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公开(公告)号：CN104928333A
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201510394205.7
申请日：2015-07-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种敲除glcK促进枯草芽孢杆菌合成乙酰氨基葡萄糖的方法，属于遗传工程领域。本发明是以重组枯草芽孢杆菌BSGN6-PxylA-glmS-P43-GNA1作为出发菌株，通过同源重组敲除葡萄糖激酶编码基因glcK，阻断了宿主菌胞内乙酰氨基葡萄糖转化为乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸的反应，促进乙酰氨基葡萄糖积累。在使用合成培养基发酵过程中，敲除glcK的重组枯草芽孢杆菌的比生长速率和乙酰氨基葡萄糖的产量分别达到0.15h-1和3.0g/L，分别是敲除前菌株的2.14倍和2.32倍。本发明提供的重组枯草芽孢杆菌更适合工业应用。
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公开(公告)号：CN104498394A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410709273.3
申请日：2014-11-27
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1022 , C12N9/1029 , C12N9/88 , C12P19/26 , C12Y202/01006 , C12Y203/01003 , C12Y401/01005
Abstract: 本发明公开了一种乙酰氨基葡萄糖产量提高的重组枯草芽孢杆菌，属于遗传工程领域。本发明是以重组枯草芽孢杆菌BSGN6-PxylA-glmS作为出发菌株，通过同源重组敲除α-乙酰乳酸合成酶编码基因和α-乙酰乳酸脱羧酶编码基因，阻断了宿主菌由丙酮酸生成乙偶姻和2,3-丁二醇的途径。在已敲除alsS和alsD的宿主菌内，过量表达来源于酿酒酵母的氨基葡萄糖乙酰化酶编码基因，加强乙酰氨基葡萄糖合成途径，提高了重组枯草芽孢杆菌中乙酰氨基葡萄糖的产量，达到38.46g/L，为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产氨基葡萄糖奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102978149B
公开(公告)日：2014-01-29
申请号：CN201210570249.7
申请日：2012-12-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产乙酰氨基葡萄糖重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于遗传工程领域。本发明是以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis168）作为出发菌株，通过同源重组敲除乙酰氨基葡萄糖转运蛋白编码基因（nagP），阻断了宿主菌从胞外转运乙酰氨基葡萄糖至胞内途径。在已敲除nagP的宿主菌内，过量表达来源于酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae S288C）的氨基葡萄糖乙酰化酶编码基因（GNA1），加强乙酰氨基葡萄糖合成途径，提高了重组枯草芽孢杆菌中乙酰氨基葡萄糖的产量，达到415mg/L，为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产氨基葡萄糖奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119979585A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202411959265.4
申请日：2024-12-30
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌基因组低突变率整合位点和应用，属于生物技术领域。本发明利用基于枯草芽孢杆菌thyA及其内源启动子PthyA的波动测试，分析了枯草芽孢杆菌基因组不同整合位点的突变率，发现了一些低突变率整合位点，相对突变率均低于15％，且通过传代测试验证了其稳定性。在生物合成方面，本发明通过提高N‑乙酰神经氨酸途径基因neuB的遗传稳定性，提高了N‑乙酰神经氨酸的生产稳定性，使其在传代76代后仍能高效生产N‑乙酰神经氨酸。另外，通过提高T7RNA聚合酶的遗传稳定性，提高了T7表达系统的稳定性，使其在传代55代后仍然稳定。因此，低突变率位点对提高生物过程稳定、推动其工业应用具有重要意义。
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公开(公告)号：CN119955836A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202411936300.0
申请日：2024-12-26
Abstract: 本发明涉及一种自发突变率降低的枯草芽孢杆菌及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过敲除枯草芽孢杆菌基因组中编码潜在易错DNA聚合酶的基因yolD、yozK和yozL，在不影响菌株比生长速率的情况下，构建得到一株自发突变率降低的枯草芽孢杆菌，该菌能够应用于提高游离或整合表达外源基因的表达稳定性。以该菌作为底盘菌株，通过整合表达的方式构建N‑乙酰神经氨酸合成通路，使其在传代59代后仍能高效生产N‑乙酰神经氨酸。以该菌作为底盘菌株，构建表达荧光报告基因的质粒，可在质粒不丢失的情况下保证质粒上的基因正确复制超过47代。本发明提供的枯草芽孢杆菌为提高遗传稳定性提供了高效的泛用型工具，能够应用于构建稳定表达的细胞工厂。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119823882A
