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公开(公告)号：CN110564752B
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201910938686.1
申请日：2019-09-30
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了差异代理技术在C·T碱基替换细胞富集中的应用。本发明的差异代理技术载体包括如下试剂：sgRNA、C·T碱基替换系统和功能丧失的筛选剂抗性基因；sgRNA由靶向目标基因靶点序列的esgRNA和靶向功能丧失的筛选剂抗性基因靶点序列的sgRNA组成；C·T碱基替换系统在靶向功能丧失的筛选剂抗性基因靶点序列的sgRNA的向导下，可通过对所述功能丧失的筛选剂抗性基因靶点序列进行C·T碱基替换使所述功能丧失的筛选剂抗性基因功能恢复。本发明实现了细胞水平上C·T碱基替换细胞富集，大大提高C·T碱基替换效率。
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公开(公告)号：CN111004817A
公开(公告)日：2020-04-14
申请号：CN201911393637.0
申请日：2019-12-30
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种农杆菌介导的水稻遗传转化方法。本发明还公开了一种粳、籼稻通用型的组织培养的培养基，所述培养基由溶质和溶剂组成，所述溶质包括硝酸钾、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、硫酸锰、七水硫酸锌、硼酸、碘化钾、五水硫酸铜、二水钼酸钠、六水氯化钴、甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、七水硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠。本发明开发的通用型组织培养基具有如下优点：1、通过大量元素、微量元素、有机物及激素的优化组合，使粳、籼稻均可实现愈伤诱导及再生出苗；2、通过农杆菌介导，粳、籼稻均可实现稳定转化。
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公开(公告)号：CN110669775A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910938672.X
申请日：2019-09-30
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了差异代理技术在A·G碱基替换细胞富集中的应用。本发明的差异代理技术载体包括靶向目标基因靶点序列的esgRNA、靶向功能丧失的筛选剂抗性基因靶点序列的sgRNA、A·G碱基替换系统和功能丧失的筛选剂抗性基因；A·G碱基替换系统在靶向功能丧失的筛选剂抗性基因靶点序列的sgRNA的向导下，可通过对所述功能丧失的筛选剂抗性基因靶点序列进行A·G碱基替换使所述功能丧失的筛选剂抗性基因功能恢复。本发明实现了细胞水平上A·G碱基替换细胞富集，大大提高A·G碱基替换效率。
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公开(公告)号：CN111154797B
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202010074929.4
申请日：2020-01-22
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法。所述方法包括如下步骤：1)采用基因枪法将含有目的基因的载体轰击至玉米自交系京724幼胚中，得到枪击后幼胚；2)将所述枪击后幼胚接种至愈伤诱导培养基中进行培养，得到胚性愈伤组织；3)将所述胚性愈伤组织接种至筛选培养基中进行培养，得到抗性愈伤；4)将所述抗性愈伤接种至再生培养基中进行培养，得到幼苗；5)将所述幼苗在生根培养基中培养，得到玉米自交系京724转基因植株。
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公开(公告)号：CN109456973A
公开(公告)日：2019-03-12
申请号：CN201811619478.7
申请日：2018-12-28
申请人： 北京市农林科学院
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00 , A01H6/46
摘要： 本发明公开了SpCas9n&PmCDA1&UGI碱基编辑系统在植物基因编辑中的应用。本发明通过将SpCas9n&PmCDA1&UGI碱基编辑系统导入生物体或生物细胞内，使系统中的SpCas9n、sgRNA、PmCDA1和UGI的编码基因均得到表达，实现基因组靶点序列的编辑；sgRNA靶向靶点序列；靶点序列的PAM序列为NAG，N为A、T、C或G。本发明利用SpCas9n&PmCDA1&UGI碱基编辑系统在植物中实现了更多的靶点序列中由C到T的替换，如PAM序列为NAG的靶点序列，扩展了PmCDA1介导的碱基替换系统的编辑范围，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN111004817B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201911393637.0
申请日：2019-12-30
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种农杆菌介导的水稻遗传转化方法。本发明还公开了一种粳、籼稻通用型的组织培养的培养基，所述培养基由溶质和溶剂组成，所述溶质包括硝酸钾、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、硫酸锰、七水硫酸锌、硼酸、碘化钾、五水硫酸铜、二水钼酸钠、六水氯化钴、甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、七水硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠。本发明开发的通用型组织培养基具有如下优点：1、通过大量元素、微量元素、有机物及激素的优化组合，使粳、籼稻均可实现愈伤诱导及再生出苗；2、通过农杆菌介导，粳、籼稻均可实现稳定转化。
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公开(公告)号：CN111154796B
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202010074742.4
申请日：2020-01-22
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明公开了一种农杆菌介导的玉米骨干自交系京724的遗传转化方法。所述方法包括如下步骤：1)用含有目的基因的载体的农杆菌侵染玉米自交系京724幼胚，得到侵染后幼胚；2)将所述侵染后幼胚接种至共培养基培养基中进行培养，得到共培养后幼胚；3)将所述共培养后幼胚接种至恢复培养基中进行培养，得到恢复培养后幼胚；4)将所述恢复培养后幼胚接种至筛选培养基中进行培养，得到抗性愈伤；5)将所述抗性愈伤接种至再生培养基中进行培养，得到幼苗；6)将所述幼苗在生根培养基中培养，得到玉米自交系京724转基因植株。
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