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公开(公告)号：CN116004695A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202310037802.9
申请日：2023-01-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/78 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌中4‑异丙基苯甲酸诱导的高强度表达体系的构建方法，以恶臭假单胞菌F1(Pseudomonas Putida F1)代谢途径中存在的4‑异丙基苯甲酸(cumate)诱导的cym操纵子为基础，替换其原有表达用启动子以及表达目的基因，通过组合多阻遏位点，得到改造后的cym操纵子，从而使得荧光蛋白表达强度提高；本发明确定了所述诱导系统的诱导剂在恶臭假单胞菌中的有效响应范围，同时筛选得到响应最好的多阻遏位点诱导系统。
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公开(公告)号：CN114574617B
公开(公告)日：2022-12-27
申请号：CN202210219172.2
申请日：2022-03-08
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种巴斯德毕赤酵母不同碳源下的内参基因及其引物和应用，所述内参基因为Eif5a基因和/或RPL14B基因。本发明提供的内参基因在巴斯德毕赤酵母不同碳源培养基中稳定表达，为蛋白生产过程中相关功能基因的表达定量提供可靠的分析依据；弥补了巴斯德毕赤酵母实时荧光定量内参基因的缺失，有利于菌株构建工程和重组蛋白生产，为今后开展基因表达研究提供了可靠依据。
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公开(公告)号：CN114410673A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210032555.9
申请日：2022-01-12
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77 , C12N15/69 , C07K14/815 , C07K14/435 , C12R1/15
Abstract: 本发明提供了一种提高重组蛋白在谷氨酸棒杆菌中表达水平的方法及其应用。其能有效提高谷氨酸棒杆菌外源蛋白的表达。通过通用RBS引物及PCR技术将RBS序列引入基因上游，然后利用生物砖组装技术完成基因多拷贝载体构建，利用该技术实现了蛋白的高效表达。
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公开(公告)号：CN111518735A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN201910107943.7
申请日：2019-02-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌重组菌，其能解决传统的谷氨酸棒状杆菌的宿主菌外源蛋白表达量较低，限制了其作为外源蛋白表达宿主的应用程度的技术问题。一种谷氨酸棒状杆菌重组菌，其特征在于：所述谷氨酸棒状杆菌重组菌的NCgl2429基因不能正确地转录或翻译。本发明改造的谷氨酸棒状杆菌重组菌其通过阻断NCgl2429基因的转录和翻译，实现外源蛋白的高表达。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109097361B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201810990180.0
申请日：2018-08-28
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77
Abstract: 本发明公开了启动子、其载体及其应用，其包括，启动子核心区序列，所述启动子核心区序列至少包含谷氨酸棒杆菌SEQ ID NO：6基因编码序列ATG的上游91bp～180bp区间序列。将本发明启动子与基因片段进行构建组成表达框，能够在原核生物中大量表达蛋白，特别是被诱导剂诱导后，蛋白表达活性显著高于传统Ptac的诱导表达活性，是一种超高效启动子。本发明启动子能够用于原核生物内源或外源蛋白的高效表达。
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公开(公告)号：CN109913490A
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201910187914.6
申请日：2019-03-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在谷氨酸棒杆菌表达菌株Corynebacterium glutamicum CGMCC1.15647的增强型表达载体，用于外源蛋白表达。其特征在于：将内源双顺反子元件引入到穿梭载体pXMJ19的多克隆位点之前，得到含有增强型Ptac启动子的谷氨酸棒杆菌表达载体pGX19，该载体能够显著提高外源蛋白GFP、SUMO-NT-proBNP、VHH的表达能力。
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公开(公告)号：CN108642109A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810494617.1
申请日：2018-05-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高谷氨酸棒杆菌重组蛋白表达量的方法，其包括，在谷氨酸棒杆菌培养基中加入体积浓度为0.5％～10％的乙醇。本发明显著提高了谷氨酸棒状杆菌的生长和蛋白表达产量，本发明方法绿色环保无毒害、操作简单、成本低、效果好、显著提高谷氨酸棒杆菌的蛋白表达产量，具有巨大的工业应用价值。本发明在培养基中添加1％乙醇促进谷氨酸棒杆菌的生长，同样培养条件下，谷氨酸棒杆菌的重组蛋白表达量提高一倍以上。
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公开(公告)号：CN106636174A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201610623309.5
申请日：2016-07-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了表达外源蛋白的毕赤酵母菌株及表达系统，该毕赤酵母菌株的GTPI基因发生突变，突变后的毕赤酵母基因不能编码甘油转运蛋白或编码的甘油转运蛋白没有活性，能够在甘油诱导条件下启动PAOX1的转录，从而提高毕赤酵母在甘油诱导条件下AOX1的表达量，从而提高外源蛋白的表达量。同时，本发明还提供了所述表达外源蛋白的毕赤酵母的构建方法，所述表达外源蛋白的毕赤酵母的诱导表达方法，该诱导表达方法能够有效提高外源蛋白表达量及最终细胞浓度。
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公开(公告)号：CN117165618B
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202310472681.0
申请日：2023-04-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌中4‑异丙基苯甲酸诱导的高强度表达体系的构建方法，以恶臭假单胞菌F1(PseudomonasPutidaF1)代谢途径中存在的4‑异丙基苯甲酸(cumate)诱导的cym操纵子为基础，替换其原有表达用启动子以及表达目的基因，通过组合多阻遏位点，得到改造后的cym操纵子，从而使得荧光蛋白表达强度提高；本发明确定了所述诱导系统的诱导剂在恶臭假单胞菌中的有效响应范围，同时筛选得到响应最好的多阻遏位点诱导系统。
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