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公开(公告)号:CN110093318B
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN201910344592.1
申请日:2019-04-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种稳定表达仓鼠TIGAR基因的BHK细胞系及其构建方法和应用,该细胞系含有TIGAR基因,保藏号为CCTCC NO:C201928。通过先扩增仓鼠TIGAR基因并构建质粒;再将构建的质粒与PAX、PMD2G质粒同时转入293T细胞,形成包装好的慢病毒;将其感染BHK细胞后,进行药物筛选,然后扩大培养,即得所述细胞系。该细胞系可增加细胞抗凋亡能力,从而延长细胞存活时间,提高新城疫在细胞中的病毒滴度;并成功构建筛选适合新城疫病毒繁殖的高产细胞株。
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公开(公告)号:CN112342244A
公开(公告)日:2021-02-09
申请号:CN202011211170.6
申请日:2020-11-03
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达Furin蛋白的细胞株及其在禽传染性支气管炎病毒培养中的应用,所述表达Furin蛋白的细胞株为基因组中整合有鸡源Furin基因的哺乳动物细胞,所述鸡源Furin基因通过慢病毒导入哺乳动物细胞。本发明的表达Furin蛋白的细胞株可用于多株IBV的体外培养,克服了现有技术中大多数IBV毒株无法在哺乳动物细胞内生长的技术难题,简化了病毒的扩繁过程,也消除了可能因感染其他禽类而带来的生物隐患,在基础研究及疫苗研发中具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号:CN111621480A
公开(公告)日:2020-09-04
申请号:CN202010409254.4
申请日:2020-05-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明属于生物检测方法领域,涉及新城疫病毒(NDV)感染子宫颈癌细胞系HeLa细胞后所产生的外泌体(exosome)的纯化和检测方法。本发明的exosome纯化方法,依次包括下列步骤:(1)将含有待测exosome的细胞上清液以10000g-12000g的速度离心20-35min;(2)取上清以135000g-145000g的速度离心90-100min。本发明的检测方法包括:透射电子显微镜确定exosome形态;exosome表面标志性蛋白CD63的确定;exosome大小、浓度分析。本发明可用于纯化和检测NDV感染HeLa细胞后产生exosome,为研究exosome在病毒感染中的作用奠定基础。
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公开(公告)号:CN111411126A
公开(公告)日:2020-07-14
申请号:CN202010230130.X
申请日:2020-03-27
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/867 , C12N7/01 , C12N5/10 , C12Q1/02
Abstract: 本发明提供了一种G3BP1重组慢病毒载体及其应用,所述重组慢病毒载体包括插入有外源G3BP1基因的慢病毒载体;所述慢病毒载体包括pLenti-CMV-GFP-EF1a-Puro。本发明基于人源G3BP1基因和载体pLenti-CMV-GFP-EF1a-Puro,扩增了人源G3BP1基因DNA序列,成功构建pLenti-GFP-G3BP1重组慢病毒载体,并利用慢病毒包装系统成功构建稳定表达GFP-G3BP1蛋白的HeLa细胞系,在探究应激刺激调控SG形成机制方面具有重要意义。
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公开(公告)号:CN108546302A
公开(公告)日:2018-09-18
申请号:CN201810394542.X
申请日:2018-04-27
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种复合多表位表达盒、其组成的重组病毒及应用,尤其涉及一种新城疫病毒插入IBV表位盒嵌合重组病毒和采用这个病毒制备的疫苗,所述表达盒包含有:(a)来源于鸡传染性支气管炎病毒Holte株和鸡传染性支气管炎病毒QX样株的S1蛋白的T细胞表位;(b)来源于鸡传染性支气管炎病毒澳大利亚T株的S1蛋白的B细胞表位。本发明将鸡传染性支气管炎病毒的多表位嵌合S-T/B基因插入至LaSota株的骨架中,使得LaSota株可以表达S1-T/B蛋白,可达到同时预防ND和IB两种疫病的目的,且T细胞表位和B细胞表位协同增效,使得病毒免疫时间更早,免疫反应更全面。
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公开(公告)号:CN105949321A
公开(公告)日:2016-09-21
申请号:CN201610290210.8
申请日:2016-05-04
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , A61K39/215 , A61P31/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了鸡传染性支气管炎病毒Shanghai 1208分离株S1蛋白B细胞线性抗原表位多肽,属于基因和蛋白质工程领域。本发明还提供B细胞表位多肽联合使用,可用于制备IBV多表位疫苗。本发明的IBV B细胞抗原表位能够引起高水平的免疫应答反应。
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公开(公告)号:CN103361376B
公开(公告)日:2015-02-04
申请号:CN201210100921.6
申请日:2012-04-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体及其构建方法和应用。本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体,其核苷酸序列为:SEQIDNO:1。本发明还公开了一种鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体构建方法和应用。本发明构建的鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体pRES能在鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌中稳定存在和复制,携带的外源基因可在鸭疫里默氏杆菌中稳定表达,可用于鸭疫里默氏杆菌缺失突变株的互补试验、重组鸭疫里默氏杆菌疫苗的研制等,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN103361376A
公开(公告)日:2013-10-23
申请号:CN201210100921.6
申请日:2012-04-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体及其构建方法和应用。本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体,其核苷酸序列为:SEQIDNO:1。本发明还公开了一种鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体构建方法和应用。本发明构建的鸭疫里默氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达载体pRES能在鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌中稳定存在和复制,携带的外源基因可在鸭疫里默氏杆菌中稳定表达,可用于鸭疫里默氏杆菌缺失突变株的互补试验、重组鸭疫里默氏杆菌疫苗的研制等,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN102453771A
公开(公告)日:2012-05-16
申请号:CN201110256049.X
申请日:2011-09-01
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及一种1型鸭病毒性肝炎RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。本发明公开了1型鸭病毒性肝炎RT-LAMP检测试剂盒,其特征在于其包含2对引物,它们的核酸序列如SEQIDNO.1-4所示。本发明所述检测试剂盒及其检测方法具有快速、敏感、特异、成本低和操作简单的特点,能较好的弥补当前鸭病毒性肝炎检测方法上的不足,可以满足当前该病的检测需求,易于大范围推广应用,可减少该病在鸭等动物中的流行,具有广阔的市场前景和较大的经济效益。
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公开(公告)号:CN101935696A
公开(公告)日:2011-01-05
申请号:CN201010138082.8
申请日:2010-04-01
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明提供检测犬猫钩端螺旋体的荧光定量PCR方法及其引物和检测试剂盒,其采用16s rRNA基因序列为设计引物,上游引物:5’-ACGAAAGCGTGGGTAGTG-3’;下游引物:5’-GCGGTCTACTTAATCCGT-3’。本发明基于16s rRNA基因建立了鉴定犬猫钩端螺旋体的SYBR Green I荧光定量PCR方法。在最佳反应条件下反应效率为0.98,获得的标准曲线相关系数R值达1.000,标准曲线的线性范围达到1~1×107拷贝8个数量级,最低可检测到约1个目的拷贝,即1.2fg DNA。本发明建立的SYBR Green I荧光定量方法具有特异性强、灵敏度高、定量范围广的特点。
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