-
公开(公告)号:CN102450230A
公开(公告)日:2012-05-16
申请号:CN201110051569.7
申请日:2011-03-03
申请人: 中国科学院上海生命科学研究院 , 东华大学
摘要: 本发明属生物技术和医学领域,具体涉及小鼠白内障自发突变基因纯系BALB/cAnSlac-Crygc-del的构建及其应用。依据本发明公开的方法可以筛选获得多种突变小鼠,为研究白内障的发病机制、治疗方法打下了坚实的基础。根据本发明所述的方法获得的白内障症状纯系小鼠BALB/cAnSlac-Crygc-del,可以用于先天性白内障的治疗研究,能够为白内障的防治作出突出的贡献。
-
公开(公告)号:CN107011444A
公开(公告)日:2017-08-04
申请号:CN201610060483.3
申请日:2016-01-28
申请人: 中国科学院上海生命科学研究院
IPC分类号: C07K19/00 , C07K14/435 , C12N15/62 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/033 , A61K45/00 , A61P9/06 , G01N33/68
CPC分类号: C07K14/435 , A01K67/0336 , A01K2227/703 , A61K45/00 , C07K2319/03 , G01N33/68
摘要: 本发明涉及一种筛选hERG钾离子通道激动剂和毒性检测方法。具体而言,本发明首先涉及一种融合蛋白,含有作为该融合蛋白N端的来自线虫ERG家族钾离子通道UNC-103蛋白N端第1-85位氨基酸残基之间,长75-85个氨基酸残基的片段;hERG或其至少包含S1-S6跨膜区和环状核苷酸结合域的片段;和作为该融合蛋白C端的来自所述UNC-103蛋白C端第590-829位氨基酸残基之间,长220-240个氨基酸残基的片段。还涉及编码所述融合蛋白的多核苷酸序列,相关的转基因线虫,以及相关的筛选方法和应用。本发明人首次构建了一种在体的、可以识别影响hERG胞内运输的化合物分子的筛选方法,筛选hERG抑制剂或长QT综合症(LQTS)相关的通道突变体功能矫正剂,为hERG毒理检测和筛选治疗LQTS药物提供了新的途径和方法。
-
公开(公告)号:CN116144743B
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202211621752.0
申请日:2022-12-16
申请人: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q1/6876 , C12N15/11
摘要: 本发明公开了一种基于多重长PCR结合高通量测序同时实现多个同源序列SNP分型的引物、试剂盒及方法。本发明通过跨过同源序列中SNP的侧翼序列(约200bp),根据特定的引物设计原则设计特异性的多重长PCR扩增引物(2000‑3000bp),扩增采用特异性和扩增效率较高的聚合酶并参考降落PCR反应条件做多重长PCR反应,多重长PCR产物可用于基于NGS测序平台的SNP分型鉴定。本发明的方法基于多重长PCR反应和巢式多重PCR反应,可同时实现对多个同源序列SNP精准分型,克服了KASP和三引物等位基因PCR技术通量小的缺点;相比于全基因测序,本发明只扩增目的序列,具有较低的成本和较高的性价比。
-
公开(公告)号:CN118308470A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410287890.2
申请日:2024-03-13
申请人: 东华大学
IPC分类号: C12Q1/686 , C12Q1/6806 , C40B50/06 , C12N15/10
摘要: 一种基于多重PCR和产物分选建库方法及磁珠分选方法及应用,涉及核酸检测领域。本发明采用极低循环数多重PCR对靶标区段进行扩增,提高了扩增子间的均一性;随后在扩增产物中添加Carry DNAs并进行两轮磁珠分选,此步骤避免了扩增产物大量丢失。最后通过PCR反应连接测序引物形成适合于NGS测序平台的扩增子。利用极低循环数的多重PCR,避免了高循环带来的扩增子间的不均一性和产生的大量引物二聚体;通过添加Carry DNAs的两轮磁珠分选能够避免扩增产物丢失,并提供有效的质量控制,方便后续实验。该技术是一种成本低廉,操作方便,适合于常规实验室的多重PCR扩增捕获建库方法。
-
公开(公告)号:CN110862077B
公开(公告)日:2022-11-04
申请号:CN201911133348.7
申请日:2019-11-19
申请人: 东华大学
摘要: 本发明涉及一种超级电容器用富含介孔的分级多孔碳材料的制备方法。该方法包括:将木质素、丝胶与硫酸溶液混合,超声分散,将得到的悬浊液水热反应,水洗,烘干,然后与活化剂混合,活化反应,再浸泡到盐酸溶液中,洗涤,抽滤。该方法原料来源丰富且成本低,工艺简单,得到的分级多孔碳材料结构规整,孔径分级清晰,其表面呈现出多孔结构,将其制备成电极后具有较大电容且倍率性能优异,经过长时间循环后结构依旧稳定,满足了超级电容器开发的需要。
