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公开(公告)号：CN117770204A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202410049518.8
申请日：2024-01-12
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC分类号： A01K67/02
摘要： 本发明公开一种人α‑突触核蛋白预制原纤维诱导小鼠认知障碍模型的构建方法，属于生物技术领域。本发明首先将人α‑syn的原核表达载体pGEX‑5X‑1‑syn转化至BL21菌株，采用IPTG诱导后再用高效率的GST融合蛋白纯化磁珠进行蛋白纯化，纯化后的人α‑syn在37℃，1000 r/min震荡条件下培养数天，成功制备了人α‑syn原纤维，最后通过脑立体定位注射方式注射至小鼠海马部位，在短期内快速获得了小鼠认知功能障碍模型。此模型建立的方法具有快速、高效的特点，对研究α‑syn原纤维功能和建立认知障碍模型具有良好的参考价值。
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公开(公告)号：CN117025552A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311175449.7
申请日：2023-09-13
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
摘要： 本发明提供一种Vero细胞适应性登革病毒减毒株及其应用，属于生物技术领域。Vero细胞适应性登革病毒减毒株毒株DV‑V28的保藏编号为CCTCC NO：V202355。本发明提供的登革病毒株DV‑V28在登革病毒减毒活疫苗制备中的应用，能实现登革病毒在哺乳动物细胞Vero中的稳定性感染和复制扩增，能诱导实验动物体内的免疫保护，奠定制备登革病毒疫苗的病毒株基础。此外，登革病毒株DV‑V28在体内和体外水平均表现出毒力减弱特征，有利于候选减毒活疫苗的制备和安全性使用。
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公开(公告)号：CN116514932A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310138091.4
申请日：2023-02-20
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
摘要： 本发明涉及一种登革3型病毒E蛋白在293F细胞中的高分泌表达方法，所述表达方法包括的质粒优化步骤中，优化后的质粒序列为SEQ ID NO.2。所述优化后的质粒序列添加在pSectag2A载体的Kpn1和Not1两个酶切位点之间，构成载体p2A3Em。本发明成功解决登革3型病毒E蛋白分泌表达难的技术问题，通过该发明经过表达及纯化可成功拿到3型登革病毒E蛋白，为我国登革亚单位疫苗的开发奠定基础。
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公开(公告)号：CN105548540A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201511017554.3
申请日：2015-12-29
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC分类号： G01N33/569 , C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/40 , C12N15/70
CPC分类号： Y02A50/53 , G01N33/56983 , C07K14/005 , C07K16/1081 , C12N2770/24122 , G01N2333/185
摘要： 本发明涉及一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。该试剂盒包括酶标记板、阴性对照血清、阳性对照NS1重组蛋白、检测抗体、显色底物和终止液。所述酶标记板上的包被抗体为DV14抗体，检测抗体为连接了生物素的DV11抗体。所述的阴性对照血清为没有感染登革热病毒的正常人的血清，终止液为2M的硫酸，显色底物包括酶标亲和素抗体和TMB显色液。本发明除了能快速的对早期登革热进行诊断，它还具有很高的专一性，与乙脑病毒并无交叉反应，对登革病毒具有良好的识别能力。本发明可使得四种不同型别特异性的单克隆抗体一次产生，缩短了至少4倍的时间和后续的成本。
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公开(公告)号：CN115804362A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202310081538.9
申请日：2023-02-08
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC分类号： A01K67/027
摘要： 本发明提供一种IFN‑α/βR‑/‑小鼠抗体依赖性增强感染的注射液及其制备方法，包括下列体积份的组分组成：前膜抗体1份、磷酸缓冲液1023份、浓度为5.6×104 PFU/mL的DENV‑3病毒原液1024份。本发明旨在利用IFN‑α/βR‑/‑小鼠建立ADE感染模型，为后续药物和疫苗评估提供更多的动物模型选择，也为了解ADE的发病机制提供参考。
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公开(公告)号：CN106754983A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611220867.3
申请日：2016-12-26
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
摘要： 本发明公开一种I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白构建方法，将登革病毒标准株进行RT‑PCR扩增，分别得到I‑IV型登革病毒的NS1全基因，再与pMD19T载体连接，然后进一步得到pET30a‑NS1质粒，将所得pET30a‑NS1质粒转化到大肠杆菌BL‑21中，然后通过表达纯化，分别得到I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白。所得I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白应用于I‑IV型登革热的四联疫苗。使用四种不同型的NS1蛋白抗原，能同时预防四个型别的登革病毒。并预先使用了对人体安全性较好、免疫促进作用较强的氢氧化铝佐剂作为疫苗佐剂，其效果和安全性有一定的保障。
