一种单链DNA产物的扩增方法及其应用

    公开(公告)号:CN117965687A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202410065797.7

    申请日:2024-01-17

    摘要: 本发明公开了一种单链DNA产物的扩增方法及其应用,属于生物检测领域,通过在基因组数据库中筛找一段与检测靶标序列无关的非人类基因组序列作为通用型单加尾引物;将通用型单加尾引物序列的3’端连接到其中一条病原体核酸序列引物序列的5’端;靶标特异性引物在退火温度条件下进行指数性扩增;再以通用型单加尾引物进行线性扩增,反应生成单链DNA产物;同时,基于该单链DNA扩增方法,结合CRISPR‑Cas系统,建立了一种无需PAM序列依赖的病原体核酸检测方法;本发明解决了传统方法对于单链DNA扩增中引物设计难度大、扩增效率低的问题;同时解决了CRISPR‑Cas系统在进行靶标序列识别时对于PAM序列依赖的问题。