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202510026877.6
申请日：2025-01-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株高蛋白转化率的威尼斯镰刀菌及其在提高菌丝蛋白饱腹感中的应用，属于基因工程技术和食品生物技术领域。本发明的威尼斯镰刀菌(Fusarium venenatum)FCPD，于2024年12月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20242752。本发明的威尼斯镰刀菌生产相同干重菌丝体的底物葡萄糖消耗量较野生型下降40‑60％，蛋白质转化率提高70‑80％，油脂含量提高90％‑110％，体外模拟消化的胃半排空时间提高10％‑30％，显著提高了威尼斯镰刀菌菌丝蛋白的品质。还可以进一步开发基因工程改造工作，培育高底物转化率、高油脂含量、高饱腹感潜力的镰刀菌菌株。
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公开(公告)号：CN118703345A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410846650.1
申请日：2024-06-27
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N9/02 , C12N9/12 , C12N9/10 , C12P33/02 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种促进酿酒酵母合成7‑脱氢胆固醇的方法。本发明通过对磷酸甲戊酸激酶ERG8和鲨烯合酶ERG9进行突变，并分别或同时整合进酿酒酵母基因组中，得到了几株7‑脱氢胆固醇产量明显提升的突变菌株，其中，磷酸甲戊酸激酶ERG8涉及75、187、192、205、206、314、322、349等一个或多个位点的突变，鲨烯合酶ERG9涉及96、108、146、208、209、251、252、258、286、345、355、388、389、404、426、434等一个或多个位点的突变。本发明提供的酿酒酵母突变体可实现7‑DHC的生产，为代谢工程改造酿酒酵母促进7‑DHC合成奠定了基础。本发明提供的酿酒酵母突变体构建方法简单，便于使用，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118675614A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410603695.6
申请日：2024-05-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及基于隐马尔可夫模型预测N‑端编码序列调控基因表达水平的方法，属于生物信息技术领域。本发明统计提高基因表达水平高的天然N‑端编码序列，建立相应的文库，通过隐马尔可夫模型建立文库中氨基酸转移概率矩阵，通过计算一阶或二阶氨基酸转移概率，将所述氨基酸转移概率矩阵用于N‑端编码序列的评估，并应用该方法成功设计得到了能够应用于降低酿酒酵母无义调节的mRNA降解效应的N‑端编码序列，在该效应存在的情况下提高了基因表达的水平。
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公开(公告)号：CN115960874B
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202310111425.9
申请日：2023-02-14
Applicant: 山东润德生物科技有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌内源GlcNAc6P磷酸酶及提高GlcNAc产量的方法，具体涉及采用重组谷氨酸棒杆菌进行发酵生产，该重组谷氨酸棒杆菌过表达了如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列，该蛋白编码GlcNAc6P磷酸酶，能将GlcNAc6P去磷酸化为GlcNAc。本发明通过机器学习的方式鉴定了谷氨酸棒杆菌内源GlcNAc胞内转运蛋白以及内源GlcNAc6P磷酸酶的编码基因，并根据筛选结果对菌株进行改造，显著提高了GlcNAc的产量。
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公开(公告)号：CN118516346A
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410596002.5
申请日：2024-05-14
Applicant: 江西富祥药业股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量筛选高产菌体蛋白的短柄镰刀菌菌株的方法和应用，属于生物工程技术领域。本发明通过结合液滴微流控和流式细胞仪，通过关联蛋白质与RNA的关系，以SYTO RNA select染料再注射的方式实现了对短柄镰刀菌高产菌体蛋白菌株的筛选，并获得了一系列菌体蛋白产量提升的突变菌，如产量提升9.52％的短柄镰刀菌FXFB‑1。由于丝状真菌不能直接用流式细胞仪进行荧光检测，故本发明不但可以筛选高产菌体蛋白菌株，也适用于高通量筛选丝状真菌高产分泌蛋白菌株等。本发明提供的方法为短柄镰刀菌的高通量筛选及高产菌体蛋白的丝状真菌的高通量筛选奠定了基础，具有广阔的工业应用前景。
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