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公开(公告)号：CN117646046A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202311405230.1
申请日：2023-10-27
申请人： 青岛龙鼎生物技术有限公司 , 山东大学
摘要： 本发明公开了一种利用双酶级联重组枯草芽孢杆菌催化D‑葡萄糖生物合成D‑阿洛酮糖的方法，包括以下步骤：将D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶基因dpe连接到载体质粒上，得到重组质粒p‑dpe；将葡萄糖异构酶基因gi连接到重组质粒p‑dpe上，得到重组质粒p‑dpe‑gi；将重组质粒p‑dpe‑gi转化到枯草芽孢杆菌中并进行培养，筛选得到重组菌株；将重组菌株接种到培养基中培养，用含D‑葡萄糖的底物溶液重悬收集的菌体，恒温下反应，离心取上清液经过滤得到D‑阿洛酮糖。本发明所述的方法细胞催化剂易得，操作简单，反应条件温和，生产效率高且成本低，省时省力，且D‑阿洛酮糖的转化率高于15％。
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公开(公告)号：CN117264793B
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311260660.9
申请日：2023-09-27
申请人： 陕西海斯夫生物工程有限公司
摘要： 本发明提供一种高产β‑胡萝卜素的重组解脂亚罗酵母，所述重组解脂亚罗酵母是在解脂亚罗酵母polf菌株中过表达carB、carRP和GGPPSA124Y‑T132D基因、并表达ERG20、IDI、ERG12和tHMGR基因的工程菌株，所述GGPPSA124Y‑T132D基因是将GGPPS基因的A124突变为酪氨酸、T132突变为天冬氨酸得到的。本发明所得重组解脂亚罗酵母在摇瓶发酵中β‑胡萝卜素产量达到2.09g/L(95.3mg/g DCW)；在50L发酵罐中β‑胡萝卜素产量达到16.71g/L(184.98mg/g DCW)，显著领先现有技术。
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公开(公告)号：CN117604014A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202311598812.6
申请日：2023-11-27
申请人： 齐鲁工业大学(山东省科学院)
IPC分类号： C12N15/70 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N1/21 , C12P13/08 , C12R1/19
摘要： 本发明提供了一种基于纤维小体的胞内高产L‑赖氨酸工程菌构建方法及应用，属于基因工程和酶工程领域，所述构建方法为利用对接蛋白DocA‑S3和黏连蛋白Coh组装两种酶基因组合，构建质粒表达载体，将质粒表达载体转化入大肠杆菌，获得大肠杆菌工程菌；所述两种酶基因组合包括：aspC和lysC组合、lysC和asd组合、asd和dapA组合、dapA和dapB组合、dapB和dapE组合、dapE和dapF组合或dapF和lysA组合；本发明利用纤维小体对接蛋白突变体DocA‑S3实现了在细胞内与纤维小体黏连蛋白的有效组装，本发明提供的工程菌能够有效提高L‑赖氨酸的产量。
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公开(公告)号：CN117604009A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202311573086.2
申请日：2023-11-23
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种烟草Ntε‑LCY1基因无义突变体及其应用。提供一种烟草Ntε‑LCY1基因突变体，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，其为核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的烟草Ntε‑LCY1基因的第435位核苷酸由G变为A所得。所述烟草Ntε‑LCY1基因突变体能够显著提高烟草叶片中β‑胡萝卜素和叶黄素的含量，可用于创制高类胡萝卜素含量的烟草材料。
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公开(公告)号：CN117603891A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202310859660.4
申请日：2023-07-13
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 一种用于MK‑n生产的乳酸乳球菌及其构建方法与应用，乳酸乳球菌乳脂亚种MG1363含有来自枯草芽孢杆菌BS168导入的表达甲基萘醌主环合成途径相关的Men系列基因以及来自嗜热地衣芽孢杆菌的聚异戊二烯途径上合成类异戊二烯侧链相关基因；1、所述甲基萘醌主环途径相关基因包括MenA、MenF等基因；所述聚异戊二烯途径上相关基因包括ispA、fni基因等；2、所述发酵培养基，通过外源添加2.5μg/mL的血红素以及优化碳氮源，使生物量提高近1.5倍。本发明构建的乳酸乳球菌及优化的发酵培养条件能够较高且稳定产生MK‑n，约0.8mg/g，具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN117587000A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202311589249.6
