一种DNA提取试剂盒及提取方法

    公开(公告)号:CN111808843A

    公开(公告)日:2020-10-23

    申请号:CN202010705451.0

    申请日:2020-07-21

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种DNA提取试剂盒及提取方法,试剂盒由以下成分组成:红细胞裂解液、白细胞裂解液、蛋白酶K溶液、醋酸铵溶液、无水乙醇、75%乙醇和TE溶液。提取方法是全血样本先用红细胞裂解液去除无核成分,再加入白细胞裂解液和蛋白酶K裂解细胞并释放核酸,最后采用醋酸铵溶液、无水乙醇、75%乙醇和TE溶液去除杂质,获得DNA提取产物。该试剂盒成分简单,无有毒有害成分,所需样品少,提取效果好;提取方法操作简单、快速,不需要特殊器材辅助,仅使用离心管和离心机即可完成,整个提取过程只需要40分钟即可完成;所提取的DNA产物浓度和纯度均符合要求。

    一种循环肿瘤细胞快速检测试剂盒

    公开(公告)号:CN106596938A

    公开(公告)日:2017-04-26

    申请号:CN201611022548.1

    申请日:2016-11-15

    IPC分类号: G01N33/574 G01N15/14

    摘要: 本发明公开了一种循环肿瘤细胞快速检测试剂盒,组成包括:细胞密度梯度分离液、多孔隔膜分离管、5mL容积的离心管、表皮类肿瘤标志物抗体和间质类肿瘤标志物抗体。本试剂盒利用密度梯度离心法去除了血液中绝大多数的红细胞及白细胞背景干扰,同时对血液中的循环肿瘤细胞进行富集。之后使用以表皮类和间质类两大类共4种肿瘤标志物的荧光抗体对循环肿瘤细胞进行荧光标记,最后在通用的流式细胞仪中完成对循环肿瘤细胞检出并计数,本发明的试剂盒考虑到了肿瘤细胞的表皮间质转换过程,增加了捕获间质类的循环肿瘤细胞,增加了检测阳性符合率,精确度高,方便快速,成本较低且耗时较短,检测计数由流式细胞仪自动完成,重复性强。

    一种循环肿瘤细胞分离方法

    公开(公告)号:CN109777775A

    公开(公告)日:2019-05-21

    申请号:CN201910080904.2

    申请日:2019-01-28

    IPC分类号: C12N5/09 C12N13/00

    摘要: 本发明提供了一种循环肿瘤细胞分离方法,包括如下步骤:1)取血液样本与PBS溶液混匀置于多孔隔膜离心管的隔膜上层,进行密度梯度离心分离;2)将隔膜上层溶液取出置于第一离心管中,离心,去除上清液,得含目的细胞的溶液;3)在第二离心管中加入CD45和CD15混合磁珠,将含目的细胞溶液转入第二离心管,混匀,2~8℃震荡孵育;4)将孵育的混合液置于磁力架上静置,将含目的细胞的上清液转移至第三离心管中,离心,去除上清液,得纯化的循环肿瘤细胞。本发明采用密度梯度离心和免疫磁珠阴性富集相结合的方法从外周血中分离得到肿瘤细胞,分离周期短,且需要的样品量少,实现了对肿瘤细胞的高度富集,肿瘤细胞回收率高达70%以上,白细胞残留量低于1万个。

    同时提取循环肿瘤细胞DNA和肿瘤游离DNA的试剂盒

    公开(公告)号:CN106480017A

    公开(公告)日:2017-03-08

    申请号:CN201611017879.6

    申请日:2016-11-15

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种同时提取循环肿瘤细胞DNA和肿瘤游离DNA的试剂盒,包括细胞密度梯度分离液、多孔隔膜分离管、5mL容积的离心管和血液游离DNA提取试剂盒。该试剂盒根据游离DNA和循环肿瘤细胞DNA的突变基因检出率和发生无相关性的特点,利用二者检测结果的互补性,创意性的将游离DNA和循环肿瘤细胞DNA两种来源叠加提高样本量,这样能有效的提高患者肿瘤突变基因的检出率,达到临床的检测要求,从而使无创液态活检得以更好更广的运用,使更多的不同条件类型的肿瘤患者能从肿瘤分子诊断中获益。而且使用过程也方便简单,检测成本远低于单细胞检测技术,医生容易掌握,适合临床应用推广。

    一种细胞保护剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN108990962A

    公开(公告)日:2018-12-14

    申请号:CN201810581341.0

    申请日:2018-06-07

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明提供了一种细胞保护剂,该细胞保护剂含有以下组分:终浓度为10~100mmol/L的三羟甲基氨基甲烷,终浓度为9g/L的氯化钠,终浓度为10~40g/L的葡萄糖,终浓度为1~20g/L的蔗糖,终浓度为1~20g/L的丙氨酰谷氨酰胺。本发明还提供了上述细胞保护剂的制备方法和应用。本发明将细胞保护剂与血液按照一定的比例混合后,可于5~25℃条件下,保存48小时左右而不影响血液中淋巴细胞的活性。为血液样本的保存和运输提供了方便。