一种联产丙酮酸和α‑酮戊二酸的重组光滑球拟酵母

    公开(公告)号:CN106635852A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201611112770.0

    申请日:2016-12-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种联产丙酮酸和α‑酮戊二酸的重组光滑球拟酵母,属于发酵工程技术领域。通过基因工程技术,将来源于酿酒酵母的CDC19整合到pY26‑TEF‑GPD表达载体上,构建酵母重组表达质粒pY26‑CDC19,并将其电转进受体菌TgU‑中获得一株高产丙酮酸的工程菌株TgU‑(pY26‑CDC19),相对于对照菌,总酸产量(丙酮酸和α‑酮戊二酸)、总酸转化率和总酸生产强度分别提高了112.2%、115.6%和155.6%,最重要的是重组菌TgU‑(pY26‑CDC19)的α‑酮戊二酸产量从其改造之前的0g/L增加到了30.1g/L。

    一种大肠杆菌高强度组合启动子及其应用

    公开(公告)号:CN106591310A

    公开(公告)日:2017-04-26

    申请号:CN201611126585.7

    申请日:2016-12-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌高强度组合启动子及其应用,属于合成生物技术领域。本发明提供了高转录强度启动子PssrA、PdnaKJ、PgrpE、PalsRBACE和高翻译强度启动子PrpsT。分别将PssrA、PdnaKJ、PgrpE、PalsRBACE和PrpsT融合后得到4种具有高表达强度的组合启动子。该组合启动子的最高强度为10mM阿拉伯糖诱导的PBAD启动子的1.7倍。该组合启动子是一种安全且高效的基因表达元件。

    一种将低值化合物转化为咖啡酸的高效生物合成方法

    公开(公告)号:CN106497990A

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201610928576.3

    申请日:2016-10-31

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P7/42 C12N9/88 C12Y401/03

    Abstract: 本发明公开了一种将低值化合物转化为咖啡酸的高效生物合成方法,属于生物化工领域。本发明中,酪氨酸苯裂合酶以邻苯二酚、丙酮酸和氨作为底物合成左旋多巴,酪氨酸氨基裂合酶将左旋多巴转化为反-咖啡酸和NH3。由于邻苯二酚、丙酮酸钠和氯化铵均为相对廉价的化合物,因此本发明创建了一种将低值化合物转化为咖啡酸的生物合成方法,且易于大规模生产。与化学合成方法相比,该方法的产物为单一的反-咖啡酸,不需要对同分异构体进行进一步的分离。

    一种从微生物发酵液或酶转化液中提取α-酮戊二酸的方法

    公开(公告)号:CN106496020A

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201610893527.0

    申请日:2016-10-13

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C07C51/42 C07C59/347

    Abstract: 本发明公开了一种从微生物发酵液或酶转化液中提取α-酮戊二酸的方法,属于生物分离提取技术领域。本发明经离心去菌体和其他可见固型物、超滤去除大分子杂质、减压蒸发浓缩后用乙酸乙酯或乙酸丁酯等非水溶性有机溶剂萃取、蒸发冷却结晶得到α-酮戊二酸粗品、乙酸乙酯或乙酸丁酯等非水溶性有机溶剂洗涤粗品、离心烘干粉碎获得合格的α-酮戊二酸产品。本发明具有工艺操作简单高效、费用低、产品纯度高等优点,适合于α-酮戊二酸的工业化生产。

    一种阿维菌素高产菌株的高效筛选方法

    公开(公告)号:CN106222120A

    公开(公告)日:2016-12-14

    申请号:CN201610828460.2

    申请日:2016-09-18

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12N1/20 C12N13/00 C12N15/01 G01N21/31

    Abstract: 本发明公开了一种阿维菌素高产菌株的高效筛选方法,属于代谢工程技术领域。本发明首先通过几种不同的阿维链霉菌斜面培养基进行比较,为阿维链霉菌选择了合适的斜面培养基,保证了出发菌株的良好性。对出发菌株阿维链霉菌进行了ARTP诱变等类似诱变处理手段,多孔板培养和酶标仪高通量检测方法结合使用,简化了整个筛选过程,提高了筛选效率。并对酶标仪初筛方法进行验证,通过比较酶标仪测得的孔板OD值与高效液相检测得到的孔板效价相比较,发现两者有较好的相关性,从而证明酶标仪初筛的可行性与准确性。筛选获得了一株阿维菌素的高产量诱变菌株,相比于原始菌,诱变菌株的阿维菌素产量在摇瓶上提高了10%以上,在30L发酵罐上提高了10%以上。

    一种使用漆酶催化合成水飞蓟宾的方法

    公开(公告)号:CN105400843A

    公开(公告)日:2016-03-16

    申请号:CN201510816624.5

    申请日:2015-11-20

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P17/162

    Abstract: 本发明公开了一种使用漆酶催化合成水飞蓟宾的方法,属于生物化工领域。本发明以漆酶催化松柏醇和黄杉素合成了水飞蓟宾的4种同分异构体。该反应在水相中进行,避免了有机溶剂的使用;反应的效率较高,在1h内即可生成0.9694mg/L水飞蓟宾。该方法是一种安全且高效的合成水飞蓟宾合成方法。

    一种强化解脂亚洛酵母合成α-酮戊二酸的方法

    公开(公告)号:CN104357344A

    公开(公告)日:2015-02-18

    申请号:CN201410666089.5

    申请日:2014-11-19

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P7/50 C12N9/0016 C12Y104/01002

    Abstract: 本发明公开了一种强化解脂亚洛酵母合成α-酮戊二酸的方法,属于代谢工程技术领域。本发明在野生型解脂亚洛酵母Y.lipolytica WSH-Z06菌株细胞中过量表达谷氨酸脱氢酶,构建了重组菌株Y.lipolytica-GDH2,调节细胞通过代谢谷氨酸合成α-酮戊二酸。发酵过程中,为了提高细胞内谷氨酸供应,在发酵培养基中添加L-蛋氨酸亚胺,抑制细胞内谷氨酸代谢合成谷氨酰胺,强化了α-酮戊二酸积累明显提高。因此,通过此方法调节细胞内氨基酸代谢是一种强化α-酮戊二酸积累的有效手段。

    一种以葡萄糖为底物合成生松素的大肠杆菌工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN102936577B

    公开(公告)日:2014-11-26

    申请号:CN201210454163.8

    申请日:2012-11-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种从葡萄糖合成生松素的大肠杆菌工程菌及其应用,属于遗传工程或代谢工程领域。本发明采用合成生物学和代谢工程的手段,分别合成松素代谢中的八个基因组成的合成途径引入大肠杆菌Escherichia coli(BL21),从而获得了一株能以葡萄糖为底物合成黄酮骨架物质生松素的重组菌,其在摇瓶中以葡萄糖为唯一底物发酵60h后,生松素的产量达到21mg/L。本发明利用合成生物学的方法,在大肠杆菌体内成功构建八基因组成的合成途径,成功实现了从葡萄糖合成生松素。为今后微生物法生产黄酮类物质提供了一定的借鉴意义。

Patent Agency Ranking