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公开(公告)号：CN109722457B
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN201910183792.3
申请日：2019-03-12
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明中公开了一种磁场辅助黄杆菌液态发酵制备维生素K2的方法，属于微生物发酵技术领域。所述方法步骤如下：（1）将活化后的黄杆菌种接种于种子培养基中，经种子培养，制得种子液；（2）将步骤（1）制得的种子液转接于发酵培养基中，在其生长周期中加入磁场辅助处理促进发酵，得到磁场处理后的发酵产物；（3）对磁场辅助处理条件下的发酵培养基进行优化，可使黄杆菌的发酵产物维生素K2的产量提高了30‑60%，该方法步骤简单，易于操作。
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公开(公告)号：CN109824496B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201910183305.3
申请日：2019-03-12
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种从破壁纳豆芽孢杆菌菌体中提取纯化维生素K2的方法，将发酵之后的微生物用超滤和离心进行固液分离，得到湿菌体，用离子束处理湿菌体进行破壁之后，用无水乙醇进行提取，不仅会获得大量的维生素K2，也提取出较少的油脂，在提取过程中进行了粗纯化，为后面一步式高效率纯化提供了很好的溶液。将提取物通过柱萃取，采用极性不同的有机试剂进行萃取纯化，将不同极性的杂质萃取出来，从而使溶液的纯度得到很大提高。之后将其冷冻结晶能得到纯度为95%的维生素K2晶体。本方法省去了传统方法中的干燥和菌体粉碎的过程，提高了提取效率与提取的纯度。并通过一步式纯化就获得纯度较高的维生素K2。
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公开(公告)号：CN105154484A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510734733.2
申请日：2015-10-30
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明涉及一种利用添加诱导物质提高黄杆菌合成维生素K2产量的方法，具体包括：黄杆菌菌株活化、黄杆菌种子培养、黄杆菌发酵培养、离心发酵液、冷冻干燥、甲醇处理等步骤，通过向发酵培养基中添加前体物质1,4-二羟基-2-萘甲酸、前体类似物VK3或异戊烯醇(YWXC)作为诱导物质，促进MK的生物合成，将获得的抽提液进行检测。结果表明，与对照组相比，添加诱导物质的黄杆菌合成维生素K2的产量显著提高，维生素K2产量对菌体干重比也得到了较大幅度提高。该方法操作简单、可控性强、结果稳定，且安全环保。此外，利用添加诱导物质大大提高了黄杆菌合成MK的产量，为工业化大规模生产维生素MK提供新的思路和方式。
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公开(公告)号：CN105154484B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201510734733.2
申请日：2015-10-30
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明涉及一种利用添加诱导物质提高黄杆菌合成维生素K2产量的方法，具体包括：黄杆菌菌株活化、黄杆菌种子培养、黄杆菌发酵培养、离心发酵液、冷冻干燥、甲醇处理等步骤，通过向发酵培养基中添加前体物质1,4‑二羟基‑2‑萘甲酸、前体类似物VK3或异戊烯醇(YWXC)作为诱导物质，促进MK的生物合成，将获得的抽提液进行检测。结果表明，与对照组相比，添加诱导物质的黄杆菌合成维生素K2的产量显著提高，维生素K2产量对菌体干重比也得到了较大幅度提高。该方法操作简单、可控性强、结果稳定，且安全环保。此外，利用添加诱导物质大大提高了黄杆菌合成MK的产量，为工业化大规模生产维生素MK提供新的思路和方式。
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公开(公告)号：CN109678617A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201910181710.1
申请日：2019-03-11
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
CPC classification number: C05C3/00 , C05D3/00 , C05G3/00 , C05G3/04 , C12N1/14 , C12N1/20 , C05D5/00 , C05D9/02 , C05F11/00 , C05F11/08
Abstract: 本发明涉及一种基于秸秆纤维的缓释生物菌肥及制备方法，属于生物菌肥技术领域。该生物菌肥是利用秸秆纤维、藻粉为主要原料，添加中微量元素和功能微生物发酵后获得的。秸秆纤维负载大量功能微生物调节土壤微生态，改良土壤结构；藻粉中高分子成分螯合中微量元素后形成凝胶缓释颗粒，保水保湿、缓释营养。该生物菌肥通过秸秆纤维和藻粉的资源化利用实现了高效缓释肥料的制备，对土壤改良、地力提升和作物生长起显著调节和促进作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105861582A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610392463.6