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公开(公告)号：CN104450971A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410827117.7
申请日：2014-12-25
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC分类号： Y02A50/53 , C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2537/16 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
摘要： 本发明提供一种Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法，通过Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒的接种培养，再构建Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒标准品质粒，参照所得Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒前膜蛋白区目的基因序列设计下列Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒荧光定量PCR特异性引物，利用所得Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒标准品质粒分别检测病毒培养上清样品或患者血清样品的Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒拷贝数。本发明是针对登革病毒前膜蛋白区域基因构建标准品质粒，建立Ⅱ型及Ⅲ型登革病毒荧光定量PCR绝对定量体系，该检测体系的建立不仅可以对实验体系中的病毒拷贝数进行绝对定量，更为重要的是可以对登革热患者血清中的病毒拷贝数进行绝对定量。
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公开(公告)号：CN114645052B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202110751098.4
申请日：2021-07-01
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/864 , C12N15/66 , A01K67/027
摘要： 本发明公开一种全脑过表达核易位人源α‑突触核蛋白转基因鼠的高效构建方法本发明引入3个重复序列的核易位信号肽，通过PCR方法获取人源α‑Syn‑3*NLS编码序列，以重组腺相关病毒rAAV过表达病毒载体pAAV‑IRES‑hrGFP为基本骨架，通过双酶切位点SalⅠ和Xhol，将目的序列α‑Syn‑3*NLS构建入载体中，进行病毒包装得到过表达核易位α‑Syn的rAAV病毒，对乳鼠采用脑立体汉密顿微量注射针通过定位方法侧脑室注射该病毒，获得全脑过表达核易位人源α‑突触核蛋白转基因鼠，以解决现有过表达α‑突触核蛋白转基因小鼠制作，以及α‑突触核蛋白缺乏核输入信号，无法在核内过表达的问题。
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公开(公告)号：CN114645052A
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202110751098.4
申请日：2021-07-01
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/864 , C12N15/66 , A01K67/027
摘要： 本发明公开一种全脑过表达核易位人源α‑突触核蛋白转基因鼠的高效构建方法本发明引入3个重复序列的核易位信号肽，通过PCR方法获取人源α‑Syn‑3*NLS编码序列，以重组腺相关病毒rAAV过表达病毒载体pAAV‑IRES‑hrGFP为基本骨架，通过双酶切位点SalⅠ和Xhol，将目的序列α‑Syn‑3*NLS构建入载体中，进行病毒包装得到过表达核易位α‑Syn的rAAV病毒，对乳鼠采用脑立体汉密顿微量注射针通过定位方法侧脑室注射该病毒，获得全脑过表达核易位人源α‑突触核蛋白转基因鼠，以解决现有过表达α‑突触核蛋白转基因小鼠制作，以及α‑突触核蛋白缺乏核输入信号，无法在核内过表达的问题。
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公开(公告)号：CN106755102A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611194311.1
申请日：2016-12-21
申请人： 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC分类号： C12N15/86 , C12N2710/20043 , C12Q1/6806 , C12Q1/6851 , C12Q2527/125 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/113
摘要： 本发明提供一种58型HPV病毒E6/E7致癌基因拷贝数的绝对定量检测方法，通过检索NCBI 58型HPV病毒基因组序列，获取其E6及E7基因序列信息，以47‑941位点区域构建58型HPV病毒E6及E7致癌基因共同标准品质粒，参照所得目的基因序列，分别在上述位点区域内设计58型HPV病毒E6、E7荧光定量PCR特异性引物，利用所得58型HPV病毒E6/E7共同标准品质粒作为参考品，通过相关检测方案检测细胞样品的58型HPV病毒E6及E7致癌基因绝对定量拷贝数。本发明可检测HPV‑58病毒E6基因以及E7基因在细胞样品中的拷贝数，并进行绝对定量，从而对细胞的癌变预后以及干预效果判断提供数据支持。
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