一种使BCL11B蛋白降解的方法

    公开(公告)号:CN103409466B

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201310199598.7

    申请日:2013-05-27

    摘要: 本发明公开了一种使BCL11B蛋白降解的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)得到可诱导表达KLF4基因的Jurkat细胞群;(2)加入多西环素促使Jurkat细胞表达KLF4;(3)获得表达出KLF4基因的Jurkat细胞蛋白和RNA;(4)对(3)步获得的蛋白质通过Western Blot检测表达KLF4基因的Jurkat细胞中BCL11B蛋白的SUMO化;(5)对于(3)步获得的RNA,反转录合成cDNA后采用实时定量PCR检测BCL11B基因表达情况,确定BCL11B的特异性蛋白已被降解。本发明方法的优点是:发现了BCL11B特异性蛋白一条新的降解途径,一方面可以部分解释T-ALL细胞凋亡的原因,对白血病治疗有理论指导;另一方面为实现人T细胞转分化提供了新的思路。

    一种使BCL11B蛋白降解的方法

    公开(公告)号:CN103409466A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310199598.7

    申请日:2013-05-27

    摘要: 本发明公开了一种使BCL11B蛋白降解的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)得到可诱导表达KLF4基因的Jurkat细胞群;(2)加入多西环素促使Jurkat细胞表达KLF4;(3)获得表达出KLF4基因的Jurkat细胞蛋白和RNA;(4)对(3)步获得的蛋白质通过Western Blot检测表达KLF4基因的Jurkat细胞中BCL11B蛋白的SUMO化;(5)对于(3)步获得的RNA,反转录合成cDNA后采用实时定量PCR检测BCL11B基因表达情况,确定BCL11B的特异性蛋白已被降解。本发明方法的优点是:发现了BCL11B特异性蛋白一条新的降解途径,一方面可以部分解释T-ALL细胞凋亡的原因,对白血病治疗有理论指导;另一方面为我们实现人T细胞转分化提供了新的思路。

    重组人白介素15长肽段及其生产方法

    公开(公告)号:CN104212808B

    公开(公告)日:2017-03-08

    申请号:CN201410452798.3

    申请日:2014-09-05

    摘要: 本发明公开了一种重组人白介素15长肽段及其生产方法,所述生产方法为:获得人IL-15长肽段基因;构建真核表达载体并将其转化到毕氏酵母X-33中;抗性筛选高水平分泌表达的酵母转化子;诱导表达,并将上清液经镍柱及离子交换柱纯化,得rhIL-15L。本发明所述生产方法将载体pPICZαA上Kex2P1’位点氨基酸残基Ala突变为Pro,并以毕氏酵母X-33为宿主菌,实现了rhIL-15L的大量高效稳定表达;该方法制得的重组蛋白rhIL-15L带有HIS及C-MYC标签,易于蛋白纯化和检测,且其是经一定程度糖基化修饰的糖蛋白,具有良好的生物活性,可有效维持体外和小鼠体内人源NK细胞的增殖及生物活性。

    一种扩增脐带血造血干细胞的细胞因子及其培养基

    公开(公告)号:CN103509101B

    公开(公告)日:2016-11-02

    申请号:CN201310349485.0

    申请日:2013-08-12

    摘要: 本发明公开了一种细胞因子,该细胞因子是由以下制备方法得到的,其包括如下步骤:(1)处理代基质细胞;(2)得到永生化细胞;(3)将(2)步筛选出的胎肝细胞连续传代,得到细胞系;(4)得到总RNA;(5)反转录成cDNA;(6)做基因芯片分析;(7)选取能刺激脐带血造血干细胞体外增殖的小鼠胎肝细胞中高表达的基因序列;(8)将(7)检索核苷酸序列;(9)得到293T细胞;(10)得到293T细胞相对应的蛋白;(11)将(10)纯化的蛋白添加到含有SCF,TPO,FLT3L,PTN的StemSpan培养基中,验证能促进脐带血造血干细胞的体外增殖。其优点为,显著提高脐带血造血干细胞的扩增倍数,维持干细胞特性的目的。