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公开(公告)号：CN117070583B
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202311335115.1
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12P19/34
摘要： 本发明提供了一种抑制PCSK9基因表达的siRNA的制备方法。其中，该制备方法中的siRNA为由互补配对的正义链和反义链组成的双链RNA；制备方法包括：将正义链底物、反义链底物和RNA连接酶混合，利用RNA连接酶催化正义链底物之间和反义链底物之间以磷酸二酯键连接，获得正义链和反义链，从而获得此种siRNA；正义链底物能够组成正义链，反义链底物能够组成反义链；上述正义链为SEQ ID NO：45所示的核酸序列，反义链为SEQ ID NO：46所示的核酸序列。能够解决现有技术中的制备此种siRNA纯度较低的问题，适用于药物生物合成领域。
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公开(公告)号：CN117070583A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311335115.1
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
IPC分类号： C12P19/34 , C12N15/113
摘要： 本发明提供了一种抑制PCSK9基因表达的siRNA的制备方法。其中，该制备方法中的siRNA为由互补配对的正义链和反义链组成的双链RNA；制备方法包括：将正义链底物、反义链底物和RNA连接酶混合，利用RNA连接酶催化正义链底物之间和反义链底物之间以磷酸二酯键连接，获得正义链和反义链，从而获得此种siRNA；正义链底物能够组成正义链，反义链底物能够组成反义链；上述正义链为SEQ ID NO：45所示的核酸序列，反义链为SEQ ID NO：46所示的核酸序列。能够解决现有技术中的制备此种siRNA纯度较低的问题，适用于药物生物合成领域。
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公开(公告)号：CN118086417A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410177669.1
申请日：2024-02-08
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英生物科技有限公司
IPC分类号： C12P13/00
摘要： 本发明提供了一种制备肼类化合物的方法。该方法包括：利用亚胺还原酶催化如式Ⅰ或式Ⅲ所示的底物酮类化合物与如式Ⅱ所示底物肼类化合物进行还原反应，得到产物肼类化合物。利用亚胺还原酶进行肼类化合物的合成，该合成过程简单、经济，能直接合成多种肼类化合物，且生成物肼类化合物的N原子上存在较少的取代基。并且能够较好地用于工业放大，成本低，纯度高，实现了真正的绿色化学。
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公开(公告)号：CN117106744A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311341031.9
申请日：2023-10-17
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种嘧啶核苷磷酸化酶突变体及2'‑氟代核苷的制备方法。其中，该嘧啶核苷磷酸化酶突变体包括：（a）以SEQ ID NO：1所示的嘧啶核苷磷酸化酶野生型酶TtPyNP为基础发生突变的蛋白，突变选自如下任意一种或多种突变：K80等；或（b）与（a）中限定的氨基酸序列具有70%以上同源性且具有嘌呤核苷磷酸化酶活性的蛋白质。能够解决现有技术中的酶催化合成2'‑氟代核苷产量低的问题，适用于酶催化领域。
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公开(公告)号：CN117070576A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311335104.3
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英生物科技有限公司
IPC分类号： C12P13/00
摘要： 本发明提供了一种制备肼类化合物的方法。该方法包括：利用生物酶催化如式Ⅰ所示的底物酮类化合物和如式Ⅱ所示底物肼类化合物进行如下还原反应，得到产物肼类化合物。利用生物酶进行肼类化合物的合成，该合成过程简单、经济，能直接合成多种肼类化合物，且生成物肼类化合物的N原子上存在较少的取代基。并且能够较好地用于工业放大，成本低，纯度高，实现了真正的绿色化学。
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公开(公告)号：CN117070491A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311341028.7
申请日：2023-10-17
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种嘌呤核苷磷酸化酶突变体及2'‑氟代核苷的制备方法。其中，嘌呤核苷磷酸化酶突变体包括：（a）以SEQ ID NO：3所示的嘌呤核苷磷酸化酶野生型酶GsPNP为基础发生突变的蛋白，突变选自如下任意一种或多种突变：L148、P19、Q41等；或（b）与（a）中限定的氨基酸序列具有70%以上同源性且具有嘌呤核苷磷酸化酶活性的蛋白质。能够解决现有技术中酶催化合成2'‑氟代核苷产量低的问题，适用于酶催化领域。
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公开(公告)号：CN117070491B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311341028.7
申请日：2023-10-17
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种嘌呤核苷磷酸化酶突变体及2'‑氟代核苷的制备方法。其中，嘌呤核苷磷酸化酶突变体包括：（a）以SEQ ID NO：3所示的嘌呤核苷磷酸化酶野生型酶GsPNP为基础发生突变的蛋白，突变选自如下任意一种或多种突变：L148、P19、Q41等；或（b）与（a）中限定的氨基酸序列具有70%以上同源性且具有嘌呤核苷磷酸化酶活性的蛋白质。能够解决现有技术中酶催化合成2'‑氟代核苷产量低的问题，适用于酶催化领域。
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公开(公告)号：CN117106744B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311341031.9
申请日：2023-10-17
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种嘧啶核苷磷酸化酶突变体及2'‑氟代核苷的制备方法。其中，该嘧啶核苷磷酸化酶突变体包括：（a）以SEQ ID NO：1所示的嘧啶核苷磷酸化酶野生型酶TtPyNP为基础发生突变的蛋白，突变选自如下任意一种或多种突变：K80等；或（b）与（a）中限定的氨基酸序列具有70%以上同源性且具有嘌呤核苷磷酸化酶活性的蛋白质。能够解决现有技术中的酶催化合成2'‑氟代核苷产量低的问题，适用于酶催化领域。
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公开(公告)号：CN117070512B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202311335092.4
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种tRNA及其生物合成方法。其中，该tRNA的生物合成方法包括：利用RNA连接酶将不同底物的3'端和5'端连接形成磷酸二酯键，形成tRNA，底物的数量≥2；RNA连接酶包括RNA连接酶家族Rnl1、Rnl2、Rnl3和Rnl5中任意的一种或多种酶。能够解决现有技术中合成tRNA产率低的问题，适用于tRNA合成领域。
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公开(公告)号：CN117070513A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311335112.8
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种含有硫代磷酸酯键的RNA及其制备方法。其中，制备方法包括：利用RNA连接酶催化底物的3'羟基与5'硫代磷酸连接，形成含有硫代磷酸酯键的RNA；5'硫代磷酸包括含有硫代修饰的5'磷酸，硫代修饰包括5'磷酸的P‑OH或P=O中的氧原子被硫原子取代，相应地变为P‑SH或P=S；RNA连接酶包括RNA连接酶家族1、2或3中任意的一种或多种酶；包括：SEQ ID NO：1‑22等序列所示的RNA连接酶中的一种或多种。能够解决现有技术中的难以利用酶催化方法制备含有硫代磷酸酯键的RNA的问题，适用于RNA制备领域。
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