-
公开(公告)号:CN110846399B
公开(公告)日:2022-11-04
申请号:CN201910938718.8
申请日:2019-09-30
申请人: 东华大学 , 上海市松江区中心医院
IPC分类号: C12Q1/6883 , C12Q1/6858
摘要: 本发明涉及一种心血管疾病个体化用药基因检测体系试剂盒及其应用,包括PCR反应体系、LDR的反应体系。本发明所述试剂盒采用多重PCR技术和多重LDR技术,两种技术相结合,基于杂交反应和连接反应,双重保证,检测过程中无需DNA纯化,减少了污染的可能性,结果更加准确。PCR‑LDR检测的准确度可以与Sanger测序相媲美,但是前者多样性更高、成本更低。
-
公开(公告)号:CN106854680A
公开(公告)日:2017-06-16
申请号:CN201710160439.4
申请日:2017-03-17
申请人: 上海星耀医学科技发展有限公司 , 上海翼和应用生物技术有限公司 , 东华大学
IPC分类号: C12Q1/68
CPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q2537/143 , C12Q2545/101 , C12Q2561/125
摘要: 本发明提供了CYP2C19基因*2、*3、*17位点的多态性检测试剂盒,试剂盒包括PCR缓冲液,DNA聚合酶,LDR缓冲液,DNA连接酶,阳性对照,阴性对照。本发明可对提取好的DNA直接进行PCR‑LDR反应,对样本中的CYP2C19基因进行定性检测,并依靠内参基因序列作为内对照、利用UDG酶预防污染。本发明的试剂盒扩增方法简单、程序简短、操作简便、预防污染,检测结果特异性强、敏感度高、结果明晰、可信度高,可用于全血中CYP2C19基因定性检测。
-
公开(公告)号:CN105695581A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201610136155.7
申请日:2016-03-10
申请人: 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号: C12Q1/68
摘要: 本发明涉及一种基于二代测试平台的中通量基因表达分析方法,包括:按照多个基因的相对表达量将相应的PCR引物分为两组,并在组内调整引物浓度比例;构建标准品竞争性模板和待测样品竞争性模板,进行三轮多重竞争性PCR反应;混合第三轮反应产物作为二代测试平台文库上机测序,提取数据并分析,即可得到不同样本间多个基因相对表达量差异。本发明基于高速发展的二代测序平台,准确快速定量目标模板和内参照模板,并可以同时对多个样本进行5个目的基因表达差异分析,流程简单易行,价格低廉;当需要分析多样本间多基因表达差异时,不失为一种具有高准确度,通量适中,成本廉价的方法。
-
公开(公告)号:CN104170792B
公开(公告)日:2016-06-08
申请号:CN201410397040.4
申请日:2014-08-13
申请人: 东华大学
摘要: 本发明涉及一种基于ZZ2小家鼠来源的1号染色体替换B6-Chr1ZZ2/Xiao小鼠模型的构建方法,包括:将ZZ2小鼠与小鼠C57BL/6J杂交,获得F1代,取F1代小鼠与C57BL/6J回交,获得F2代,通过基因分型筛选出整个1号染色体为杂合状态的小鼠;F2代小鼠与C57BL/6J回交,以相同的方式回交,筛选10代后,形成1号染色体为杂合状态,其余染色体均为纯合C57BL/6J基因型的小鼠群体;鉴定回交小鼠的基因DNA;1号染色体为ZZ2与B6杂合状态的回交小鼠经过10代回交后,育成携带ZZ2小鼠1号染色体的同源基因导入近交系,通过兄妹自交和基因鉴定筛选,即得。
-
公开(公告)号:CN103937826B
公开(公告)日:2016-04-06
申请号:CN201410136599.1
申请日:2014-04-04
申请人: 东华大学
IPC分类号: C12N15/66
摘要: 本发明涉及一种中枢神经系统中特异表达miR-505的载体的制备方法,包括:用PCR方法获得目的基因,将GFAP启动子从pAAV-GFAP-hchR2-mcherry-WPRE载体上用合适的限制性内切酶切下,与目的基因连接克隆到pUC19载体上,然后通过合适的酶切位点将GFAP-EGFP-mir-505片段从pUC载体上切下,克隆到PB载体上,获得载体。本发明可与表达转座酶的辅助载体共注射小鼠的受精卵的雄性原核,得到转基因小鼠,用以研究miR-505在神经系统特别是在神经胶质细胞中的包括调控性发育启动在内的生物学功能,并且EGFP蛋白能方便地显示外源基因在神经系统中的定位。
-
-
-
-
-
-
-
-
-