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公开(公告)号:CN111334501A
公开(公告)日:2020-06-26
申请号:CN202010173001.1
申请日:2020-03-13
IPC分类号: C12N15/10 , C12Q1/6806 , C12Q1/70
摘要: 本发明公开了一种复合缓冲液。根据本发明的实施例,该复合缓冲液包括:1-5mM两性离子缓冲液、0.05-0.5mM非离子螯合剂、0.002-0.03质量/体积%非离子型表面活性剂,pH=7.0-8.0。该复合缓冲液适于低浓度核酸的保存,有利于核酸保持良好的稳定性和活性。并且,该复合缓冲液有利于核酸抵抗非低吸附处理耗材,降低核酸之间的交缠,和非特异吸附,尤其适于高通量测序的低浓度核酸样本的保存,能显著降低长期反复冻融对样本活性的影响。
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公开(公告)号:CN111334501B
公开(公告)日:2024-03-15
申请号:CN202010173001.1
申请日:2020-03-13
IPC分类号: C12N15/10 , C12Q1/6806 , C12Q1/70
摘要: 本发明公开了一种复合缓冲液。根据本发明的实施例,该复合缓冲液包括:1‑5mM两性离子缓冲液、0.05‑0.5mM非离子螯合剂、0.002‑0.03质量/体积%非离子型表面活性剂,pH=7.0‑8.0。该复合缓冲液适于低浓度核酸的保存,有利于核酸保持良好的稳定性和活性。并且,该复合缓冲液有利于核酸抵抗非低吸附处理耗材,降低核酸之间的交缠,和非特异吸附,尤其适于高通量测序的低浓度核酸样本的保存,能显著降低长期反复冻融对样本活性的影响。
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公开(公告)号:CN113026113B
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN201911353778.X
申请日:2019-12-25
IPC分类号: C40B50/06
摘要: 本发明公开了缓冲液组合物及其应用,其中,该缓冲液组合物包括:通用缓冲液,所述通用缓冲液包括5‑25mMol通用Tris缓冲液、5‑20mMol通用二价阳离子、75‑150mMol通用一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mMol二硫苏糖醇(DTT),pH8‑10;以及连接缓冲液,所述连接缓冲液包括33‑66mM连接Tris缓冲液,0.5‑5mM连接二价阳离子、0.5‑10mM二硫苏糖醇(DTT)、5‑15%PEG4000‑8000和0.5‑2mM ATP,pH值为7‑9。由此,该缓冲液组合物能用于多样本的文库构建,并且,反应时间短,转化率高,错配率低。
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公开(公告)号:CN113026114B
公开(公告)日:2022-10-28
申请号:CN201911353781.1
申请日:2019-12-25
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C40B50/06
摘要: 本发明公开了缓冲液及其应用,其中,该缓冲液包括:5‑25mM Tris缓冲液、5‑20mM二价阳离子、75‑150mM一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mM二硫苏糖醇,pH8‑10。该缓冲液的兼容性好,稳定性高,适用于文库构建过程中的多步反应,使文库构建过程中的多步反应可以连续进行,无需纯化,显著降低了反应时间,并且,有利于提高构建DNA文库的方法的效率和稳定性,同时,对T4DNA连接酶无明显的抑制作用。
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公开(公告)号:CN109988817A
公开(公告)日:2019-07-09
申请号:CN201711486034.6
申请日:2017-12-30
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明提供一种随机打断DNA的方法,其包括:在二价阳离子、随机DNA双链结合蛋白质、非离子表面活性剂以及一价盐的存在下,对DNA分子进行打断。通过本发明的方法能够有效提高二代测序文库构建的效率。
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公开(公告)号:CN112375807B
公开(公告)日:2023-02-21
申请号:CN202011289430.1
申请日:2017-12-30
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明提供一种随机打断DNA的方法,其包括:在二价阳离子、随机DNA双链结合蛋白质、非离子表面活性剂以及一价盐的存在下,对DNA分子进行打断。通过本发明的方法能够有效提高二代测序文库构建的效率。
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公开(公告)号:CN109321984B
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN201710647896.6
申请日:2017-08-01
摘要: 本发明涉及一种测序用DNA文库。本发明的测序用DNA文库包括第一双链DNA分子,所述第一双链DNA分子包括第一DNA链,该第一DNA链从5'端起依次包括位于5'端的桥式引物DNA序列1、目的片段特异性扩增引物DNA序列1、待读取DNA序列S、目的片段特异性扩增引物DNA序列2的反向互补序列以及位于3'端的桥式引物DNA序列2的反向互补序列,所述桥式引物DNA序列1和所述桥式引物DNA序列2是测序芯片上的DNA序列,所述目的片段特异性扩增引物DNA序列1和所述目的片段特异性扩增引物DNA序列2用于对包含待读取DNA序列S的目的DNA片段进行特异性扩增的引物DNA序列。本发明的测序用DNA文库能够增加单轮测序反应中碱基读取复杂度,从而提高测序质量。
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公开(公告)号:CN113026113A
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN201911353778.X
申请日:2019-12-25
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C40B50/06
摘要: 本发明公开了缓冲液组合物及其应用,其中,该缓冲液组合物包括:通用缓冲液,所述通用缓冲液包括5‑25mMol通用Tris缓冲液、5‑20mMol通用二价阳离子、75‑150mMol通用一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mMol二硫苏糖醇(DTT),pH8‑10;以及连接缓冲液,所述连接缓冲液包括33‑66mM连接Tris缓冲液,0.5‑5mM连接二价阳离子、0.5‑10mM二硫苏糖醇(DTT)、5‑15%PEG4000‑8000和0.5‑2mM ATP,pH值为7‑9。由此,该缓冲液组合物能用于多样本的文库构建,并且,反应时间短,转化率高,错配率低。
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公开(公告)号:CN109988817B
公开(公告)日:2020-12-04
申请号:CN201711486034.6
申请日:2017-12-30
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明提供一种随机打断DNA的方法,其包括:在二价阳离子、随机DNA双链结合蛋白质、非离子表面活性剂以及一价盐的存在下,对DNA分子进行打断。通过本发明的方法能够有效提高二代测序文库构建的效率。
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公开(公告)号:CN111100905A
公开(公告)日:2020-05-05
申请号:CN201911354966.4
申请日:2019-12-25
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806
摘要: 本发明公开了缓冲液及其应用,其中,该缓冲液包括:33-66mM Tris缓冲液,1.6-5mM二价阳离子、25-75mM一价阳离子、0.5-10mM二硫苏糖醇(DTT)、5-15%PEG4000-8000和0.5-2mM ATP,pH值为7-9。该缓冲液能提高连接反应效率,增加底物的转化率,降低连接反应的错配率,并且兼容性好,对连接酶的抑制作用小,同时,显著降低体系用酶量,从而降低了实验的成本。
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