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公开(公告)号：CN116515870A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310454359.5
申请日：2023-04-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株整合端粒酶逆转录酶的CHO细胞株及其应用。本发明以CHO‑K1为出发细胞株构建了端粒酶逆转录酶(TERT)增强表达细胞株CHO‑K1‑TERT。对其进行流加培养，发现细胞株CHO‑K1‑TERT通过减缓细胞衰老和细胞凋亡，将活细胞密度从15×106cells/mL提高到了25×106cells/mL，培养时间从13d延长到了19d。验证了其表达外源蛋白(HSA)的能力，HSA的最终表达量可以达到783mg/L，是以CHO‑K1为出发细胞株构建的CHO‑K1‑HSA‑7表达量的两倍左右。
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公开(公告)号：CN109207432B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201811275713.3
申请日：2018-10-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006883358‑1稳定表达蛋白质的应用，所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006883358.1的第6874389碱基处；所述位点附近6874325‑6874443范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。
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公开(公告)号：CN109295092A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811274637.4
申请日：2018-10-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_003613638-1稳定表达蛋白质的应用，所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_003613638.1的第1969647碱基处；所述位点附近范1969591-1969721围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。
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公开(公告)号：CN109136193A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201811274848.8
申请日：2018-10-30
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N5/0682 , C12N15/85 , C12N15/907 , C12N2510/02
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006884764‑1稳定表达蛋白质的应用，所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006884764.1的第66645碱基处；所述位点附近66571‑66691范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。
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公开(公告)号：CN103992991B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201310557568.9
申请日：2013-11-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种胆盐水解酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对胆盐水解酶氨基酸序列比对分析和3-D结构的同源模拟及叠加分析，确定胆盐水解酶底物特异性氨基酸突变位点，利用定点突变技术将底物特异性氨基酸突变为非极性氨基酸，将突变体导入宿主菌，获得突变菌株。突变体所产胆盐水解酶均为活性酶，且与野生型相比，突变体对甘氨结合胆盐的水解能力都有下降的趋势，而对牛磺结合胆盐的水解能力则有增加的趋势。这为提高BSH对牛磺结合胆盐的水解能力和揭示其对底物的结合机制奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102220408B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201110119378.X
申请日：2011-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产胆盐水解酶的乳酸菌及其筛选方法和应用，属于食品生物技术领域。本发明采用改进的定性分析与定量分析相结合的方法，可准确、高效的用于胆盐水解酶菌株的筛选；采用本发明方法筛选出一株具有较高胆盐水解酶活性的植物乳杆菌，该菌株及其产生的胆盐水解酶可应用于食品领域，用于减少人体血清胆固醇含量。
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公开(公告)号：CN114058625B
公开(公告)日：2022-07-15
申请号：CN202111415460.7
申请日：2021-11-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003613781.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003613781.1的第1497187碱基处上下游100bp范围内碱基，即第1497087‑1497287碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003613781.1的第1497187碱基处上下游1497087‑1497287碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。
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公开(公告)号：CN114058625A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111415460.7
申请日：2021-11-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003613781.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003613781.1的第1497187碱基处上下游100bp范围内碱基，即第1497087‑1497287碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003613781.1的第1497187碱基处上下游1497087‑1497287碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。
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公开(公告)号：CN109295093B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201811274846.9
申请日：2018-10-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006882456‑1稳定表达蛋白质的应用，所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006882456.1的第1020651碱基处；所述位点附近1020585‑1020690范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。
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公开(公告)号：CN109136193B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN201811274848.8
申请日：2018-10-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006884764‑1稳定表达蛋白质的应用，所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006884764.1的第66645碱基处；所述位点附近66571‑66691范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。
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