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公开(公告)号：CN106011314B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN107304454A
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201610259975.5
申请日：2016-04-25
申请人： 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒2型的LAMP可视化快速检测试剂盒，还公开了用于检测猪圆环病毒2型的LAMP引物及其检测方法，根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列，设计合成3对引物，通过对LAMP条件的优化建立了PCV2的LAMP诊断方法，为猪圆环病毒2型的现场快速诊断提供了一种简便快速的方法，并依据该方法研制成PCV2的LAMP可视化快速检测试剂盒，该试剂盒的操作简单，并直接通过颜色变化进行结果判定，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN106011314A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN103725795A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310461343.3
申请日：2013-09-30
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒2型环介导等温扩增（LAMP）检测方法，包括以下步骤：1）首先设计并合成特异性引物；2）从细胞提取病毒DNA模板；3）目的片段的获得：分别配制LAMP和PCR反应体系，按照LAMP和PCR反应程序进行反应得到目的片段；4）定性LAMP和PCR检测。本发明的检测方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好，并且检测的检测极限极低，灵敏度高，可准确定性检测出猪圆环病毒2型，达到预防和控制猪圆环病毒2型流行的作用。
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公开(公告)号：CN103757115A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410022452.X
申请日：2014-01-17
申请人： 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2563/159 , C12Q2545/114
摘要： 本发明公开了一种基于多重微滴PCR偶联荧光分光光度法的生物基因定性、定量、高通量检测方法。首先，设计特异性引物并对其选择性地进行不同荧光基团标记，随后应用上述荧光标记的特异性引物进行微滴PCR扩增，扩增产物经纯化后，用荧光分光光度计或酶标仪来测量纯化后的PCR产物中各个发射波长和荧光值含量，达到自动检测的目的，可同时进行定性、定量和高通量检测。本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增和定性、定量和高通量检测。
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公开(公告)号：CN105132590B
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN201510665837.2
申请日：2015-10-15
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及一种牛传染性鼻气管炎病毒的LAMP可视化检测方法。具体而言，本发明提供选自SEQ ID NO:1－6的引物序列，或引物组合物。本发明还提供一种检测试剂盒及检测牛传染性鼻气管炎病毒的方法。采用本发明的引物、方法和/或试剂盒可快速、方便、特异、灵敏、经济、可视化地检测牛鼻拭子、血液或其它组织中IBRV，为基层现场检测提供便利。
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公开(公告)号：CN105132590A
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201510665837.2
申请日：2015-10-15
申请人： 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/173
摘要： 本发明涉及一种牛传染性鼻气管炎病毒的LAMP可视化检测方法。具体而言，本发明提供选自SEQ ID NO:1－6的引物序列，或引物组合物。本发明还提供一种检测试剂盒及检测牛传染性鼻气管炎病毒的方法。采用本发明的引物、方法和/或试剂盒可快速、方便、特异、灵敏、经济、可视化地检测牛鼻拭子、血液或其它组织中IBRV，为基层现场检测提供便利。
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公开(公告)号：CN103757115B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201410022452.X
申请日：2014-01-17
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 本发明公开了一种基于多重微滴PCR偶联荧光分光光度法的生物基因定性、定量、高通量检测方法。首先，设计特异性引物并对其选择性地进行不同荧光基团标记，随后应用上述荧光标记的特异性引物进行微滴PCR扩增，扩增产物经纯化后，用荧光分光光度计或酶标仪来测量纯化后的PCR产物中各个发射波长和荧光值含量，达到自动检测的目的，可同时进行定性、定量和高通量检测。本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增和定性、定量和高通量检测。
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公开(公告)号：CN104164510A
公开(公告)日：2014-11-26
申请号：CN201410410218.4
申请日：2014-08-20
申请人： 上海市农业科学院 , 上海科立特农产品检测技术服务有限公司
CPC分类号： Y02A50/451 , C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2565/125
摘要： 本发明公开了一种利用多重PCR技术对食源性致病菌进行高通量快速检测的方法，依据四种主要的食源性致病菌沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增多性李斯特菌以及大肠杆菌O157：H7的保守区序列设计出适用于进行多重PCR的引物，用多重PCR技术检测农产品中的主要食源性致病菌，该检测方法特异性好，与8种相似菌种无交叉反应，扩增出的条带清晰，灵敏度也较高，检出限均可以达到103copies/ml，而且快速、方便。本发明设计的引物与多重PCR体系可制成适于快速检测食源性致病菌的试剂盒，利用此试剂盒可以大大地缩短时间，提高检测的效率。
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公开(公告)号：CN103966333A
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201410215717.8
申请日：2014-05-20
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2563/159 , C12Q2565/125
摘要： 本发明公开了一种多重微滴聚合酶链式反应的生物基因高通量定性检测方法，建立了一种改进的微滴PCR高通量的扩增技术，对该技术在实验仪器、实验方法和试剂方面进行了改进，优化了实验步骤，减少了一些实验环节，对试验中需要的仪器进行了国产化，使该方法更容易进行，大大减少了人力、物力和财力的需求，使得微滴PCR技术可为一般实验技术人员掌握，可在国内大多数生物实验室开展。实验结果清晰可靠，本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增来达到高通量定性检测的目的。
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