一种维生素D3的C25位羟化酶突变体及其基因工程菌与应用

    公开(公告)号:CN117106737B

    公开(公告)日:2025-03-25

    申请号:CN202311071176.1

    申请日:2023-08-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种维生素D3的C25位羟化酶突变体及其基因工程菌与应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的维生素D3羟化酶突变体是将巨大芽孢杆菌H‑1中CYP109E1‑H酶基因的293位组氨酸突变成了丙氨酸,得到维生素D3羟化酶突变体CYP109E1‑H1,并以pMA5为表达质粒,实现枯草芽孢杆菌中维生素D3羟化酶突变体的异源表达。本发明还提供了该突变体和工程菌在制备骨化二醇/或骨化三醇中的应用,本发明提供的工程菌能够在骨化二醇/或骨化三醇合成时,提高产物浓度积累量、缩短反应耗时,满足了工业化生产上缩短时间成本的生产需求。

    一种分枝杆菌的17β-羟基类固醇脱氢酶突变体及其异源表达

    公开(公告)号:CN112592904A

    公开(公告)日:2021-04-02

    申请号:CN202011620795.8

    申请日:2020-12-31

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 许正宏 李会 刘伟

    Abstract: 本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其异源表达,属于酶基因工程及酶工程领域。本发明提供一种来自于分枝杆菌(Mcobacterium sp.)LY‑1的放线菌17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy1及其基因序列,以pMA5为表达质粒,以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主,实现了分枝杆菌LY‑1的17β‑HSDy1的外源表达。对软件模拟获得的该酶关键T239位点,突变成了酪氨酸,酶活提高了19.2%,达到9571.77U·mg‑1。对突变获得的重组枯草芽孢杆菌WB600‑pMA5‑17βHSDy1‑T239Y进行酶活‑生长曲线的测定,在发酵28h时,重组枯草芽孢杆菌WB600‑pMA5‑17βHSDy1‑T239Y的比酶活达到最高。该异源表达菌株可用于雄甾烯‑1,4‑烯‑3,17‑二酮转化宝丹酮的生产,具有潜在的工业应用。

    利用角蛋白酶进行金纳米粒子制备的方法及其应用

    公开(公告)号:CN109456958A

    公开(公告)日:2019-03-12

    申请号:CN201811320351.5

    申请日:2018-11-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种生物法制备金纳米粒子,即采用角蛋白酶进行金纳米粒子制备的方法,属于工业生物技术领域。基于本专利所采用的角蛋白酶突出的还原性能,将角蛋白酶液加入到配制好的不同浓度氯金酸溶液中,通过控制氯金酸溶液浓度、酶液添加量和反应时间等因素逐步进行合成反应优化,成功制备获得金纳米粒子,粒径为30nm左右,Zeta电位为-13mV。该生物法制备金纳米粒子,可以有效解决传统的物理法所需设备的限制和化学法存在环境污染等问题,同时,该方法周期短,工艺简单,适合于工业化大规模的生产。另外,金纳米粒子独特的光学特性以及增强效应,使其被广泛应用于生物及医学检测等领域,具有良好的应用前景。

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