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公开(公告)号:CN119410733A
公开(公告)日:2025-02-11
申请号:CN202411536155.7
申请日:2024-10-31
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种生物酶法合成NADPH的方法,将底物NAD+、甲酸、甲酸脱氢酶、NADH激酶和缓冲液加入反应釜内在体外或细胞内催化生成NADPH,产物经离心分离,取上清得到NADH产物溶液。本发明仅需两步即可获得目标产物,产率较高,产物分离简单,成本低,适合工业化生产。
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公开(公告)号:CN118745421A
公开(公告)日:2024-10-08
申请号:CN202410917740.5
申请日:2024-07-10
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
Abstract: 本申请公开了一种环氧化物水解酶突变体、制备方法及其应用,环氧化物水解酶为EHs‑2,环氧化物水解酶突变体突变位点如下:将EHs‑2的第38位H突变为I,将EHs‑2的第41位H突变为R,将EHs‑2的第71位H突变为V,将EHs‑2的第117位K突变为L,将EHs‑2的第187位L突变为F,将EHs‑2的第244位S突变为A,相比于EHs‑2,本发明对于外消旋环氧苯乙烷的催化活力提升1.8‑10.3倍,合成的(R)‑环氧苯乙烷和(R)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇的ee值分别在99%和98%以上,本发明在高效催化外消旋环氧苯乙烷制备(R)‑环氧苯乙烷和(R)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇的应用中展现了良好的工业化潜力和商业价值。
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公开(公告)号:CN118530978A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410547447.4
申请日:2024-05-06
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
IPC: C12N9/88 , C12N9/04 , C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/60 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P7/22 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程领域,具体涉及一种体外生物转化生产羟基酪醇的方法及其应用。本发明提供了一种包括芳香醛合酶、醛酮还原酶、酪氨酸酶的组合物用于生产羟基酪醇。本发明的羟基酪醇合成路线非常的简单易操作,酪氨酸作为起始底物价格便宜,具有很好的经济适用性。而且本发明的羟基酪醇合成路线较短、操作简便,尤其是不需要使用有毒化学试剂和易爆化学品,具有很高的环境友好性。本发明设计的方法路线只需简单的几个酶加上缓冲液即可,相比于化学合成法,杂质更少,后期分离纯化也更为方便。
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公开(公告)号:CN118726288A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410953283.5
申请日:2024-07-16
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程领域,具体涉及一种重组酮醛还原酶突变体及其应用。本发明提供了25种酮醛还原酶AKR44突变体、23种酮醛还原酶AKR52突变体。这些突变体可以催化DKTP不对称还原制备度洛西汀中间体DHTP,其中可催化的底物浓度达到50g/L。本发明提供的48种突变体酮醛还原酶,以及2种野生型酮醛还原酶可实现95%以上的转化率和95%以上的e.e值,部分突变体甚至可以达到100%转化率和100%e.e值。使用本发明提供的酮醛还原酶催化DKTP生产DHTP能够进行大体积生产,纯度在90%以上,具有巨大的工业化应用潜力。
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公开(公告)号:CN118685472A
公开(公告)日:2024-09-24
申请号:CN202410871537.9
申请日:2024-07-01
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
IPC: C12P17/10
Abstract: 本发明公开了一种脱羧肌肽的生物酶法合成工艺,采用体外生物酶催化合成方法,具体为:底物L‑组氨酸、底物β‑丙氨酸、组氨酸脱羧酶、非核糖体肽合成酶ebony和辅酶磷酸泛酰硫氢乙胺转移酶在同一反应釜内催化生成脱羧肌肽。相比于目前的化学合成法和生物发酵法,本发明在产率和生产成本方面具有极大优势。
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公开(公告)号:CN118685463A
公开(公告)日:2024-09-24
申请号:CN202411002189.8
申请日:2024-07-25
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种达泊西汀手性中间体的酶催化合成方法,向反应容器中加入表达醛酮还原酶/醇脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、表达甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、缓冲液、底物、助溶剂、甲酸铵和辅酶,在25~35℃下反应2~24小时,萃取、分离、旋蒸后,即得达泊西汀手性中间体。本发明反应条件温和、对环境友好,具有高度的区域选择性和立体选择性,而且避免了手性拆分和产物中重金属残留,恰好弥补了化学方法的不足之处,转化率高,手性纯度高,酶用量少,制备成本低。
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公开(公告)号:CN117867044B
公开(公告)日:2024-07-30
申请号:CN202311811505.1
申请日:2023-12-27
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
IPC: C12P7/66
Abstract: 本发明公开了一种维生素MK‑4的生物酶法制备工艺,包括以下步骤:(1)二甲基烯丙基二磷酸的合成,(2)异戊烯基二磷酸的合成,(3)香叶酰香叶酰二磷酸的合成,(4)MK‑4的合成。本发明大大缩短了合成路线,同时采用廉价原料作为出发底物,大大降低了MK‑4的生产成本,且兼具生物法的相关优势比如污染少、操作简便等。相比于化学合成法和传统的微生物发酵法,本发明在产率和生产成本方面具有极大优势,另外本发明的新生物合成路线所得MK‑4产品并不掺杂有MK‑6,产品纯度高,减少了后续分离纯化的难度。
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公开(公告)号:CN119614602A
公开(公告)日:2025-03-14
申请号:CN202510168398.8
申请日:2025-02-17
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
IPC: C12N15/70 , C12N15/62 , C07K1/14 , C07K1/34 , C07K1/20 , C07K1/36 , C07K14/605 , C12N9/50 , C12N9/48 , C12P21/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种细胞内酶切制备司美格鲁肽前体肽的方法,包括以下步骤:(1)将促溶标签GST和司美格鲁肽前体肽通过蛋白酶特异性识别氨基酸位点连接在一起形成融合蛋白;(2)将融合蛋白的编码核苷酸序列、KEX2蛋白酶的编码核苷酸序列以及羧肽酶B的编码核苷酸序列整合到同一表达载体中,形成重组载体;(3)重组载体转化工程菌并进行发酵生产;(4)发酵产物离心收集菌体,纯化后获得司美格鲁肽前体肽粉末。本发明整个操作流程更加简便流畅,省略了繁琐的回收步骤,显著降低了司美格鲁肽前体肽的制备和回收难度。
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公开(公告)号:CN119120634A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202411255016.7
申请日:2024-03-21
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种基于环氧化物水解酶制备(R)‑环氧苯乙烷的方法,以外消旋环氧乙烷类化合物为底物,环氧化物水解酶的作用下,在双相体系中进行酶催化反应,获得(R)‑环氧苯乙烷以及(R)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇或(S)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇;酶催化反应的温度控制为5‑50℃,反应时间为2‑24小时。本发明能够高效、高立体选择性拆分外消旋环氧乙烷类化合物,酶催化效果好,产品光学纯度高。
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公开(公告)号:CN118147265B
公开(公告)日:2024-11-05
申请号:CN202410325442.7
申请日:2024-03-21
Applicant: 杭州微远生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种基于环氧化物水解酶的环氧乙烷类化合物的手性拆分方法,以外消旋环氧乙烷类化合物为底物,环氧化物水解酶的作用下,在双相体系中进行酶催化反应,获得单一手性产物;酶催化反应的温度控制为5‑50℃,反应时间为2‑24小时。本发明能够高效、高立体选择性拆分外消旋环氧乙烷类化合物,酶催化效果好,产品光学纯度高。
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