申请日：2016-05-31
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: C12P7/66
CPC classification number: C12P7/66
Abstract: 本发明公开一种NovQ芳香族异戊烯基转移酶催化合成维生素K2的方法，(1)维生素K3溶解于乙醇水溶液中，加入NaBH4，在N2保护下，控制温度不超过50℃，搅拌反应至体系呈淡绿色透明液体，中和至pH4.0后，用乙酸乙酯萃取产物，浓缩后冷冻结晶，过滤除清液得到维生素K3氢醌；(2)将维生素K3氢醌和DMAPP加入酶促反应体系中，反应在密闭和N2保护条件下进行，反应完成后，加入Fe3+，去除N2保护，充分氧化后，使用乙酸乙酯萃取得到产物。本发明核心环节为生物酶催化工程技术，利用廉价的维生素K3催化合成高值的维生素K2。本发明生产工艺简单，生产成本低廉，生产过程绿色环保。
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公开(公告)号：CN110066741B
公开(公告)日：2023-02-24
申请号：CN201910425610.9
申请日：2019-05-21
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: C12N1/15 , C12N15/113 , C12N15/80 , C12R1/685
Abstract: 一种通过形态优化定向提高丝状真菌代谢产量的突变菌株构建方法，包括：将丝状真菌在液体培养基中培养；提取全基因组；设计引物从丝状真菌全基因组中扩增目的形态基因片段；将目的基因片段与载体连接构建用于调控形态基因表达的载体；载体转化丝状真菌，利用载体上的抗性基因筛选转化子；将突变株接入种子瓶中，培养一定时间后，过滤收集菌丝，染色后显微镜观察形态；种子转接入发酵培养基后，隔一定时间取样，过滤收集菌丝，染色后显微镜观察形态；测定产物效价，筛选高产菌株。本发明改造菌菌丝皆多分枝且缠绕聚集成球，球外菌丝分枝较短，菌球致密，且大小均一，发酵液粘度较低。
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公开(公告)号：CN110437993A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910881952.1
申请日：2019-09-18
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种多物理场耦合生物反应器，包括依次连通设置的生物反应罐体、超声波产生与控制装置、光照产生与控制装置和磁场产生与控制装置，磁场产生与控制装置与生物反应罐体连通设置；超声波产生与控制装置包括超声波发生器以及容器，超声波发生器的探头设置在容器内，容器外设置有第一冷却层；光照产生与控制装置包括第一玻璃管，第一玻璃管外设置有遮光套，遮光套的内壁设置有发光体；磁场产生与控制装置包括第二玻璃管，第二玻璃管外设置有电磁线圈。本发明可对不同微生物进行充分培养，对系统中各装置的腔体和管路均可实现单独灭菌，维护升级简便，也可与任意类型罐体连接，针对微生物不同培养需求，可自由组合使用，适用范围广。
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公开(公告)号：CN109824496A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910183305.3
申请日：2019-03-12
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种从破壁纳豆芽孢杆菌菌体中提取纯化维生素K2的方法，将发酵之后的微生物用超滤和离心进行固液分离，得到湿菌体，用离子束处理湿菌体进行破壁之后，用无水乙醇进行提取，不仅会获得大量的维生素K2，也提取出较少的油脂，在提取过程中进行了粗纯化，为后面一步式高效率纯化提供了很好的溶液。将提取物通过柱萃取，采用极性不同的有机试剂进行萃取纯化，将不同极性的杂质萃取出来，从而使溶液的纯度得到很大提高。之后将其冷冻结晶能得到纯度为95%的维生素K2晶体。本方法省去了传统方法中的干燥和菌体粉碎的过程，提高了提取效率与提取的纯度。并通过一步式纯化就获得纯度较高的维生素K2。
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公开(公告)号：CN107475312B
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN201710828555.9
申请日：2017-09-14
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种通过改善细胞膜通透性有效生产维生素K2的方法，包括如下步骤：(1)将维生素K2生产菌株接种于斜面培养基中活化；(2)将活化后的菌株接种于添加有非离子型表面活性剂的种子培养基中培养；(3)将得到的培养液继续接种于添加有非离子型表面活性剂的种子培养基中培养；(4)将培养液接入发酵培养基中，100‑700rpm，0.5‑5vvm培养144‑240h；发酵至0‑72h时，添加非离子型表面活性剂，并采用插入式低功率超声间隔处理，定时取样检测细胞和维生素K2浓度。本发明的优点在于：提供了简便、有效、经济的发酵工艺，有效提高维生素K2浓度，提高生产效率，降低生产成本。
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