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公开(公告)号:CN107630028A
公开(公告)日:2018-01-26
申请号:CN201710961430.3
申请日:2017-10-17
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种恩拉霉素高产菌株筛选方法,具体步骤如下:确定恩拉霉素生物合成过程中的限速酶编码基因短板基因;构建硫链丝菌素抗性基因整合型载体;对改造后的菌株进行诱变处理,并从中筛选硫链丝菌素高抗性菌株;对筛选到的高抗菌株进行遗传操作,并将tsr开放阅读框恢复为原来的endX基因;所得菌株既为恩拉霉素高产突变菌株。本方法结合了传统的诱变育种技术以及现代分子生物学方法的优势,实现了恩拉霉素高产菌株的快速高效筛选,该方法也适用于其它抗生素高产菌株的筛选。
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公开(公告)号:CN107245494A
公开(公告)日:2017-10-13
申请号:CN201710499265.4
申请日:2017-06-27
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明属于生物技术和基因工程技术领域,具体为Aβ42在大肠杆菌中的高效可溶性表达及纯化方法。本发明构建的Aβ42表达体系提供了原核生物可溶性融合表达人淀粉样蛋白Aβ42的表达载体的构建方法,并将表达载体导入至大肠杆菌表达宿主中,经诱导表达、蛋白酶切、两步纯化及鉴定后获得具有高纯度生物活性的目标Aβ42。本方法所采用的大肠表达系统及融合蛋白,具有表达效率高、表达量大、成本低、易操作等特点,所表达的Aβ42多肽不含任何残基、纯度高、产率高等优点。
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公开(公告)号:CN106916855A
公开(公告)日:2017-07-04
申请号:CN201710115621.8
申请日:2017-03-01
申请人: 天津科技大学
CPC分类号: C12P7/22 , C12N9/0008 , C12N9/1288 , C12N9/88 , C12N15/70 , C12P7/24 , C12Y102/99 , C12Y207/08007 , C12Y401/01061 , C12Y401/01091
摘要: 本发明公开了一种利用CO2生物转化法对酚类物质进行修饰的方法。它是利用基因工程菌将CO2结合到酚类物质的芳环上得到羟基苯甲酸及衍生物,并将酚类加羧后生成的羧基还原,生成相应的醛或醇。本发明的方法不仅可以充分减少碳的排放,而且从技术上避免其它碳源的加入引入固体或液体杂质,可以缩短合成步骤,减轻分离负担,因此从经济上更加合算。
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公开(公告)号:CN105039382A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510458924.0
申请日:2015-07-30
摘要: 本发明涉及一种恩拉霉素高产菌株的构建方法及相关基因和菌株;相关基因序列如序列1所示,同时提供含有如权利要求所述的恩拉霉素产量高且链霉素抗性好的基因工程菌株P1。本发明首先针对目前工业生产用恩拉霉素产生菌P建立并优化了出一套简便易行的遗传转化体系,并首次利用定点突变技术对该菌株中的核糖体蛋白(S12)编码基因rpsl进行了定点改造,同时对改造后菌株的产素水平及生理生化特性进行了研究。结果显示:工程菌Streptomyces fungicidicus P1的恩拉霉素产量与原始菌株相比提高了约20﹪,同时该菌株对链霉素的抗性提高了至少10倍。
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公开(公告)号:CN104818225A
公开(公告)日:2015-08-05
申请号:CN201510105290.0
申请日:2015-03-10
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种低温蛋白酶生产菌及该菌产生的低温蛋白酶和该酶的基因,首次从南印度洋深海沉积物中分离到一株产低温蛋白酶动性球菌Planococcus sp.菌种保藏编号为:CGMCC No.8088,菌株的最适生长温度及最佳产酶温度均为20℃,发酵水平的蛋白酶产量可达280U/mL;该菌株所产蛋白酶的最适作用温度为在30~37℃之间,最适pH为7.5~9.0,30℃条件下可保持最高催化活力的80%以上,而在20~25℃之间仍具有较高的催化活力;该菌株所产蛋白酶属于典型的低温碱性蛋白酶,在常温下具有较好的催化活性,因此在食品加工业及冷水洗涤剂开发等方面具有较高的研究价值。
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公开(公告)号:CN104745614A
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201510104041.X
申请日:2015-03-10
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种新型低温蛋白酶编码基因及其在大肠杆菌中的功能表达,本发明从动性球菌Planococcus sp.11815中克隆到一段新型低温蛋白酶编码基因cpls8,序列分析表明:该基因所编码的蛋白序列共含有329个氨基酸残基,属S8家族丝氨酸蛋白酶,与目前数据库中已发表蛋白序列的最高源性仅为77%。该基因在E.coil Rosseta(DE3)实现了功能表达,酶学性质分析表明:其最适催化pH值为10,最适催化温度为37℃左右,在20~30℃之间可保持最高酶活的50%以上,因此属典型的低温碱性蛋白酶,在洗涤、食品、医药等领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103290048A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310262705.6
申请日:2013-06-27
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种适用于芽孢杆菌属同源重组的质粒及工程菌,包括序列8的线性片段。所述质粒以16SrDNA的序列作为同源臂,同源臂之间为卡那抗性筛选标记基因、P43启动子、多克隆位点、终止序列。本发明的质粒可以将各种目的基因整合在芽孢杆菌属各种菌上,并可以获得含有不同拷贝数目的基因的转化子,实现目的基因在芽孢杆菌属的稳定高效表达。此外,我们利用此质粒构建了pKD314-apr4M重组质粒,并且通过同源重组方法获得了含有不同拷贝数稳定高产的工程菌。
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公开(公告)号:CN118374560A
公开(公告)日:2024-07-23
申请号:CN202410833181.X
申请日:2024-06-26
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及微生物技术领域,公开了一种发酵粘液乳杆菌胞外多糖及其制备方法和应用,所述制备方法包括:将发酵粘液乳杆菌培养于发酵培养基中,从培养产物中分离胞外多糖;所述发酵培养基中包括乙酸盐、葡萄糖,以质量计,所述乙酸盐和葡萄糖的质量比为(4份‑6份):(19份‑21份)。本发明方法能刺激发酵粘液乳杆菌产生胞外多糖,且获得胞外多糖能缓解肥胖和便秘。
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公开(公告)号:CN110982800B
公开(公告)日:2023-04-28
申请号:CN201911004163.6
申请日:2019-10-22
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种磺酰基转移酶、应用及其介导的氮丙啶环生物合成方法,步骤为:将底物、3'‑磷酸腺苷‑5'‑磷酸硫酸及磺酰基转移酶用PBS缓冲液稀释到相应的浓度:在25‑42℃下反应20min‑2h,然后加入0.5mol/L的NaOH调节使体系pH为10.0以上,生成氮丙啶环化合物。本发明首次利用磺酰基转移酶生物催化合成了氮丙啶三元环,确定了酶催化合成氮丙啶环的基本反应条件,并建立了一套氮丙啶环的体外催化合成体系,为进一步通过组合生物合成的方式获得更多的具有良好成药前景的氮丙啶类结构衍生物奠定理论基础。同时也为实现氮丙啶类药物中间体的绿色合成与制造提供理论依据。
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