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公开(公告)号：CN104152473B
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201410405272.X
申请日：2014-08-18
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草类胡萝卜素异构酶基因，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示。在烟草中，本发明克隆了一个类胡萝卜素合成关键基因NtCRTISO，抑制该基因表达可以有效提高烟叶类胡萝卜素含量，并且提高烟株抵御光抑制的能力。本发明揭示了烟草中CRTISO基因在类胡萝卜素合成中的重要功能，对类胡萝卜素组成的调控起着至关重要的作用，寻找了一种提高烟草类胡萝卜素含量的方法，尤其是β‑胡萝卜素，为植物分子改良提供了良好的理论指导。
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公开(公告)号：CN104152474B
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201410405713.6
申请日：2014-08-18
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草番茄红素β环化酶基因，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示。本发明研究了Ntβ‑LCY基因在烟草不同时期不同器官中的转录水平表达模式，发现该基因主要表达在幼叶中；利用OE和RNAi两种方法研究了Ntβ‑LCY基因在表达量变化情况下对烟草植株生长发育情况及色素含量的影响，分析了Ntβ‑LCY基因在烟草中的重要功能。首先是先得到基因，可以明确而有针对性地对该基因开展研究；其次是采用稳定的转基因技术分析基因功能。
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公开(公告)号：CN105861545B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201610267370.0
申请日：2016-04-27
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于植物基因工程领域，涉及一种提高烟草中类黄酮含量并提升烟草抗旱性的方法，具体涉及在烟草K326中过表达查尔酮合成酶（CHS）基因，从而提高烟草中类黄酮含量并提升烟草抗旱性。检测结果表明过表达CHS基因烟草中的类黄酮含量（芦丁、槲皮素、山奈酚苷、紫云英苷、柚皮苷、柚皮素、异甘草素）明显高于对照烟草；干旱处理旺长期烟草14天，通过观察表型、测定相对含水率、测定MDA含量，测定H2O2含量等方法验证转基因烟草的耐旱性，结果表明过表达CHS基因烟草的耐旱性显著强于普通烟草。
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公开(公告)号：CN105420258B
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201510989402.3
申请日：2015-12-24
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院 , 郑州大学
IPC分类号： C12N15/55 , C12N15/29 , C12N15/10 , C12Q1/6895
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及烟草ATP synthase内参基因的克隆方法及其应用。本发明所获得的ATP synthase基因的部分核苷酸序列可作为研究烟草功能基因或不同组织、不同生长发育阶段以及不同激素处理条件下的基因表达分析的内参基因。利用该内参基因设计的实时荧光定量PCR引物扩增特异性强，能够提高烟草基因表达分析研究的稳定性、可靠性和重复性。
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公开(公告)号：CN109266677A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201811009521.8
申请日：2018-08-31
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种酵母双杂交文库构建方法专利申请事宜。该方法用于烟草基因组全长转录因子文库构建，具体包括：转录因子筛选及开放阅读框全长扩增引物设计、制备cDNA模板、PCR扩增、磷酸化处理、连接重组接头、构建全长转录因子的文库质粒、质粒转化并构建文库等步骤。本申请所提供全长转录因子酵母双杂交文库构建方法，是对现有构建方法的进一步综合性改进，具有转录因子阳性筛选率高、筛选准确性高、所构建文库质量高等优点，同时由于对于相关操作步骤有所优化，因而能够节省构建时间和构建成本，因此具有较好的实用价值和推广应用意义。
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公开(公告)号：CN109247306A
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201811389386.4
申请日：2018-11-21
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： A01K67/033
摘要： 本申请属于烟草害虫防治技术领域，具体涉及一种烟草甲饲养分离装置及利用该装置的雌雄成虫分离方法。该装置主体为一柱状饲养瓶；饲养瓶顶部设有网纱式透气瓶盖；饲养瓶瓶身底部为一双层底盖结构，内层底盖可活动或固定设于饲养瓶瓶身底部，同时内层底盖的底部设有若干孔洞，外层底盖活动套设于饲养瓶瓶身上，实现对内层底盖和饲养瓶瓶底的密封；饲养瓶中部设有若干分支管道，分支管道前端设有密封板。本申请装置针对烟草甲的饲养及分离工作特定设计而成，通过饲喂条件、培养条件的优化，以及分离方式的调整，不仅较好保证了烟草甲的羽化成虫率，同时避免了对于虫体的额外伤害，较好提高了雌虫、雄虫的分离收集效率。
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公开(公告)号：CN108220328A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201711351623.3
申请日：2017-12-15
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院 , 河南大学
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种简便、快速的筛选、鉴定利用基因组编辑技术创建的纯合突变体的方法。该方法用于筛选与鉴定利用CRISPR/Cas9系统创建的纯合突变体，包括构建CRISPR/Cas9系统载体、转化植物体、利用MSBSP‑PCR筛选纯合突变体等步骤。本申请主要技术思路为：CRISPR/Cas9系统创制的突变体中，相比较于野生型的DNA，PCR反应获得少量的产物或者不能得到产物。另一方面，本申请采用的是两轮PCR，第一轮PCR的产物作为第二轮PCR的模板，可以避免基因组DNA复杂性对产物的影响，提高了PCR方法鉴定CRISPR/Cas9系统创制突变体的效率。
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公开(公告)号：CN107354206A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710557631.7
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明涉及用于鉴定烤烟南江3号的引物组合及试剂盒、应用及检测方法，属于烟草品种鉴定技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟南江3号的特异性SNP标记共12个；并对比栽培烟草参考基因组获得的12个SNP位点侧翼序列，其序列如SEQ ID NO:1～12所示，基于该序列设计引物；利用设计的引物，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对这些位点进行分型检测。根据检测结果获得SNP分型结果，鉴定样品是否为南江3号，本发明的检测方法检测时，需用的检测样品量少，检测通量高，鉴定结果准确。
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公开(公告)号：CN107354205A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710557625.1
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明涉及用于鉴定烤烟中烟100的引物组合及试剂盒、应用及检测方法，属于烟草品种鉴定技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟中烟100的特异性SNP标记共13个，并对比栽培烟草参考基因组获得的13个SNP位点侧翼序列，其序列如SEQ ID NO:1～13所示，基于该序列设计引物；利用设计的引物，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对这些位点进行分型检测。根据检测结果获得SNP分型结果，鉴定样品是否为中烟100，本发明的检测方法检测时所需检测样品量少，检测通量高，鉴定结果准确。
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公开(公告)号：CN107354202A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710557191.5
申请日：2017-07-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明公开了一种用于鉴定烤烟K326的引物组合及试剂盒、应用及鉴定方法，属于生物分子鉴别技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型，根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟K326的特异性SNP标记共10个，其物理位置基于栽培烟草品种红花大金元的全基因组序列比对确定，包含SNP位点的序列如SEQ ID NO:1～10所示。针对烤烟K326的SNP位点侧翼序列，根据检测方法的不同设计相应引物，可用于烤烟K326的品种鉴定。本发明基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立了一套烤烟K326鉴定方法，检测周期短、通量高，结果准确。
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