通过应用新一代测序技术来对TCR免疫库中的TRB基因V区表达信息进行快速方便、低成本的检测和鉴定。
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