一种通过形态优化定向提高丝状真菌代谢产量的突变菌株构建方法

    公开(公告)号:CN110066741B

    公开(公告)日:2023-02-24

    申请号:CN201910425610.9

    申请日:2019-05-21

    摘要: 一种通过形态优化定向提高丝状真菌代谢产量的突变菌株构建方法,包括:将丝状真菌在液体培养基中培养;提取全基因组;设计引物从丝状真菌全基因组中扩增目的形态基因片段;将目的基因片段与载体连接构建用于调控形态基因表达的载体;载体转化丝状真菌,利用载体上的抗性基因筛选转化子;将突变株接入种子瓶中,培养一定时间后,过滤收集菌丝,染色后显微镜观察形态;种子转接入发酵培养基后,隔一定时间取样,过滤收集菌丝,染色后显微镜观察形态;测定产物效价,筛选高产菌株。本发明改造菌菌丝皆多分枝且缠绕聚集成球,球外菌丝分枝较短,菌球致密,且大小均一,发酵液粘度较低。

    一种纳豆芽孢杆菌感受态细胞的制备方法及遗传转化方法

    公开(公告)号:CN113215073A

    公开(公告)日:2021-08-06

    申请号:CN202110658479.8

    申请日:2021-06-15

    摘要: 一种纳豆芽孢杆菌感受态细胞的制备方法及遗传转化方法,包括将冷冻保藏的纳豆芽孢杆菌在LB固体培养基上划线,37℃条件下培养16‑20h,在划线平板上挑一个单菌落,接种于盛有LB液体培养基的三角瓶中,37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h;取培养液,接种于BN‑Ⅰ培养基中,37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h;取菌液接种于BN‑Ⅰ培养基中,37℃条件下以180‑250rpm摇床培养4‑5h;取菌液接种于BN‑II培养基中,37℃条件下以180‑250rpm摇床培养1‑2h;向菌液中加入促转化液,37℃条件下以80‑120rpm摇床培养10‑30min;培养结束后得到含有感受态细胞的菌液。本发明制备的纳豆芽孢杆菌感受态细胞,其转化率得到大幅提升,后续将为该菌的基因表达、沉默、敲除及功能研究提供基础。

    一种怀菊花功能饮料及其制备方法

    公开(公告)号:CN112841486A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202110238694.2

    申请日:2021-03-04

    IPC分类号: A23L2/38 A23L33/105

    摘要: 一种怀菊花功能饮料及其制备方法,所述怀菊花功能饮料的原料配方包括下列重量份的原料:怀菊花提取物0.5‑1重量份、枸杞子提取物0.25‑0.5重量份、山楂0.25‑2重量份、木糖醇20‑40重量份、蜂蜜0.5‑2重量份、水900‑1000重量份。怀菊花功能饮料配方具有多种天然原材料,不仅可以满足快节奏生活对润喉解渴的饮料需求,又能够让人头脑清醒、双目明亮,有效缓解眼睛疲劳,特别对肝火旺、用眼过度导致的双眼干涩的电脑族、手机族具有较好的效果。其组方简单明确,市场认可度高,制备方法适合工业化生产需求,具有较好的市场前景。

    一种在胰蛋白酶酶切过程中选择性保护酶切位点的方法

    公开(公告)号:CN111607004A

    公开(公告)日:2020-09-01

    申请号:CN202010513468.6

    申请日:2020-06-08

    IPC分类号: C07K19/00 C12N9/02

    摘要: 一种在胰蛋白酶酶切过程中选择性保护酶切位点的方法,其特征在于:包括一待用胰蛋白酶酶切的多肽,该多肽的精氨酸的两侧均设有一半胱氨酸,两个半胱氨酸形成二硫键,且所述二硫键横跨所述精氨酸。本发明对多肽中需进行保护的精氨酸的两侧,选择适当的位点插入半胱氨酸或者将不重要的氨基酸突变为半胱氨酸,使两个半胱氨酸横跨拟保护的精氨酸形成二硫键。通过二硫键带来的构象变化,在酶切处形成空间位阻,降低胰蛋白酶和精氨酸羧基端的亲和力,大幅减弱甚至消除酶切效应。

    利用纳豆芽孢杆菌发酵联产维生素K2和纳豆激酶的方法

    公开(公告)号:CN106701719B

    公开(公告)日:2020-04-21

    申请号:CN201710029003.1

    申请日:2017-01-16

    IPC分类号: C12N9/54 C12P7/66 C12R1/07

    摘要: 本发明公开了一种利用纳豆芽孢杆菌发酵联产维生素K2和纳豆激酶的方法,包括以下步骤:菌种活化:将纳豆芽孢杆菌划线至平板培养基中培养,再取单菌落在试管培养基,进行培养;制备种子:将试管中纳豆芽孢杆菌接种到种子培养基中培养;纳豆激酶、维生素K2的生产:配置联产发酵培养基,待配置联产发酵培养基冷却后,取制备的种子液,接种,于最佳联产培养条件下进行纳豆激酶和维生素K2的生产;纳豆激酶、维生素K2的分离和提取:将发酵液离心后,上清与沉淀分离,向上清中添加无机高分子絮凝剂,并选用壳聚糖作为助凝剂,将上清中维生素K2和纳豆激酶分离。本发明具有提高了原料的利用率且适合于工业生产的优点。

    一种多物理场耦合生物反应器
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110437993A

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201910881952.1

    申请日:2019-09-18

    IPC分类号: C12M1/36 C12M1/00

    摘要: 一种多物理场耦合生物反应器,包括依次连通设置的生物反应罐体、超声波产生与控制装置、光照产生与控制装置和磁场产生与控制装置,磁场产生与控制装置与生物反应罐体连通设置;超声波产生与控制装置包括超声波发生器以及容器,超声波发生器的探头设置在容器内,容器外设置有第一冷却层;光照产生与控制装置包括第一玻璃管,第一玻璃管外设置有遮光套,遮光套的内壁设置有发光体;磁场产生与控制装置包括第二玻璃管,第二玻璃管外设置有电磁线圈。本发明可对不同微生物进行充分培养,对系统中各装置的腔体和管路均可实现单独灭菌,维护升级简便,也可与任意类型罐体连接,针对微生物不同培养需求,可自由组合使用,适用范围广。