-
公开(公告)号：CN109943546B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201910292294.2
申请日：2019-04-12
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种谷氨酰胺转氨酶及其制备方法和应用。本发明通过提取枯草芽胞杆菌ATCC 23857基因组DNA，PCR扩增得到野生型带有酶原区的谷氨酰胺转氨酶btg基因序列，将扩增得到的野生型btg基因通过易错PCR进行随机突变，获得了一个突变体基因btgm。将突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型谷氨酰胺转氨酶。
-
公开(公告)号：CN111334494A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN201910951895.X
申请日：2019-10-09
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，涉及新型的高稳定性碱性蛋白酶突变体的筛选。本发明通过易错PCR技术筛选获得了克劳氏芽孢杆菌来源碱性蛋白酶的高稳定性突变体。这些突变体基因经测序发现分别在第747-749位为GAT，第859-861位为GTT，第955-957位为CTG，相应的氨基酸序列突变分别是在第165位突变为Asp，第203位为Val和第235位为Leu。发酵48h后，突变体发酵液的酶活力分别为30U/mL、41U/mL和35U/mL，比野生型碱性蛋白酶aprE重组菌株表达的发酵液的酶活力分别提高了11％、51％和30％。将得到的发酵液进行超滤纯化后在40℃恒温孵育48h后，碱性蛋白酶突变体的酶活保留率比野生型碱性蛋白酶的酶活提高了30％、88％、42％。这些高稳定性碱性蛋白酶突变体的筛选，有助于改善碱性蛋白酶的储存和应用效果。
-
-
公开(公告)号：CN106676081B
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201611206571.6
申请日：2016-12-23
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及通过易错PCR技术体外定向进化获得酶活提高的磷脂酶B突变体，及利用其制备甘油磷脂酰胆碱以及油脂脱胶的方法。得到磷脂酶B突变体PLBM，酶活较野生型磷脂酶B的酶活提高了25％。
-
公开(公告)号：CN110305934A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910730740.3
申请日：2019-08-08
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明提供一种简便、快捷、高效测定蛋白酶活力的方法。该方法主要是利用一种寡肽化合物Suc-Ala-Ala-Pro-Tyr-pNA作为底物，配制该底物溶液与缓冲液、蛋白酶液组成的反应体系，蛋白酶水解该寡肽中酪氨酸(Tyr)与对硝基苯胺(pNA)之间的肽键，肽键断裂后产生的pNA单体在OD410处有吸收峰，反应后测定OD410的吸光值，可得蛋白酶的酶活力。本发明过程操作简单，耗时短，样品需求量小，并且可以同时进行多个样品的酶活测定工作，能够满足大批量样品测定工作的需求。
-
公开(公告)号：CN110218712A
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201910527208.1
申请日：2016-06-02
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38-140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/(g·细胞干重)。
-
公开(公告)号：CN105602880B
公开(公告)日：2019-03-05
申请号：CN201610054776.0
申请日：2016-01-27
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于代谢工程及发酵工程技术领域，特别涉及一株谷氨酸棒杆菌及其过量合成磷脂酰丝氨酸的方法。为了解决现有技术中酶法生产磷脂酰丝氨酸生产成本高、不易获得的问题，本发明提供了一株谷氨酸棒杆菌基因工程菌，该菌株是将谷氨酸棒杆菌宿主细胞中表达L‑丝氨酸脱氨酶的sdaA基因进行敲除，并串联表达磷脂酰丝氨酸合成酶的表达基因pssA基因、3‑磷酸甘油酸脱氢酶的突变基因serAΔ197基因和CDP‑甘油二酯合成酶的表达基因cdsA基因而获得。所述菌株经发酵法制备磷脂酰丝氨酸产量较出发菌株提高17‑39％。
-
公开(公告)号：CN109135984A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201811132566.4
申请日：2018-09-27
申请人： 天津科技大学
CPC分类号： C12C12/00 , C12C5/00 , C12C7/205 , C12C2200/01
摘要： 本发明提供一种蜂蜜艾尔精酿啤酒生产方法，包括如下步骤：(1)将大麦芽和水晶麦芽混合，粉碎，粉碎后加入蒸馏水；(2)加入去离子水搅拌，升温反应30min，再加入淀粉酶和糖化酶，提高温度保持30min；(3)用麦饼作为滤层过滤步骤二得到的液体；预留100mL滤汁，备用活化酵母；(4)将步骤三中得到的滤汁煮沸，加入α酸含量为5％的先锋酒花，30min后，再加入α酸含量为4.5％的卡斯卡特酒花，25min后，加入一定量蜂蜜水，反应5min；(5)将煮沸后的热麦汁冷却到室温，过滤；(6)将活化后的酵母加入到所述步骤五中的滤液中，发酵；(7)发酵液原浆灌装。本发明制得的酒液颜色呈棕黄色，泡沫呈白色且丰富、细腻、持久；有明显的酒花苦味、苦味干爽且纯净。
-
公开(公告)号：CN108823189A
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201810634547.5
申请日：2018-06-20
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/75 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/14 , C12P19/12 , C12R1/125 , C12R1/84
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，涉及一种来源于短小芽孢杆菌的新型木糖苷酶及其基因、工程菌、制备方法和应用。其技术方案是利用分子生物学手段和基因工程技术获得该新型木糖苷酶的基因，然后将该新型木糖苷酶基因，分别在枯草芽孢杆菌表达系统和毕赤酵母表达系统中进行表达，分别得到枯草芽胞杆菌高稳定性木糖苷酶重组菌株和毕赤酵母高稳定性木糖苷酶游离表达重组菌株，实现新型木糖苷酶的制备，解决现有技术中木糖苷酶在低温条件下活力低的问题，同时该新型细菌木糖苷酶在木聚糖酶的协同作用下彻底分解木聚糖和利用木糖合成木二糖有较好的作用。
-
公开(公告)号：CN108795836A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810727994.5
申请日：2018-07-05
申请人： 天津科技大学
CPC分类号： C12Y101/01255 , C12N9/0006 , C12N15/70 , C12P7/18
摘要： 本发明提供一种能够利用果糖合成甘露醇的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法。利用Crispr/Cas9基因组编辑技术对大肠杆菌K‑12 MG1655的甘露醇磷酸转移酶基因及其IIA、IIB和IIC元件进行敲除，得到大肠杆菌突变体，并通过质粒pTrc99a整合来源于布氏乳杆菌的甘露醇脱氢酶基因，构建重组载体，并实现了其在大肠杆菌突变体中的高效表达，获得重组大肠杆菌，通过发酵技术诱导表达获得甘露醇。利用本发明方法构建的基因工程菌经发酵培养12h后，使用高效液相色谱进行检测，大肠杆菌具备生产甘露醇的能力，在常温下，甘露醇的产量可达30g/L‑40g/L，有利于甘露醇的工业化生产。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
搜索结果
212 条记录 (耗时 0.076 秒)
