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公开(公告)号：CN105548540A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201511017554.3
申请日：2015-12-29
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC分类号： G01N33/569 , C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/40 , C12N15/70
CPC分类号： Y02A50/53 , G01N33/56983 , C07K14/005 , C07K16/1081 , C12N2770/24122 , G01N2333/185
摘要： 本发明涉及一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。该试剂盒包括酶标记板、阴性对照血清、阳性对照NS1重组蛋白、检测抗体、显色底物和终止液。所述酶标记板上的包被抗体为DV14抗体，检测抗体为连接了生物素的DV11抗体。所述的阴性对照血清为没有感染登革热病毒的正常人的血清，终止液为2M的硫酸，显色底物包括酶标亲和素抗体和TMB显色液。本发明除了能快速的对早期登革热进行诊断，它还具有很高的专一性，与乙脑病毒并无交叉反应，对登革病毒具有良好的识别能力。本发明可使得四种不同型别特异性的单克隆抗体一次产生，缩短了至少4倍的时间和后续的成本。
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公开(公告)号：CN112359147A
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN202011442259.3
申请日：2020-12-08
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及一种基于寨卡病毒包膜基因的基因拷贝数绝对定量检测方法，属于基因技术领域。该方法通过构建ZIKV E标准品质粒，参照所得ZIKV E目的基因序列设计荧光定量PCR特异性引物，利用所得ZIKV E标准品质粒检测培养上清中ZIKV E基因拷贝数。本发明是针对ZIKV E基因构建标准品质粒，即将ZIKV E基因全长构建到一个载体上，建立ZIKV荧光定量PCR绝对定量体系，该检测体系的建立通过检测ZIKV E基因，对ZIKV感染完成快速检测，并对上清中ZIKV E基因拷贝数进行绝对定量，进而为ZIKV的防控供技术支持。
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公开(公告)号：CN105483249A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201511018981.3
申请日：2015-12-29
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC分类号： C12Q1/708 , C12Q1/686 , C12Q1/6886 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113
摘要： 本发明提供一种16型、18型HPV病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法，通过检索NCBI 16型、18型HPV基因组序列，获取HPV E6/E7基因序列信息，分别以31-934位点区域和41-980位点区域构建16型、18型HPV E6/E7标准品质粒，参照所得16型、18型HPV E6/E7目的基因序列，分别在上述位点区域内设计16型、18型HPV E6、E7荧光定量PCR特异性引物，利用所得16型、18型HPV E6/E7标准品质粒分别检测宫颈癌患者组织样品的16型、18型HPV病毒拷贝数。该检测体系的建立既可以通过检测E6基因，又可以通过检测E7基因，来达到对宫颈癌患者组织中的HPV DNA拷贝数进行绝对定量的目的，从而对宫颈癌的早防、早治提供参考。
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公开(公告)号：CN106754983A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611220867.3
申请日：2016-12-26
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
摘要： 本发明公开一种I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白构建方法，将登革病毒标准株进行RT‑PCR扩增，分别得到I‑IV型登革病毒的NS1全基因，再与pMD19T载体连接，然后进一步得到pET30a‑NS1质粒，将所得pET30a‑NS1质粒转化到大肠杆菌BL‑21中，然后通过表达纯化，分别得到I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白。所得I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白应用于I‑IV型登革热的四联疫苗。使用四种不同型的NS1蛋白抗原，能同时预防四个型别的登革病毒。并预先使用了对人体安全性较好、免疫促进作用较强的氢氧化铝佐剂作为疫苗佐剂，其效果和安全性有一定的保障。
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公开(公告)号：CN104450971A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410827117.7
申请日：2014-12-25
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC分类号： Y02A50/53 , C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2537/16 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
摘要： 本发明提供一种Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法，通过Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒的接种培养，再构建Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒标准品质粒，参照所得Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒前膜蛋白区目的基因序列设计下列Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒荧光定量PCR特异性引物，利用所得Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒标准品质粒分别检测病毒培养上清样品或患者血清样品的Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒拷贝数。本发明是针对登革病毒前膜蛋白区域基因构建标准品质粒，建立Ⅱ型及Ⅲ型登革病毒荧光定量PCR绝对定量体系，该检测体系的建立不仅可以对实验体系中的病毒拷贝数进行绝对定量，更为重要的是可以对登革热患者血清中的病毒拷贝数进行绝对定量。
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公开(公告)号：CN106755102A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611194311.1
申请日：2016-12-21
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC分类号： C12N15/86 , C12N2710/20043 , C12Q1/6806 , C12Q1/6851 , C12Q2527/125 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/113
摘要： 本发明提供一种58型HPV病毒E6/E7致癌基因拷贝数的绝对定量检测方法，通过检索NCBI 58型HPV病毒基因组序列，获取其E6及E7基因序列信息，以47‑941位点区域构建58型HPV病毒E6及E7致癌基因共同标准品质粒，参照所得目的基因序列，分别在上述位点区域内设计58型HPV病毒E6、E7荧光定量PCR特异性引物，利用所得58型HPV病毒E6/E7共同标准品质粒作为参考品，通过相关检测方案检测细胞样品的58型HPV病毒E6及E7致癌基因绝对定量拷贝数。本发明可检测HPV‑58病毒E6基因以及E7基因在细胞样品中的拷贝数，并进行绝对定量，从而对细胞的癌变预后以及干预效果判断提供数据支持。
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公开(公告)号：CN106701812A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201611229819.0
申请日：2016-12-27
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC分类号： Y02A50/386 , C12N15/815 , A61K39/12 , A61K2039/55505 , A61K2039/70 , C07K14/005 , C12N2770/24122 , C12N2800/102
摘要： 本发明涉及一种I‑IV型串联登革病毒EDⅢ重组蛋白的构建方法及其应用，通过合成酵母表达密码子优化及特殊设计间隔串联序列的四型登革病毒基因，使用PichiaPink™ Expression System表达系统表达、Ni亲和层析柱纯化该重组串联蛋白，并利用酶联免疫吸附测定检测其抗原性，最终得到能同时针对四种血清型登革病毒的候选I‑IV型重组亚单位融合蛋白。本发明是针对登革病毒EDⅢ合成酵母表达系统人工优化的重组蛋白基因，其中同时整合了四种登革病毒血清型的EDⅢ基因，并且人工设计了连接肽基因序列，相应基因表达的重组融合蛋白免疫后将对多型登革病毒具有保护作用，作为I‑IV型登革病毒候选疫苗。
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