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公开(公告)号：CN103820396A
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201210470116.2
申请日：2012-11-19
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
摘要： 本发明涉及猪流行性腹泻病毒分离培养方法，将仔猪动小肠冲洗干净后利用培养基进行培养，并进行接种，检测为阳性的PEDV样品用生理盐水稀释成体积比为1∶1的悬液，培养收获出现细胞病变(CPE)后收获细胞，继续冻融接种单层vero细胞，利用培养基培养得到出现细胞病变(CPE)后收获细胞，既分离得到猪流行性腹泻病毒。与现有技术相比，本发明的分离成功率高，分离得到的猪流行性腹泻病毒病毒毒力强、分离的病毒纯度高。
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公开(公告)号：CN114015808A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111401011.7
申请日：2021-11-24
申请人： 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 一种猪圆环病毒2型的荧光定量PCR检测方法及试剂盒，对猪圆环病毒2型即PCV2的ORF2基因设计了相应的特异性引物和探针，与PCV1、CSFV、PRRSV、PRV不发生交叉反应，检测极限和定量极限分别为10和100拷贝数。本发明的试剂盒灵敏度高，特异性强，稳定性好，循环阈值(Ct)与标准DNA模板在102～106拷贝/μL浓度范围内具有极好的线性关系，相关系数为1；重复性好，批内实验中Ct值的变异系数在0.59％到1.05％之间，批间实验的Ct值变异系数为1.9％到4.2％，为猪圆环病毒Ⅱ型的检测和流行病学的调查提供了一种简便快速的诊断方法。
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公开(公告)号：CN104232563A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201310241711.3
申请日：2013-06-18
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海科立特农科(集团)有限公司 , 上海市农业科学院
摘要： 本发明涉及含猪圆环病毒2型细胞的培养方法，该方法包括单个含猪圆环病毒2型PK15细胞克隆及其亚群的培养：将PCV2/SN07-12种毒接种于无1型猪圆环病毒污染的猪肾细胞(PK15细胞)中，PCV2/SN07-12种毒的微生物保藏登记号为：CCTCC NO：V201304，阳性含猪圆环病毒2型PK15细胞克隆株的筛选、高滴度猪圆环病毒2型的增殖三个步骤，培养得到病毒滴度达107.0TCID50/ml。与现有技术相比，本发明培养得到的细胞具有工艺简单、病毒滴度高、生物学特性稳定等优点。
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公开(公告)号：CN106011314A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN104109678A
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201310131737.2
申请日：2013-04-16
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
摘要： 一种化学合成的猪圆环病毒Cap蛋白基因、其改造方法及应用，包括PCV2ORF2基因序列的来源及改造、引物的设计与合成、PCV2 ORF2短片段DNA的合成、全长基因的合成及合成后序列、表达载体的构建和目的基因在毕赤酵母中的表达等步骤。本发明综合参考了PTDS法和PAS法，使基因合成费用降低，步骤简单(两步PCR)，错误率低，合成周期短。在整个化学合成的过程中，运用了高保真的Taq酶，使误配的碱基序列能够在合成过程中得以修正，从而最大限度的减少了错误碱基的产生。将该基因克隆入酵母表达载体构建重组表达质粒，重组表达质粒规模发酵后提取的表达产物，可作为检测PCV2抗体的诊断抗原，也可制备亚单位疫苗或核酸疫苗。
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公开(公告)号：CN103725795A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310461343.3
申请日：2013-09-30
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒2型环介导等温扩增（LAMP）检测方法，包括以下步骤：1）首先设计并合成特异性引物；2）从细胞提取病毒DNA模板；3）目的片段的获得：分别配制LAMP和PCR反应体系，按照LAMP和PCR反应程序进行反应得到目的片段；4）定性LAMP和PCR检测。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好，并且检测的检测极限极低，灵敏度高，可准确定性检测出猪圆环病毒2型，达到预防和控制猪圆环病毒2型流行的作用。
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公开(公告)号：CN106011314B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN107304454A
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201610259975.5
申请日：2016-04-25
申请人： 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒2型的LAMP可视化快速检测试剂盒，还公开了用于检测猪圆环病毒2型的LAMP引物及其检测方法，根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列，设计合成3对引物，通过对LAMP条件的优化建立了PCV2的LAMP诊断方法，为猪圆环病毒2型的现场快速诊断提供了一种简便快速的方法，并依据该方法研制成PCV2的LAMP可视化快速检测试剂盒，该试剂盒的操作简单，并直接通过颜色变化进行结果判定，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN101289655B
公开(公告)日：2010-11-03
申请号：CN200710172409.1
申请日：2007-12-17
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司
IPC分类号： C12N7/00
摘要： 本发明涉及一种制备猪圆环病毒的工艺，该方法包括制备PK15细胞液、采用生物反应器技术与灌注工艺培养猪圆环病毒2型(PCV2)。与现有技术相比，本发明具有病毒产量高、操作方便、病毒效价高、操作空间小、工艺参数控制精确等优点，可用以最终提高PCV2疫苗免疫原性和研制高效的PCV2疫苗。
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公开(公告)号：CN111589215A
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN202010612012.5
申请日：2020-06-30
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司
IPC分类号： B01D33/41 , B01D33/067 , B01D33/11 , B01D33/80
摘要： 本发明公开了一种圆环抗原过滤装置及过滤方法，第一机箱的四个角分别与主立柱及三个辅立柱的顶端固定连接，第一机箱内部设置有第一筒体，第一筒体内部设置有第一过滤器，第一机箱上表面设置有第一升降平台，第一升降平台上表面设置有第一减速电机，第一减速电机的输出轴与第一过滤器相连，第二机箱的一个角与主立柱活动连接，第二机箱内部设置有第二筒体，第二筒体内部设置有第二过滤器，第二机箱上表面设置有第二升降平台，第二升降平台一侧设置有第二减速电机，第二减速电机与第二过滤器相连，结构合理，通过组合方法有效除去细胞碎片与杂质，又使滤芯不容易堵塞，增加滤芯使用次数，降低生产成本，新型过滤装置滤网清洗方便，可重复使用。
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