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公开(公告)号：CN116606200A
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202310607043.5
申请日：2023-05-26
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种超声涡旋振荡联合高效萃取枯草芽孢杆菌中七烯甲萘醌的方法，包括如下步骤：（1）向发酵液中加入正己烷、异丙醇混合液，先进行超声波辅助萃取，剧烈旋涡振荡，之后摇床萃取2 h；（2）在上述发酵液和有机溶剂混合液中加入正丁醇，剧烈振荡,离心，收集有机相，得第一次萃取液；（3）重复步骤（2），得第二次萃取液，合并两次萃取液，以0.22μm孔径有机微孔滤膜过滤，即为发酵液中MK‑7的提取液。本发明利用超声波的破壁和促溶作用加上涡旋振荡，使有机溶剂与发酵液充分接触，使MK‑7最终得率达到99.9%。本发明具有萃取得率高，无需干燥设备，步骤简单，节约时间等优点，便于应用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN117844683A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202311718785.1
申请日：2023-12-14
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一株耐受维生素K的枯草芽孢杆菌及其应用，所述耐受维生素K的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS012，已保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏日期为2023年12月14日，菌种保藏编号为CCTCC NO:M 20232563。本发明的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS012的细胞长度延长了两倍，静态培养中能形成发达的生物膜，总体抗氧化能力（T‑AOC）也明显增强；另外，其在静态和摇动培养条件下产生的MK‑7分别增加了75.71%和22.0%。
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公开(公告)号：CN116083470A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202310217685.4
申请日：2023-03-08
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种通过调控upps位点获得高产维生素K2枯草芽孢杆菌的方法，其特征在于：以枯草芽孢杆菌为出发菌株，过表达了维生素K2合成路径中的dxs基因、fni基因、dxr基因、menF基因、menA基因和pos5P基因和hepS/T基因。本发明经代谢工程改造的枯草芽孢杆菌可高效生产MK‑7。
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公开(公告)号：CN118909851A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411029883.9
申请日：2024-07-30
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: C12N1/20 , C12P7/66 , C12N15/55 , C12N15/113 , C12R1/10
Abstract: 一种通过法尼基合酶工程及发酵优化提高MK‑7产量的方法及其使用的枯草芽孢杆菌，所述枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis BS018，已保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2024年1月2日，菌种保藏编号为CCTCC NO：M2024004。通过蛋白融合共表达策略有效解决法尼基焦磷酸(FPP)碳通量不足的问题，该策略使七聚异戊烯基焦磷酸合成酶(HepS/T)可高效利用前体FPP，进而提高了侧链HepPP的合成效率。
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公开(公告)号：CN113215073B
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202110658479.8
申请日：2021-06-15
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种纳豆芽孢杆菌感受态细胞的制备方法及遗传转化方法，包括将冷冻保藏的纳豆芽孢杆菌在LB固体培养基上划线，37℃条件下培养16‑20h，在划线平板上挑一个单菌落，接种于盛有LB液体培养基的三角瓶中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h；取培养液，接种于BN‑Ⅰ培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h；取菌液接种于BN‑Ⅰ培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养4‑5h；取菌液接种于BN‑II培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养1‑2h；向菌液中加入促转化液，37℃条件下以80‑120rpm摇床培养10‑30min；培养结束后得到含有感受态细胞的菌液。本发明制备的纳豆芽孢杆菌感受态细胞，其转化率得到大幅提升，后续将为该菌的基因表达、沉默、敲除及功能研究提供基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113004134B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202110238737.7
