冬虫夏草菌培养液中蝙蝠蛾拟青霉的检测引物组、检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN108018370A

    公开(公告)日:2018-05-11

    申请号:CN201711340871.8

    申请日:2017-12-14

    发明人: 刘桂清 韩日畴

    摘要: 本发明公开了一种冬虫夏草菌培养液中蝙蝠蛾拟青霉的检测引物组、检测试剂盒和检测方法。本发明以冬虫夏草菌培养液的基因组DNA为模板,采用本发明设计的检测引物组,进行2次单管特异PCR反应,通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,判断冬虫夏草菌培养液中蝙蝠蛾拟青霉的存在情况。本发明建立了一种通过常规PCR反应检测冬虫夏草菌培养液中蝙蝠蛾拟青霉的携带情况,只需DNA提取、PCR扩增和电泳检测三步即可完成对样品的检测,操作简单、易于掌握、准确性高,通过本发明的方法可以进一步开发检测试剂盒。本发明为排除携带蝙蝠蛾拟青霉的冬虫夏草菌培养液提供了新的方法,为提高冬虫夏草菌对蝠蛾幼虫的侵染率及其子座形成提供技术支撑。

    树莓花青素还原酶基因的全序列及其制作方法

    公开(公告)号:CN107312783A

    公开(公告)日:2017-11-03

    申请号:CN201710346626.1

    申请日:2017-05-17

    申请人: 运城学院

    IPC分类号: C12N15/53 C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种树莓花青素还原酶基因的全序列及制作方法,以树莓(Rubus idaeus L.)为材料,采用RT-PCR和RACE技术相结合的方法,克隆了树莓花青素还原酶基因(RiANR)的全长cDNA,该cDNA包含大小为1020bp的开放读码框,编码339个氨基酸的蛋白质,理论等电点5.81,理论分子量36413.8D,与原核表达SDS-PAGE电泳检测结果一致。本发明进行了树莓花青素还原酶RiANR基因的克隆与表达分析,为进一步探究树莓原花青素调控机制提供了基础材料,为通过遗传改良获得高原花青素含量的作物新品种提供重要的基因资源。

    一种基于HRM检测基因多态性的引物组合物的应用

    公开(公告)号:CN107287304A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710519746.7

    申请日:2017-06-30

    发明人: 廖翔 李洪波

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明提供一种基于HRM检测基因多态性的引物组合物的应用,该引物组合物包括正向引物F、反向引物R、SNP特异引物1和SNP特异引物2;正向引物F和反向引物R用于扩增基因中共有保守序列,正向引物F和SNP特异性引物1用于扩增等位基因1特异性序列,正向引物F和SNP特异性引物2用于扩增基因2特异序列;SNP特异引物1和SNP特异引物2其中之一为5’端增加了GC尾巴的修饰的SNP特异引物。本发明引物组合物应用于基于HRM检侧基因多态性时,其扩增出两个特异性片段,增加了各扩增产物Tm之间的差异,有效排除了假阳性结果,从而提高了结果的特异性和可靠性。

    基于巢式PCR的桑椹小粒性菌核病病原菌早期快速检测方法

    公开(公告)号:CN106755361A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611110070.8

    申请日:2016-12-06

    申请人: 西南大学

    发明人: 徐立 向伟

    摘要: 本发明涉及一种基于巢式PCR的桑椹小粒性菌核病病原菌早期快速检测方法,包括以下步骤:(1)以CTAB法提取的组织样品DNA作为模板,采用通用引物ITS1/ITS4进行第一轮PCR扩增;(2)以第一轮产物为模板进行第二轮PCR扩增,巢式引物采用肉阜状杯盘菌的特异性引物,序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;(3)根据步骤(2)的扩增条带诊断桑椹小粒性菌核病。本发明的检测方法具有极佳的准确性及特异性,并大大提高了检测灵敏度。

    基于巢式PCR的桑椹缩小性菌核病病原菌早期快速检测方法

    公开(公告)号:CN106434999A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201611110715.8

    申请日:2016-12-06

    申请人: 西南大学

    发明人: 徐立 向伟 陈伟

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/04 C12N15/11

    摘要: 本发明涉及一种基于巢式PCR的桑椹缩小性菌核病病原菌早期快速检测方法,包括以下步骤:(1)以CTAB法提取的组织样品DNA作为模板,采用通用引物ITS1/ITS4进行第一轮PCR扩增;式引物采用核地杖菌的特异性引物,序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;(3)根据步骤(2)的扩增条带诊断桑椹缩小性菌核病。本发明的检测方法具有极佳的准确性及特异性,并大大提高了检测灵敏度。(2)以第一轮产物为模板进行第二轮PCR扩增,巢