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公开(公告)号：CN104232563A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201310241711.3
申请日：2013-06-18
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海科立特农科(集团)有限公司 , 上海市农业科学院
摘要： 本发明涉及含猪圆环病毒2型细胞的培养方法，该方法包括单个含猪圆环病毒2型PK15细胞克隆及其亚群的培养：将PCV2/SN07-12种毒接种于无1型猪圆环病毒污染的猪肾细胞(PK15细胞)中，PCV2/SN07-12种毒的微生物保藏登记号为：CCTCC NO：V201304，阳性含猪圆环病毒2型PK15细胞克隆株的筛选、高滴度猪圆环病毒2型的增殖三个步骤，培养得到病毒滴度达107.0TCID50/ml。与现有技术相比，本发明培养得到的细胞具有工艺简单、病毒滴度高、生物学特性稳定等优点。
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公开(公告)号：CN101289655B
公开(公告)日：2010-11-03
申请号：CN200710172409.1
申请日：2007-12-17
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司
IPC分类号： C12N7/00
摘要： 本发明涉及一种制备猪圆环病毒的工艺，该方法包括制备PK15细胞液、采用生物反应器技术与灌注工艺培养猪圆环病毒2型(PCV2)。与现有技术相比，本发明具有病毒产量高、操作方便、病毒效价高、操作空间小、工艺参数控制精确等优点，可用以最终提高PCV2疫苗免疫原性和研制高效的PCV2疫苗。
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公开(公告)号：CN101745106A
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN200810204266.2
申请日：2008-12-09
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海科立特农科(集团)有限公司
IPC分类号： A61K39/125 , A61P31/20
摘要： 本发明涉及一种猪细小病毒病活疫苗及其制备方法，该活疫苗采用猪细小病毒弱毒PPVS-1A株(HA效价≥29，TCID50≥107.0/ml)，经接种长势良好的猪睾丸(ST)传代细胞，收获细胞培养物，加入适宜的稳定剂，经冷冻真空干燥制成，所述的活疫苗的每头份病毒含量≥105.0TCID50。与现有技术相比，本发明的猪细小病毒病活疫苗免疫原性好、免疫后产生抗体快，产生的抗体滴度高且维持时间长，保存期长，免疫剂量小，在配种前几周进行疫苗注射可使怀孕母猪于易感期保持坚强的免疫力，是预防猪细小病毒病的极佳选择，采用的制备方法工艺合理，价格较低，极大降低养殖业的成本负担。
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公开(公告)号：CN106011314A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN104109678A
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201310131737.2
申请日：2013-04-16
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
摘要： 一种化学合成的猪圆环病毒Cap蛋白基因、其改造方法及应用，包括PCV2ORF2基因序列的来源及改造、引物的设计与合成、PCV2 ORF2短片段DNA的合成、全长基因的合成及合成后序列、表达载体的构建和目的基因在毕赤酵母中的表达等步骤。本发明综合参考了PTDS法和PAS法，使基因合成费用降低，步骤简单(两步PCR)，错误率低，合成周期短。在整个化学合成的过程中，运用了高保真的Taq酶，使误配的碱基序列能够在合成过程中得以修正，从而最大限度的减少了错误碱基的产生。将该基因克隆入酵母表达载体构建重组表达质粒，重组表达质粒规模发酵后提取的表达产物，可作为检测PCV2抗体的诊断抗原，也可制备亚单位疫苗或核酸疫苗。
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公开(公告)号：CN103725795A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310461343.3
申请日：2013-09-30
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒2型环介导等温扩增（LAMP）检测方法，包括以下步骤：1）首先设计并合成特异性引物；2）从细胞提取病毒DNA模板；3）目的片段的获得：分别配制LAMP和PCR反应体系，按照LAMP和PCR反应程序进行反应得到目的片段；4）定性LAMP和PCR检测。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好，并且检测的检测极限极低，灵敏度高，可准确定性检测出猪圆环病毒2型，达到预防和控制猪圆环病毒2型流行的作用。
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公开(公告)号：CN103820396A
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201210470116.2
申请日：2012-11-19
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
摘要： 本发明涉及猪流行性腹泻病毒分离培养方法，将仔猪动小肠冲洗干净后利用培养基进行培养，并进行接种，检测为阳性的PEDV样品用生理盐水稀释成体积比为1∶1的悬液，培养收获出现细胞病变(CPE)后收获细胞，继续冻融接种单层vero细胞，利用培养基培养得到出现细胞病变(CPE)后收获细胞，既分离得到猪流行性腹泻病毒。与现有技术相比，本发明的分离成功率高，分离得到的猪流行性腹泻病毒病毒毒力强、分离的病毒纯度高。
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公开(公告)号：CN106011314B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN107304454A
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201610259975.5
申请日：2016-04-25
申请人： 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒2型的LAMP可视化快速检测试剂盒，还公开了用于检测猪圆环病毒2型的LAMP引物及其检测方法，根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列，设计合成3对引物，通过对LAMP条件的优化建立了PCV2的LAMP诊断方法，为猪圆环病毒2型的现场快速诊断提供了一种简便快速的方法，并依据该方法研制成PCV2的LAMP可视化快速检测试剂盒，该试剂盒的操作简单，并直接通过颜色变化进行结果判定，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN101991849A
公开(公告)日：2011-03-30
申请号：CN200910056609.X
申请日：2009-08-18
申请人： 上海科立特农科(集团)有限公司 , 上海佳牧生物制品有限公司
IPC分类号： A61K39/245 , A61P31/20
摘要： 本发明涉及一种猪伪狂犬病灭活疫苗的制备方法，该方法包括以下步骤：用猪睾丸细胞培养病毒，当细胞长满单层时，接种猪伪狂犬病病毒，然后加入细胞维持液中，静止或旋转培养，当细胞有80％以上出现病变时，收获细胞培养物，反复冻融得到含上清液的细胞毒液，将毒价检测合格的细胞毒液与甲醛混合进行灭活，再与乳化剂混合乳化，得到猪伪狂犬病灭活疫苗。与现有技术相比，本发明配制疫苗用的毒株具有较强的毒力、毒株病毒效价高、猪伪狂犬病灭活疫苗的免疫原性好、免疫周期长、采用的制备方法工艺合理，价格较低，极大降低养殖业的成本负担。
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