一种人FASN基因高表达的前列腺癌细胞模型的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN118421713A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202410617933.9

    申请日:2024-05-17

    申请人: 云南大学

    摘要: 本发明涉及一种人FASN基因高表达的前列腺癌细胞模型的制备方法及应用,所述制备方法包括对人前列腺癌细胞系22RV1进行编辑,对FASN基因的dPAS序列进行突变,将其由活性的ATTAAA突变为失活的CCTAAA,编辑后的细胞记为22RV1‑FS。本发明通过使用CRISPR/Cas9的编辑方法,特异性敲除FASN基因长转录本的poly(A)信号位点,使FASN基因只产生短的转录本。令人惊喜的是只产生FASN基因短转录本的前列腺癌细胞22RV1‑FS,相比未编辑的22RV1细胞具有更高的FASN的mRNA水平和蛋白质表达,FASN高表达的前列腺癌细胞模型22RV1‑FS被成功制备。

    一种制备弓形虫减毒突变体的方法及其应用

    公开(公告)号:CN118389562A

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202410807648.3

    申请日:2024-06-21

    申请人: 中山大学

    发明人: 伦照荣 汤昊天

    摘要: 本发明公开了一种制备弓形虫减毒突变体的方法及其应用,所述方法为使用CRISPR/Cas9系统敲除弓形虫基因组中的基因组合物;所述基因组合物由ompdc基因、ldh1基因和gra4基因组成。本发明采用基因编辑技术构建了一种具有强免疫激活能力且安全性高的弓形虫减毒虫株,该虫株对宿主的免疫抑制效应弱,在宿主体内仅能短期存活,同时能诱发宿主产生高水平的免疫应答,为抵抗弓形虫感染提供了新的免疫治疗和预防手段,对于人类健康以及畜牧业发展均有重要的应用价值。

    谷氨酸棒杆菌基因工程菌的制备方法、用途及其自调节产物配比工艺

    公开(公告)号:CN118389386A

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202410553417.4

    申请日:2024-05-07

    发明人: 袁旭峰 安保军

    摘要: 本发明提供一种用于高效联产谷氨酸和天冬氨酸的谷氨酸棒杆菌基因工程菌的制备方法及CRISPRi干扰自调节产物配比的工艺,涉及基因工程技术领域,结合基因组整合、基因敲除、基因过表达、外源基因引入技术构建联产谷氨酸和天冬氨酸的全细胞催化剂,联合基因工程、代谢工程和蛋白质工程手段使得仅一种底盘细胞即可完成谷氨酸和天冬氨酸的一步联产。通过CRISPR/dCas9的CRISPRi干扰技术,成果搭建自调节产物配比新工艺,实现谷氨酸与天冬氨酸产物的配比可在1:8‑3:1之间的精准调节。本发明一步法高效联产不同配比氨基酸的制备方法具有条件温和、周期短、产量高、配比可调节的优点,免去对原料再配比处理,减少生产工序,实现了谷氨酸‑天冬氨酸联产的生物低成本制备。

    一种利用I型CRISPR-Cas系统同时实现基因编辑和转录调控的方法

    公开(公告)号:CN114657177B

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202011546641.9

    申请日:2020-12-24

    摘要: 本发明公开了一种利用I型CRISPR‑Cas系统同时实现基因编辑和转录调控的方法。本发明提供的方法包括如下步骤:利用I型CRISPR‑Cas系统甲对基因甲进行转录调控并且利用I型CRISPR‑Cas系统乙对基因乙进行基因编辑;I型CRISPR‑Cas系统甲的目标基因为基因甲且为改造后的I型CRISPR‑Cas系统;改造后的I型CRISPR‑Cas系统指的是将现有技术中的I型CRISPR‑Cas系统的gRNA进行改造后的I型CRISPR‑Cas系统;对gRNA的改造为用spacer截短体取代现有技术中的I型CRISPR‑Cas系统的gRNA中的spacer;I型CRISPR‑Cas系统乙的目标基因为基因乙且为现有技术中的I型CRISPR‑Cas系统。本发明可以同时实现基因编辑和不同程度的转录抑制。

    合成核酸分子的方法
    90.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118355127A

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202180104210.3

    申请日:2021-11-15

    摘要: 本发明提供了用于从重叠寡核苷酸的通用文库合成任何可能的DNA序列的产物DNA分子的方法。所述方法涉及将多个所述重叠寡核苷酸组合在反应池中,其中所述多个寡核苷酸的序列至少包含所述产物DNA分子的子序列。所述方法还涉及将所述多个寡核苷酸退火,进行连接步骤以及进行扩增步骤,由此合成所述产物DNA分子的子序列。本发明可以用于从所述通用文库合成任何可能的序列的DNA分子,这可以通过分级组装方案来完成。在一个实施例中,所述通用文库包含可以合成为任何可能的DNA序列的少于10,000个预制寡核苷酸。在任一实施例中,所述产物DNA分子具有每2,000个核苷酸小于1个错误的错误率。