公开(公告)号：CN101407548B

公开(公告)日：2012-05-30

申请号：CN200810227449.6

申请日：2008-11-25

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  谭伟明 ,  南铁贵 ,  何素平 ,  刘威 ,  赵洪伟 ,  高巍 ,  李召虎

IPC: C07K17/14

Abstract: 本发明公开了一种制备修饰有抗体的微悬臂梁的方法。本发明所提供的制备修饰有抗体的微悬臂梁的方法，是以盐酸硫醇亚胺为巯基化试剂，将抗体巯基化，再将所述巯基化抗体固定到微悬臂梁的金膜上，得到修饰有抗体的微悬臂梁。结果表明，通过巯基化试剂-盐酸硫醇亚胺的引入，本发明的制备修饰有抗体的微悬臂梁的方法与现有的方法相比具有反应时间短、操作简单、抗体活性损失少等优点。

公开(公告)号：CN102199211A

公开(公告)日：2011-09-28

申请号：CN201110090869.6

申请日：2011-04-12

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  谭桂玉 ,  南铁贵 ,  赵洪伟 ,  高巍 ,  王敏 ,  孙硕 ,  曹振 ,  李召虎

IPC: C07K16/38 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  G01N21/31 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了检测豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法及其专用酶联免疫试剂盒。本发明所提供的酶联免疫试剂盒含有豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体；所述豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体，是由保藏编号为CGMCC No.4617的豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体杂交瘤细胞株CpTI 3D6分泌产生的。本发明应用抗CpTI多克隆抗体及酶标记抗CpTI单克隆抗体，采用双抗夹心ELISA方法进行试剂盒制备，并应用制备的试剂盒鉴定转基因作物真伪，具有快速、灵敏的优点。

公开(公告)号：CN101935348A

公开(公告)日：2011-01-05

申请号：CN201010259874.0

申请日：2010-08-20

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  曹振 ,  赵洪伟 ,  南铁贵 ,  高巍 ,  谭桂玉 ,  王敏 ,  孙硕 ,  李召虎

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/566

Abstract: 本发明公开了一种铅离子抗原及其制备方法与应用。本发明提供的制备铅离子抗原的方法，包括如下步骤：1)将螯合剂溶解于酸的水溶液中，再向其中加入亚硝酸盐水溶液，进行重氮化反应，得到重氮化的螯合剂；2)将步骤1)得到的重氮化的螯合剂和载体蛋白溶液混合，进行偶联反应，得到所述螯合剂与载体蛋白的偶联物；3)将步骤2)得到的所述螯合剂与载体蛋白的偶联物与铅离子的溶液混合，进行络合反应，得到螯合剂与载体蛋白的偶联物与铅离子形成的络合物。本发明的制备铅离子抗原的方法及由该方法获得的铅离子抗原在铅离子的快速免疫检测应用中将有广阔的前景。

公开(公告)号：CN101914152A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010259922.6

申请日：2010-08-20

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  南铁贵 ,  赵洪伟 ,  谭桂玉 ,  高巍 ,  谭伟明 ,  李召虎

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种汞离子抗原及其制备方法与应用。本发明提供的方法包括如下步骤：1)活化4-巯基苯基乙酸，得到活化的4-巯基苯基乙酸；2)将步骤1)得到的活化的4-巯基苯基乙酸与载体蛋白偶联，得到活化的4-巯基苯基乙酸与载体蛋白的偶联物；3)将步骤2)得到的所述活化的4-巯基苯基乙酸与载体蛋白的偶联物与汞离子螯合，得到所述偶联物和汞离子的螯合物，即得到汞离子抗原。本发明的制备汞离子抗原的方法能够方便、快捷地获得汞离子抗原，且合成步骤简洁明了、合成成本低，效果好。

公开(公告)号：CN101445557A

公开(公告)日：2009-06-03

申请号：CN200810239765.5

申请日：2008-12-16

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  高巍 ,  南铁贵 ,  何素平 ,  赵洪伟 ,  刘威 ,  谭桂玉 ,  谭伟明 ,  李召虎

IPC: C07K14/765 ,  C07K14/795 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种镉离子抗原及其制备方法与应用。该镉离子抗原，是螯合剂与载体蛋白的偶联物与镉离子形成的络合物。该制备镉离子抗原的方法，包括如下步骤：(1)将螯合剂重氮化，得到重氮化的螯合剂；(2)将载体蛋白与所述重氮化的螯合剂混合，进行偶联反应，得到载体蛋白与重氮化的螯合剂的偶联物；(3)将镉离子与所述偶联物混合，进行络合反应，得到镉离子抗原。利用本发明的方法能方便快捷地获得镉离子抗原，成本低，效果好。用本发明方法制得的完全抗原进行免疫得到的抗体的特异性好、最低检测限值低。因此，本发明方法及由该方法获得的抗原在镉离子的酶联免疫检测中会有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN1900269A