申请日：2021-03-04
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种利用棕榈油提取物分离纯化发酵液中维生素K2的方法，对发酵液进行分离得到湿菌体，再冷冻干燥得到干菌体，将干菌体与棕榈油提取物混合2~4h，离心取上清液；将已经预处理的大孔树脂进行装柱，将上清液置于充满大孔树脂的分离柱中，使用第一洗脱剂除去杂油类物质，然后使用第一解析剂将维生素K2从大孔树脂上洗脱下来得到洗脱液；得到的洗脱液进行浓缩得到浓缩液；将所述浓缩液置于容纳有反相硅胶的分离柱中，以第二洗脱剂除去杂质，再用第二解析剂洗脱，得到高纯度维生素K2产品，进行冷冻结晶即得到维生素K2晶体。本发明使用的棕榈油提取物存在于自然界中，获取较为简单且不会产生有机废液，大大减少对环境的污染。
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公开(公告)号：CN113004134A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110238737.7
申请日：2021-03-04
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种利用棕榈油提取物分离纯化发酵液中维生素K2的方法，对发酵液进行分离得到湿菌体，再冷冻干燥得到干菌体，将干菌体与棕榈油提取物混合2~4h，离心取上清液；将已经预处理的大孔树脂进行装柱，将上清液置于充满大孔树脂的分离柱中，使用第一洗脱剂除去杂油类物质，然后使用第一解析剂将维生素K2从大孔树脂上洗脱下来得到洗脱液；得到的洗脱液进行浓缩得到浓缩液；将所述浓缩液置于容纳有反相硅胶的分离柱中，以第二洗脱剂除去杂质，再用第二解析剂洗脱，得到高纯度维生素K2产品，进行冷冻结晶即得到维生素K2晶体。本发明使用的棕榈油提取物存在于自然界中，获取较为简单且不会产生有机废液，大大减少对环境的污染。
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公开(公告)号：CN113215073A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110658479.8
申请日：2021-06-15
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种纳豆芽孢杆菌感受态细胞的制备方法及遗传转化方法，包括将冷冻保藏的纳豆芽孢杆菌在LB固体培养基上划线，37℃条件下培养16‑20h，在划线平板上挑一个单菌落，接种于盛有LB液体培养基的三角瓶中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h；取培养液，接种于BN‑Ⅰ培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h；取菌液接种于BN‑Ⅰ培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养4‑5h；取菌液接种于BN‑II培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养1‑2h；向菌液中加入促转化液，37℃条件下以80‑120rpm摇床培养10‑30min；培养结束后得到含有感受态细胞的菌液。本发明制备的纳豆芽孢杆菌感受态细胞，其转化率得到大幅提升，后续将为该菌的基因表达、沉默、敲除及功能研究提供基础。
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公开(公告)号：CN110437993A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910881952.1
申请日：2019-09-18
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种多物理场耦合生物反应器，包括依次连通设置的生物反应罐体、超声波产生与控制装置、光照产生与控制装置和磁场产生与控制装置，磁场产生与控制装置与生物反应罐体连通设置；超声波产生与控制装置包括超声波发生器以及容器，超声波发生器的探头设置在容器内，容器外设置有第一冷却层；光照产生与控制装置包括第一玻璃管，第一玻璃管外设置有遮光套，遮光套的内壁设置有发光体；磁场产生与控制装置包括第二玻璃管，第二玻璃管外设置有电磁线圈。本发明可对不同微生物进行充分培养，对系统中各装置的腔体和管路均可实现单独灭菌，维护升级简便，也可与任意类型罐体连接，针对微生物不同培养需求，可自由组合使用，适用范围广。
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公开(公告)号：CN210974690U
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201921560812.6
申请日：2019-09-18
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种多物理场耦合生物反应器，包括依次连通设置的生物反应罐体、超声波产生与控制装置、光照产生与控制装置和磁场产生与控制装置，磁场产生与控制装置与生物反应罐体连通设置；超声波产生与控制装置包括超声波发生器以及容器，超声波发生器的探头设置在容器内，容器外设置有第一冷却层；光照产生与控制装置包括第一玻璃管，第一玻璃管外设置有遮光套，遮光套的内壁设置有发光体；磁场产生与控制装置包括第二玻璃管，第二玻璃管外设置有电磁线圈。本实用新型可对不同微生物进行充分培养，对系统中各装置的腔体和管路均可实现单独灭菌，维护升级简便，也可与任意类型罐体连接，针对微生物不同培养需求，可自由组合使用，适用范围广。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利
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