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公开(公告)号：CN119842705A
公开(公告)日：2025-04-18
申请号：CN202510075958.5
申请日：2025-01-17
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12R1/125
Abstract: 一种基于CRISPR‑Ascas12f系统进行枯草芽孢杆菌基因组编辑的方法，包括下列步骤：步骤1：CRISPR/Cas12f1质粒的构建；步骤2：枯草芽孢杆菌基因组编辑；步骤3：验证编辑结果。本发明利用CRISPR‑Cas12f技术对枯草芽孢杆菌BS168菌株进行理性改造，通过敲除竞争途径异分支酸裂合酶提高了MK‑7的产量。
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公开(公告)号：CN118834897A
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202411048353.9
申请日：2024-08-01
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种提高谷氨酸棒杆菌内源性启动子活性的方法及其应用，包括在转录起始位点(TSP)处将内源启动子的5'非翻译区(5'UTR)的前3个碱基突变为起始密码子ATG，并在突变后的5'UTR序列3'端添加5个碱基的翻译偶联结构“TAATG”。本发明通过分子生物学技术对内源启动子的5'UTR进行突变和优化，显著提高了启动子的表达强度。本发明的方法可用于构建表达盒，用于提高外源蛋白在谷氨酸棒杆菌中的表达水平，本发明的表达盒适用于包括但不限于增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和其他外源蛋白基因的表达。本发明的方法和表达盒可广泛应用于生物制造过程中重组蛋白的表达，提高医药蛋白、酶制剂和食品添加剂等外源蛋白的生产效率。
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公开(公告)号：CN117603891A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202310859660.4
申请日：2023-07-13
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种用于MK‑n生产的乳酸乳球菌及其构建方法与应用，乳酸乳球菌乳脂亚种MG1363含有来自枯草芽孢杆菌BS168导入的表达甲基萘醌主环合成途径相关的Men系列基因以及来自嗜热地衣芽孢杆菌的聚异戊二烯途径上合成类异戊二烯侧链相关基因；1、所述甲基萘醌主环途径相关基因包括MenA、MenF等基因；所述聚异戊二烯途径上相关基因包括ispA、fni基因等；2、所述发酵培养基，通过外源添加2.5μg/mL的血红素以及优化碳氮源，使生物量提高近1.5倍。本发明构建的乳酸乳球菌及优化的发酵培养条件能够较高且稳定产生MK‑n，约0.8mg/g，具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN115364169B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202210800585.X
申请日：2022-07-08
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: A61K36/8969 , A61P31/04 , A61P1/04 , A23L2/385 , A23L33/105 , C12G3/055
Abstract: 一种抗幽门螺杆菌的中药组合物及其制备方法与应用，涉及中药领域。本发明的地黄、黄精和蒲公英中药组合制备的提取物，可作为活性成分用于制备治疗幽门螺旋杆菌病的药物。本发明为传统中药材的应用开拓了新领域，为高效低毒抗幽门螺杆菌药物研发或保健食品开发提供了新方向。
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公开(公告)号：CN111607004B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202010513468.6
申请日：2020-06-08
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种在胰蛋白酶酶切过程中选择性保护酶切位点的方法，其特征在于：包括一待用胰蛋白酶酶切的多肽，该多肽的精氨酸的两侧均设有一半胱氨酸，两个半胱氨酸形成二硫键，且所述二硫键横跨所述精氨酸。本发明对多肽中需进行保护的精氨酸的两侧，选择适当的位点插入半胱氨酸或者将不重要的氨基酸突变为半胱氨酸，使两个半胱氨酸横跨拟保护的精氨酸形成二硫键。通过二硫键带来的构象变化，在酶切处形成空间位阻，降低胰蛋白酶和精氨酸羧基端的亲和力，大幅减弱甚至消除酶切效应。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116083470A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202310217685.4
申请日：2023-03-08
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种通过调控upps位点获得高产维生素K2枯草芽孢杆菌的方法，其特征在于：以枯草芽孢杆菌为出发菌株，过表达了维生素K2合成路径中的dxs基因、fni基因、dxr基因、menF基因、menA基因和pos5P基因和hepS/T基因。本发明经代谢工程改造的枯草芽孢杆菌可高效生产MK‑7。
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公开(公告)号：CN109722457B
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN201910183792.3
申请日：2019-03-12
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明中公开了一种磁场辅助黄杆菌液态发酵制备维生素K2的方法，属于微生物发酵技术领域。所述方法步骤如下：（1）将活化后的黄杆菌种接种于种子培养基中，经种子培养，制得种子液；（2）将步骤（1）制得的种子液转接于发酵培养基中，在其生长周期中加入磁场辅助处理促进发酵，得到磁场处理后的发酵产物；（3）对磁场辅助处理条件下的发酵培养基进行优化，可使黄杆菌的发酵产物维生素K2的产量提高了30‑60%，该方法步骤简单，易于操作。
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公开(公告)号：CN114350648A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202210016774.8
申请日：2022-01-07
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种调控黄杆菌菌体形态和细胞膜通透性的方法，属于微生物发酵技术领域。所述方法步骤如下：（1）将活化的黄杆菌接种于种子培养基中培养，制得种子液；（2）将种子液置于稳态强磁场装置接受磁场处理；（3）处理后的种子液接入发酵体系中培养，菌体长宽比减小10‑20%，细胞膜通透性增加10‑20%。与常规形态和通透性调控方法相比，该方法无外源物质或基因引入，生物安全性高，操作简单。
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公开(公告)号：CN109824496B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201910183305.3
申请日：2019-03-12
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种从破壁纳豆芽孢杆菌菌体中提取纯化维生素K2的方法，将发酵之后的微生物用超滤和离心进行固液分离，得到湿菌体，用离子束处理湿菌体进行破壁之后，用无水乙醇进行提取，不仅会获得大量的维生素K2，也提取出较少的油脂，在提取过程中进行了粗纯化，为后面一步式高效率纯化提供了很好的溶液。将提取物通过柱萃取，采用极性不同的有机试剂进行萃取纯化，将不同极性的杂质萃取出来，从而使溶液的纯度得到很大提高。之后将其冷冻结晶能得到纯度为95%的维生素K2晶体。本方法省去了传统方法中的干燥和菌体粉碎的过程，提高了提取效率与提取的纯度。并通过一步式纯化就获得纯度较高的维生素K2。
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公开(公告)号：CN104031975B
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201410239178.1
申请日：2014-05-30
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种对丝状菌形态和代谢活性的检测方法，步骤如下：（1）将丝状菌接种发酵培养；（2）培养到48-72h时，取100-150μL发酵液，300-400目网筛过滤冲洗，去除发酵液中有色杂质干扰；（3）过滤后菌丝置于小离心管中，加生理盐水稀释至1-2mL，吸取100-150μL均匀涂在载玻片上；（4）滴加200-250μL改良亚甲基蓝染色液，染色10-15min；（5）滴加100-150μL改良石炭酸品红染色液，染色5-8min；（6）蒸馏水冲洗玻片，盖片观察。本发明通过染色手段，更加方便形态学的观察，同时可以明显区分菌体生长某一阶段不同区域活性差异，对其生理代谢活性大致了解。
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