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    环氧化物水解酶突变体、制备方法及其应用
    1.
    发明公开
    环氧化物水解酶突变体、制备方法及其应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN118745421A

    公开(公告)日：2024-10-08

    申请号：CN202410917740.5

    申请日：2024-07-10

    申请人： 杭州微远生物科技有限公司

    发明人： 吴彦 ,  罗志波 ,  李宁 ,  卢夏锋 ,  余达勇 ,  章雪琦

    IPC分类号： C12N9/14 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/02 ,  C12P7/22 ,  C12R1/19

    摘要： 本申请公开了一种环氧化物水解酶突变体、制备方法及其应用，环氧化物水解酶为EHs‑2，环氧化物水解酶突变体突变位点如下:将EHs‑2的第38位H突变为I，将EHs‑2的第41位H突变为R，将EHs‑2的第71位H突变为V，将EHs‑2的第117位K突变为L，将EHs‑2的第187位L突变为F，将EHs‑2的第244位S突变为A，相比于EHs‑2，本发明对于外消旋环氧苯乙烷的催化活力提升1.8‑10.3倍，合成的(R)‑环氧苯乙烷和(R)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇的ee值分别在99％和98％以上，本发明在高效催化外消旋环氧苯乙烷制备(R)‑环氧苯乙烷和(R)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇的应用中展现了良好的工业化潜力和商业价值。

    一种重组酮醛还原酶突变体及其应用
    6.
    发明公开
    一种重组酮醛还原酶突变体及其应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN118726288A

    公开(公告)日：2024-10-01

    申请号：CN202410953283.5

    申请日：2024-07-16

    申请人： 杭州微远生物科技有限公司

    发明人： 吴彦 ,  罗志波 ,  郑素玲 ,  曹敏 ,  唐宇航 ,  董磊迟

    IPC分类号： C12N9/04 ,  C07K19/00 ,  C12P17/00 ,  C12P41/00

    摘要： 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种重组酮醛还原酶突变体及其应用。本发明提供了25种酮醛还原酶AKR44突变体、23种酮醛还原酶AKR52突变体。这些突变体可以催化DKTP不对称还原制备度洛西汀中间体DHTP，其中可催化的底物浓度达到50g/L。本发明提供的48种突变体酮醛还原酶，以及2种野生型酮醛还原酶可实现95％以上的转化率和95％以上的e.e值，部分突变体甚至可以达到100％转化率和100％e.e值。使用本发明提供的酮醛还原酶催化DKTP生产DHTP能够进行大体积生产，纯度在90％以上，具有巨大的工业化应用潜力。

    脱羧肌肽的生物酶法合成工艺
    7.
    发明公开
    脱羧肌肽的生物酶法合成工艺 审中-实审

    公开(公告)号：CN118685472A

    公开(公告)日：2024-09-24

    申请号：CN202410871537.9

    申请日：2024-07-01

    申请人： 杭州微远生物科技有限公司

    发明人： 罗志波 ,  吴彦 ,  曲茂华 ,  马牧青 ,  章雪琦

    IPC分类号： C12P17/10

    摘要： 本发明公开了一种脱羧肌肽的生物酶法合成工艺，采用体外生物酶催化合成方法，具体为：底物L‑组氨酸、底物β‑丙氨酸、组氨酸脱羧酶、非核糖体肽合成酶ebony和辅酶磷酸泛酰硫氢乙胺转移酶在同一反应釜内催化生成脱羧肌肽。相比于目前的化学合成法和生物发酵法，本发明在产率和生产成本方面具有极大优势。

    一种达泊西汀手性中间体的酶催化合成方法
    8.
    发明公开
    一种达泊西汀手性中间体的酶催化合成方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN118685463A

    公开(公告)日：2024-09-24

    申请号：CN202411002189.8

    申请日：2024-07-25

    申请人： 杭州微远生物科技有限公司

    发明人： 罗志波 ,  吴彦 ,  曹敏 ,  唐宇航 ,  郑素玲 ,  郝鑫

    IPC分类号： C12P7/22 ,  C12N9/10 ,  C12N9/04 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

    摘要： 本发明公开了一种达泊西汀手性中间体的酶催化合成方法，向反应容器中加入表达醛酮还原酶/醇脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、表达甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、缓冲液、底物、助溶剂、甲酸铵和辅酶，在25～35℃下反应2～24小时，萃取、分离、旋蒸后，即得达泊西汀手性中间体。本发明反应条件温和、对环境友好，具有高度的区域选择性和立体选择性，而且避免了手性拆分和产物中重金属残留，恰好弥补了化学方法的不足之处，转化率高，手性纯度高，酶用量少，制备成本低。

    一种维生素MK-4的生物酶法制备工艺
    9.
    发明授权
    一种维生素MK-4的生物酶法制备工艺 有权 质押

    公开(公告)号：CN117867044B

    公开(公告)日：2024-07-30

    申请号：CN202311811505.1

    申请日：2023-12-27

    申请人： 杭州微远生物科技有限公司

    发明人： 罗志波 ,  吴彦 ,  曲茂华

    IPC分类号： C12P7/66

    摘要： 本发明公开了一种维生素MK‑4的生物酶法制备工艺，包括以下步骤：（1）二甲基烯丙基二磷酸的合成，（2）异戊烯基二磷酸的合成，（3）香叶酰香叶酰二磷酸的合成，（4）MK‑4的合成。本发明大大缩短了合成路线，同时采用廉价原料作为出发底物，大大降低了MK‑4的生产成本，且兼具生物法的相关优势比如污染少、操作简便等。相比于化学合成法和传统的微生物发酵法，本发明在产率和生产成本方面具有极大优势，另外本发明的新生物合成路线所得MK‑4产品并不掺杂有MK‑6，产品纯度高，减少了后续分离纯化的难度。