一种引导编辑系统和目的基因序列的定点修饰方法

    公开(公告)号:CN116716298A

    公开(公告)日:2023-09-08

    申请号:CN202310471764.8

    申请日:2023-04-27

    摘要: 本发明提供一种引导编辑系统和目的基因序列的定点修饰方法。所述引导编辑系统包含nCas9切口酶与逆转录酶的融合蛋白模块、pegRNA模块和Nicking sgRNA模块,其中pegRNA模块为优化的pegRNA分子或包含编码优化的pegRNA分子的DNA序列的表达载体。所述目的基因序列的定点修饰方法包括使用引导编辑系统以及任选地加入头孢菌素C锌和/或去乙酰化酶抑制剂的步骤。实验结果表明,本发明提供的引导编辑系统和目的基因序列的定点修饰方法能够显著提高基因编辑效率,并拓宽了引导编辑系统在农业和生物医学领域的应用范围。

    一种突变基因及其用于构建斑色鱼鳞癣小型猪模型的用途

    公开(公告)号:CN110846321A

    公开(公告)日:2020-02-28

    申请号:CN201810952704.7

    申请日:2018-08-21

    摘要: 本发明提供一种小型猪的ABCA12突变基因,所述突变基因与野生型猪ABCA12基因相比,具有IVS49-727A>G的突变。本发明提供了一种构建体,所述构建体包含所述ABCA12突变基因。本发明还提供了一种重组细胞,所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备人类斑色鱼鳞癣小型猪模型的方法,所述方法包括:改变小型猪的ABCA12基因,使ABCA12基因的位于第49号内含子的第727位碱基由A变为G。利用本发明提供的ABCA12突变基因制备大型人类斑色鱼鳞癣猪模型,研究人类斑色鱼鳞癣的发病机理,对于临床预防、诊断和治疗人类斑色鱼鳞癣具有重大的指导意义。

    用于大动物骨骼染色的染色液及其使用方法

    公开(公告)号:CN117309533A

    公开(公告)日:2023-12-29

    申请号:CN202210728182.9

    申请日:2022-06-24

    IPC分类号: G01N1/30 G01N1/31

    摘要: 本发明提供一种用于大动物骨骼染色的染色液,其包含软骨染色液和硬骨染色液;其中所述软骨染色液由阿尔新蓝、乙酸和乙醇组成,在所述软骨染色液中,所述阿尔新蓝的含量为0.25~0.35%w/v,所述乙酸和乙醇的体积比为1:3~5;所述硬骨染色液由茜素红和氢氧化钾的水溶液组成,在所述硬骨染色液中,所述茜素红的含量为0.1~0.2%w/v,所述氢氧化钾水溶液的浓度为0.8~1.2%w/v。本发明还提供了用于大动物骨骼染色的试剂盒、使用本发明所述的染色液进行大动物骨骼染色的方法和制备大动物骨骼染色标本的方法。本发明的染色液和染色方法适用于针对大动物骨骼(例如巴马小型猪的新生猪或胎猪的骨骼)进行染色,染色效率高、效果好,弥补了当前缺乏针对大动物骨骼染色的有效方法的缺陷。

    一种突变基因及其用于构建斑色鱼鳞癣小型猪模型的用途

    公开(公告)号:CN110846321B

    公开(公告)日:2021-11-19

    申请号:CN201810952704.7

    申请日:2018-08-21

    摘要: 本发明提供一种小型猪的ABCA12突变基因,所述突变基因与野生型猪ABCA12基因相比,具有IVS49‑727A>G的突变。本发明提供了一种构建体,所述构建体包含所述ABCA12突变基因。本发明还提供了一种重组细胞,所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备人类斑色鱼鳞癣小型猪模型的方法,所述方法包括:改变小型猪的ABCA12基因,使ABCA12基因的位于第49号内含子的第727位碱基由A变为G。利用本发明提供的ABCA12突变基因制备大型人类斑色鱼鳞癣猪模型,研究人类斑色鱼鳞癣的发病机理,对于临床预防、诊断和治疗人类斑色鱼鳞癣具有重大的指导意义。

    一种突变基因及其用于构建蹼足病小型猪模型的用途

    公开(公告)号:CN110846330A

    公开(公告)日:2020-02-28

    申请号:CN201810952553.5

    申请日:2018-08-21

    摘要: 本发明提供一种小型猪的RIPK4突变基因,所述突变基因与野生型猪RIPK4基因相比,具有c.1397_1398insA的突变。本发明提供了一种构建体,所述构建体包含所述RIPK4突变基因。本发明还提供了一种重组细胞,所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备蹼足病小型猪模型的方法,所述方法包括:改变小型猪的RIPK4基因,使RIPK4基因的位于第8号外显子的第1397位碱基和1398位碱基之间插入腺嘌呤A。利用本发明提供的RIPK4突变基因制备大型蹼足病猪模型,研究蹼足病的发病机理,对于临床预防、诊断和治疗蹼足病具有重大的指导意义。