公开(公告)日：2007-01-24

申请号：CN200510085280.1

申请日：2005-07-22

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李召虎 ,  章家长 ,  段留生 ,  张明才 ,  田晓莉 ,  王保民 ,  焦睿 ,  吴惠玲

IPC: C12N1/20 ,  C12N13/00

Abstract: 本发明涉及一种用于生产冠菌素的丁香假单孢菌大豆致病变种(P.syringae pv.Glycinea)基因工程菌株及其构建方法。该工程菌株是利用亚硝基胍诱变处理出发菌株，使其产生基因突变，从而筛选冠菌素产量高的菌株。试验证实本发明基因工程菌株可在发酵温度为18℃的条件下用于工业化发酵生产冠菌素，产量可达84.7mg/L－112mg/L。

公开(公告)号：CN1775809A

公开(公告)日：2006-05-24

申请号：CN200510130058.9

申请日：2005-12-12

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  俞彩霞 ,  赵静 ,  李召虎 ,  何钟佩 ,  何素平 ,  刘威 ,  邓艾兴

IPC: C07K17/02 ,  C07K14/765 ,  C07K16/18 ,  A61K39/395

Abstract: 本发明公开了一种Bt Cry1A抗体及其制备方法与专用抗原及应用，其目的是提供一种Bt Cry1A抗体及其制备方法与专用抗原及其在制备Bt免疫检测试剂盒中的应用。制备Bt Cry1A抗体的专用抗原，是将具有序列表中SEQ ID №：1的氨基酸残基序列的多肽与载体蛋白联结得到。Bt Cry1A抗体，是用所述专用抗原免疫动物，再从所免疫的动物中分离、纯化血清得到Bt Cry1A抗体。该抗体具有下述优点：1)具有较高的特异性，检测灵敏度可达52.7ng·mL－1，可用于转Bt植物(如棉花、玉米、水稻、烟草等)中毒蛋白的定性、定量分析；2)制备方法简单，具有工业化生产的可行性。本发明将在转Bt植物的生物检测领域发挥重要作用，具有广阔的市场前景。

公开(公告)号：CN1673353A

公开(公告)日：2005-09-28

申请号：CN200510011466.2

申请日：2005-03-23

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 李召虎 ,  张家常 ,  段留生 ,  李建民 ,  田晓莉 ,  王保民 ,  焦睿 ,  吴惠玲 ,  何钟佩 ,  翟志席 ,  奚勤

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/78 ,  C12P1/04

Abstract: 本发明涉及一种基因工程菌(丁香假单胞菌大豆致病变种CGMCC 1276)、其构建方法及其用途。该工程菌是利用Tn5转座子S17－1插入到出发菌的基因组中，使其温度控制基因失活而获得的。该菌株可在发酵温度为26℃－28℃的条件下用于工业化发酵生产冠菌素。产量与出发菌(发酵温度为18℃)相近，可达35mg/l－40mg/l。

公开(公告)号：CN1558238A

公开(公告)日：2004-12-29

申请号：CN200410000689.4

申请日：2004-01-16

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 王保民 ,  赵静 ,  李召虎 ,  何钟佩 ,  段留生 ,  田晓莉 ,  李刚 ,  殷俐娜 ,  俞彩霞

IPC: G01N33/532 ,  G01N33/547

Abstract: 本发明公开了一种酶联免疫测定中的四甲基联苯胺贮液。本发明所提供的酶联免疫测定中的四甲基联苯胺贮液是四甲基联苯胺和硫代硫酸钠的二甲基亚砜(DMSO)溶液。本发明的四甲基联苯胺贮液可在4℃贮存6个月，不仅方便了酶联免疫测定的操作，也节约了资金，具有重要的意义。

公开(公告)号：CN107356759A

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201710645436.X

申请日：2017-08-01

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 周立刚 ,  王保民 ,  傅小香 ,  赖道万 ,  王晓晗

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/535

CPC classification number: G01N33/577 ,  G01N33/535

Abstract: 本发明公开了一种同时检测稻曲菌素A和稻曲菌素B的方法及其专用酶联免疫试剂盒。方法及试剂盒所使用的单克隆抗体是由小鼠杂交瘤细胞系4C4F11分泌产生的，小鼠杂交瘤细胞系4C4F11在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.14309。本发明所提供的单克隆抗体能同时识别稻曲菌素A和稻曲菌素B，利用该单克隆抗体制备得到的酶联免疫试剂盒可用于定性或定量同时检测出样品中稻曲菌素A和稻曲菌素B，线性检测范围在2～76ng/mL，具有快速、灵敏的优点。本发明在农业、畜牧业和食品工业均有广阔的应用前景，预期能创造较大的经济效益。