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公开(公告)号：CN117070512B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202311335092.4
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种tRNA及其生物合成方法。其中，该tRNA的生物合成方法包括：利用RNA连接酶将不同底物的3'端和5'端连接形成磷酸二酯键，形成tRNA，底物的数量≥2；RNA连接酶包括RNA连接酶家族Rnl1、Rnl2、Rnl3和Rnl5中任意的一种或多种酶。能够解决现有技术中合成tRNA产率低的问题，适用于tRNA合成领域。
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公开(公告)号：CN117070513A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311335112.8
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种含有硫代磷酸酯键的RNA及其制备方法。其中，制备方法包括：利用RNA连接酶催化底物的3'羟基与5'硫代磷酸连接，形成含有硫代磷酸酯键的RNA；5'硫代磷酸包括含有硫代修饰的5'磷酸，硫代修饰包括5'磷酸的P‑OH或P=O中的氧原子被硫原子取代，相应地变为P‑SH或P=S；RNA连接酶包括RNA连接酶家族1、2或3中任意的一种或多种酶；包括：SEQ ID NO：1‑22等序列所示的RNA连接酶中的一种或多种。能够解决现有技术中的难以利用酶催化方法制备含有硫代磷酸酯键的RNA的问题，适用于RNA制备领域。
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公开(公告)号：CN117070514B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202311335114.7
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种非天然RNA的制备方法及产品。其中，上述非天然RNA的制备方法包括：利用RNA连接酶将底物供体的3'端与底物受体的5'端连接形成磷酸二酯键，连接不需要模板链，制备获得非天然RNA，底物供体和/或底物受体中包括一个或多个非天然核苷酸；底物受体的5'端为磷酸基团；底物供体的3'端为羟基基团；RNA连接酶包括RNA连接酶家族Rnl1和Rnl2中任意的一种或多种酶。能够解决现有技术中难以利用酶催化制备非天然RNA的问题，适用于RNA合成领域。
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公开(公告)号：CN117106782B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202311335106.2
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/10 , C12N9/00
摘要： 本发明提供了一种gRNA及其生物合成方法，适用于gRNA合成领域。其中，该生物合成方法包括：利用RNA连接酶将不同底物的3'端和5'端连接形成磷酸二酯键，形成gRNA，gRNA包括天然gRNA或非天然gRNA，底物的数量≥2；底物的连接位点位于gRNA的茎环结构互补区域、茎环结构环状区域或茎环结构间的连接区域中的任意一个或多个位置，底物的内部或底物之间能够进行碱基互补配对，形成gRNA的二级结构；RNA连接酶包括RNA连接酶家族1、2或3中任意的一种或多种酶。能够解决现有技术中合成gRNA纯度低的问题。
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公开(公告)号：CN117070513B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202311335112.8
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种含有硫代磷酸酯键的RNA及其制备方法。其中，制备方法包括：利用RNA连接酶催化底物的3'羟基与5'硫代磷酸连接，形成含有硫代磷酸酯键的RNA；5'硫代磷酸包括含有硫代修饰的5'磷酸，硫代修饰包括5'磷酸的P‑OH或P=O中的氧原子被硫原子取代，相应地变为P‑SH或P=S；RNA连接酶包括RNA连接酶家族1、2或3中任意的一种或多种酶；包括：SEQ ID NO：1‑22等序列所示的RNA连接酶中的一种或多种。能够解决现有技术中的难以利用酶催化方法制备含有硫代磷酸酯键的RNA的问题，适用于RNA制备领域。
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公开(公告)号：CN117106782A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311335106.2
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/10 , C12N9/00
摘要： 本发明提供了一种gRNA及其生物合成方法，适用于gRNA合成领域。其中，该生物合成方法包括：利用RNA连接酶将不同底物的3'端和5'端连接形成磷酸二酯键，形成gRNA，gRNA包括天然gRNA或非天然gRNA，底物的数量≥2；底物的连接位点位于gRNA的茎环结构互补区域、茎环结构环状区域或茎环结构间的连接区域中的任意一个或多个位置，底物的内部或底物之间能够进行碱基互补配对，形成gRNA的二级结构；RNA连接酶包括RNA连接酶家族1、2或3中任意的一种或多种酶。能够解决现有技术中合成gRNA纯度低的问题。
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公开(公告)号：CN117070514A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311335114.7
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种非天然RNA的制备方法及产品。其中，上述非天然RNA的制备方法包括：利用RNA连接酶将底物供体的3'端与底物受体的5'端连接形成磷酸二酯键，连接不需要模板链，制备获得非天然RNA，底物供体和/或底物受体中包括一个或多个非天然核苷酸；底物受体的5'端为磷酸基团；底物供体的3'端为羟基基团；RNA连接酶包括RNA连接酶家族Rnl1和Rnl2中任意的一种或多种酶。能够解决现有技术中难以利用酶催化制备非天然RNA的问题，适用于RNA合成领域。
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公开(公告)号：CN117070512A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311335092.4
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英医药化学有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
摘要： 本发明提供了一种tRNA及其生物合成方法。其中，该tRNA的生物合成方法包括：利用RNA连接酶将不同底物的3'端和5'端连接形成磷酸二酯键，形成tRNA，底物的数量≥2；RNA连接酶包括RNA连接酶家族Rnl1、Rnl2、Rnl3和Rnl5中任意的一种或多种酶。能够解决现有技术中合成tRNA产率低的问题，适用于tRNA合成领域。
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公开(公告)号：CN117070583B
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202311335115.1
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12P19/34
摘要： 本发明提供了一种抑制PCSK9基因表达的siRNA的制备方法。其中，该制备方法中的siRNA为由互补配对的正义链和反义链组成的双链RNA；制备方法包括：将正义链底物、反义链底物和RNA连接酶混合，利用RNA连接酶催化正义链底物之间和反义链底物之间以磷酸二酯键连接，获得正义链和反义链，从而获得此种siRNA；正义链底物能够组成正义链，反义链底物能够组成反义链；上述正义链为SEQ ID NO：45所示的核酸序列，反义链为SEQ ID NO：46所示的核酸序列。能够解决现有技术中的制备此种siRNA纯度较低的问题，适用于药物生物合成领域。
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公开(公告)号：CN117070583A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311335115.1
申请日：2023-10-16
申请人： 吉林凯莱英制药有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司
IPC分类号： C12P19/34 , C12N15/113
摘要： 本发明提供了一种抑制PCSK9基因表达的siRNA的制备方法。其中，该制备方法中的siRNA为由互补配对的正义链和反义链组成的双链RNA；制备方法包括：将正义链底物、反义链底物和RNA连接酶混合，利用RNA连接酶催化正义链底物之间和反义链底物之间以磷酸二酯键连接，获得正义链和反义链，从而获得此种siRNA；正义链底物能够组成正义链，反义链底物能够组成反义链；上述正义链为SEQ ID NO：45所示的核酸序列，反义链为SEQ ID NO：46所示的核酸序列。能够解决现有技术中的制备此种siRNA纯度较低的问题，适用于药物生物合成领域。
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