申请日：2023-11-24
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N9/38 , C12P19/12 , A23L33/125 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了通过构建体内CE‑MI酶级联催化体系提高乳糖到乳果糖转化率，属于酶工程领域。本发明以大肠杆菌表达CsCE/Q371E实现乳糖的细胞发酵生产，通过将大肠杆菌的lacZ基因敲除将乳果糖产量达到3.55g/L。为解除依匹乳糖到乳果糖结构异构转化的限速步骤，提高乳糖到乳果糖转化率，挖掘到一款MmMI酶与CsCE酶级联催化，产量达到4.0g/L。通过定点饱和突变获得一款结构异构催化性能提升的突变体MmMI/F242N；在此基础上，通过RBS工程调控优化CsCE与MmMI的表达量，在添加8g/L乳清粉作为底物时摇瓶发酵，乳果糖产量达到6.12g/L，其转化率91.3％，为目前报道最高水平。
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公开(公告)号：CN117586969A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202210947431.3
申请日：2022-08-09
申请人： 中国科学院分子植物科学卓越创新中心
IPC分类号： C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P15/00 , C12N15/12 , C07K14/80 , C12R1/19
摘要： 本发明涉及对映‑贝壳杉烯酸13‑羟基化酶(KA13H)变体及其应用。具体提供一种羟基化活性提高的KA13H变体，其具有SEQ ID NO:1或2所示的序列并且N端1‑29位氨基酸进行替换。本发明揭示了重组型KA13H及其突变体，其用于生产甜菊醇可显著提升产量，同时减少中间体积累。
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公开(公告)号：CN117586938A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202410069807.4
申请日：2024-01-18
申请人： 天津合生领航生物科技有限公司
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/61 , C12N15/54 , C12P19/26 , A23L33/21 , C12R1/19 , A61P37/02 , A61P1/00 , A61P31/12 , A61P3/02
摘要： 本发明涉及一种高效合成乳酰‑N‑新四糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，通过筛选高效的β‑1,3‑乙酰葡萄糖胺转移酶及β‑1,4‑半乳糖基转移酶并异源引入大肠杆菌BL21（DE3）中，对其进行基因组多位点的基因编辑，外加受体乳糖，构建高效生产乳酰‑N‑新四糖的菌株；进而优化其前体UDP‑乙酰氨基葡萄糖和UDP‑半乳糖的供应，增强乳糖的积累进一步提高乳酰‑N‑新四糖的产量。通过重组大肠杆菌进行培养和发酵，能够高效合成得到乳酰‑N‑新四糖，并且能够进一步提高所得产物的生物安全性，适用于制备食品或药物。
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公开(公告)号：CN113388560B
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202110550598.1
申请日：2021-05-20
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N9/10 , C12N9/02 , C12N9/04 , C12N9/88 , C12N9/90 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12P23/00 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种合成类胡萝卜素的基因工程菌及其构建方法。该基因工程菌的构建具体为将Deinococcus xibeiensis R13类胡萝卜素合成途径中的关键酶基因crtE、crtB、crtI、crtLm、cruF、crtD和crtO，与表达载体连接构建重组质粒，然后转化到大肠杆菌中，获得合成类胡萝卜素的新型基因工程菌。本发明构建的工程
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公开(公告)号：CN115895987B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202210922706.8
申请日：2022-08-02
申请人： 衢州益康园生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高果糖软骨素产量的重组菌株及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌基因组上强化合成UDP‑乙酰氨基半乳糖胺路径的关键酶氨基转移酶glmS和磷酸葡萄糖胺变位酶glmM的编码基因，在解决质粒不稳定等问题的同时，提高了果糖软骨素的产量，使摇瓶发酵条件下的果糖软骨素的产量从90mg/L提高至245mg/L，在7.5L发酵罐发酵的产量达到7.12g/L，为后续的工业化奠定了基础。
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