一种王不留行黄酮苷软膏剂的制备方法

    公开(公告)号:CN105106106B

    公开(公告)日:2018-02-06

    申请号:CN201510561422.0

    申请日:2015-09-06

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明涉及一种王不留行黄酮苷软膏剂的制备方法,属药物制剂领域,对开放性损伤的伤口恢复具有十分显著的效果。其特征在于:将王不留行黄酮苷研细后过60目筛备用。取15%硬脂酸甘油酯(15%为硬脂酸甘油酯在软膏剂中的质量分数,且以下试剂的用量皆为质量分数)、20%液状石蜡、2%硬脂酸和6%十八醇加热融化为油相。另取25%纯甘油和30%蒸馏水加热至90℃,再加入2%十二烷基硫酸钠和0.1%羟苯乙酯溶解为水相。然后将水相缓缓倒入油相中,边加边搅拌,直至冷凝即得O/W乳剂。随后将过筛以后的王不留行黄酮苷以0.1%用量加入至此乳剂中,搅匀即得王不留行黄酮苷软膏剂。王不留行黄酮苷软膏剂可作为药品或化妆品的生产。

    一种筛选CHO细胞系高表达位点的方法

    公开(公告)号:CN107557390A

    公开(公告)日:2018-01-09

    申请号:CN201710841267.7

    申请日:2017-09-18

    申请人: 江南大学

    发明人: 周松涛 金坚

    IPC分类号: C12N15/867 C12N15/65 C12N5/10

    CPC分类号: C12N5/10 C12N15/65 C12N15/867

    摘要: 本发明公开了一种筛选CHO细胞系高表达位点的方法,所述方法将带有绿色荧光基因的慢病毒整合到CHO细胞基因组中,通过流式分选方法将荧光表达量高的单克隆细胞收集并扩培后,再利用染色体移步技术筛选出相应的高表达整合位点。本发明方法结合CRISPR/Cas9介导的定点整合技术,可以快速的在已找到的位点上精确插入所要表达的外源基因,可以快速高效获得外源蛋白高表达细胞系。

    一种可联合丙戊酸共同使用提高表达水平的抗凋亡CHO-K1细胞系的构建方法

    公开(公告)号:CN107384924A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710655728.1

    申请日:2017-08-03

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种可联合丙戊酸共同使用提高表达水平的抗凋亡CHO-K1细胞系的构建方法,所述构建方法包括如下步骤:(1)在BAK、BAX基因的外显子上分别设计出相应的sgRNA序列;(2)制备PSK-sgRNA-BAK、PSK-sgRNA-BAX质粒;(3)将质粒转染至CHO-K1细胞中,之后经过筛选,挑选单克隆;获得不同的细胞系;(4)Western Blot检测;(5)功能鉴定及验证;(6)利用敲除型细胞系构建的外源蛋白表达细胞系能联同丙戊酸一起使用,进一步的提升外源蛋白表达水平。本发明制得的稳定细胞系能够延长其重组蛋白合成时间,获得更多的重组蛋白。

    EVs-TRPC5在检测乳腺癌耐药程度中的应用

    公开(公告)号:CN103954770B

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201410170932.0

    申请日:2014-04-25

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: G01N33/68 C12Q1/68

    CPC分类号: C12Q1/68 G01N33/68

    摘要: EVs-TRPC5在检测乳腺癌耐药程度中的应用,具体检测方法为:(1)收集患有乳腺癌的病人或动物的血液样本,分别通过离心去除样本中的完整细胞、血小板及细胞碎片,最后离心收集样本中的EVs;(2)可用RT-PCR法或者Elisa法检测收集到的EVs中TRPC5的表达情况,若TRPC5表达阳性,为出现耐药性的可疑病人或动物。本发明根据血液EVs中TRPC5的表达的高低,可显示出乳腺癌肿瘤细胞耐药转变的情况,具有检测方法简单、速度快、灵敏度高、成本低的优点。

    阻断型抗体T5E3在逆转肿瘤多药耐药中的应用

    公开(公告)号:CN102836430A

    公开(公告)日:2012-12-26

    申请号:CN201210318387.6

    申请日:2012-09-02

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明提供TRPC5的阻断型抗体T5E3的一种新用途,即:TRPC5的阻断型抗体T5E3在逆转肿瘤多药耐药中的应用,所述阻断型抗体的制备方法为:以人工合成或基因表达获得的E3肽段作为抗原并免疫动物制得,所述肿瘤多药耐药是由P-gp介导产生。本发明的重要之处是发现了TRPC5与肿瘤多药耐药密切相关,能间接上调介导肿瘤产生多药耐药的P-gp蛋白在多药耐药肿瘤细胞中的表达水平,以及TRPC5阻断型抗体T5E3对体内外肿瘤细胞的多药耐药具有明显的逆转作用,且对实验动物无毒副作用,因此,本发明为肿瘤多药耐药的逆转提供了新的思路,本发明阻断型抗体T5E3是一种具有良好开发前景的肿瘤多药耐药逆转剂。

    一种用于抗病毒药物筛选的方法

    公开(公告)号:CN102121053A

    公开(公告)日:2011-07-13

    申请号:CN201010580148.9

    申请日:2010-12-09

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及一种新的抗病毒药物筛选的方法。大部分病毒在侵染人体细胞的过程中会抑制体细胞正常的5‘-帽子结构依赖的翻译方式,而启动依赖病毒mRNA5’-非翻译区含有的内部核糖体进入元件(IRES)的翻译方式。本方法利用病毒的这一特性,以病毒mRNA5’-非翻译区IRES所介导的翻译水平的高低作为评价病毒活性的强弱,进而作为抗病毒药物筛选的指标。该方法使得抗病毒药物的筛选指标得以简化并同时可以对药物抗病毒活性进行定性或者定量评价,使得抗病毒药物筛选的速度大大提高。

    一种提高毕赤酵母重组蛋白表达量的方法

    公开(公告)号:CN102120979A

    公开(公告)日:2011-07-13

    申请号:CN201010580240.5

    申请日:2010-12-09

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N1/38 C12N1/19 C12R1/85

    摘要: 本发明涉及一种新的提高重组蛋白的表达的方法。在正常重组毕赤酵母的工艺流程的基础上,加入微量的退黑激素可以大大提高重组蛋白的表达。该方法使得重组酵母菌高密度发酵时由于供氧不均衡等胁迫带来的酵母内部自由基积累得到降低,改善了高密度发酵过程中因自由基带来的对酵母本身的损伤,从而改善了酵母本身的生理状况。使用退黑激素后,重组蛋白的表达量得到了很大程度的提高。