公开(公告)号：CN101063123B

公开(公告)日：2011-06-15

申请号：CN200710020890.2

申请日：2007-04-17

申请人： 江南大学

发明人： 金坚 ,  张莲芬 ,  陈伟 ,  李洁 ,  许正宏 ,  雷楗勇 ,  窦文芳 ,  史仲平

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N1/19

摘要： 人C-型利尿钠肽(CNP)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白的制备方法及产品，属于长效重组融合蛋白药物技术领域。本发明利用重叠PCR技术，将HSA cDNA和CNP cDNA进行拼接，中间不加入任何连接肽，得到的HSA-CNP cDNA融合基因被整合到宿主的染色体中，在宿主系统中进行表达。本发明的融合蛋白包括与人血清白蛋白至少85％序列同源的第一区和与人C-型利尿钠肽至少85％序列同源的第二区，该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入。本发明的融合蛋白在保持了人C-型利尿钠肽的生理特性的基础上延长其在体内的半衰期，改善其溶解度，在药学领域有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN101280020A

公开(公告)日：2008-10-08

申请号：CN200810024989.4

申请日：2008-05-23

申请人： 江南大学

发明人： 金坚 ,  周利苹 ,  张莲芬 ,  李英 ,  储敏 ,  陈蕴

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/81 ,  C12N15/63

摘要： 人血清白蛋白与人胰岛素C肽的融合蛋白的制备方法及产品，属于长效融合蛋白药物技术领域。本发明将人血清白蛋白(简称HSA)基因的cDNA与C肽基因(简称CP)的cDNA直接连接，中间不加入任何连接肽，得到的HSA－CP cDNA融合基因在宿主细胞中进行表达；本发明的融合蛋白包括与人血清白蛋白至少85％序列同源的第一区和与人C肽至少85％序列同源的第二区，两区直接连接，中间不加入任何连接肽，该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入；宿主细胞可以是细菌、酵母、昆虫细胞、动物细胞、植物细胞等。本发明的融合蛋白在保持了人C肽的生理特性的基础上延长其在体内的半衰期，在药学领域有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN101280017A

公开(公告)日：2008-10-08

申请号：CN200810024986.0

申请日：2008-05-23

申请人： 江南大学

发明人： 金坚 ,  丁月娣 ,  张莲芬 ,  李英 ,  储敏 ,  陈蕴

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/81 ,  C12N15/63

摘要： 人脑钠肽二联体[(BNP)2]与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白及其制备，属于长效重组融合蛋白药物技术领域。本发明利用重叠PCR技术，将串联的两个BNP cDNA(简称(BNP)2)和HSA cDNA进行拼接，中间不加入任何连接肽，得到的(BNP)2－HSA cDNA融合基因被整合到宿主的染色体中，在宿主表达系统中进行表达。本发明的融合蛋白包括与人脑钠肽至少85％序列同源的第一区和与人血清白蛋白至少85％序列同源的第二区。该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入。本发明的融合蛋白在保持了人脑钠肽的生理特性的基础上延长其在体内的半衰期，改善其溶解度，在药学领域有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN101063124A

公开(公告)日：2007-10-31

申请号：CN200710020891.7

申请日：2007-04-17

申请人： 江南大学

发明人： 李华钟 ,  金坚 ,  段作营 ,  孙慧碧 ,  张莲芬

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N1/19

摘要： 人白介素－11(IL－11)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白的制备方法及产品，属于长效重组融合蛋白药物技术领域。本发明利用重叠PCR技术，连接IL－11cDNA和HSA cDNA，中间不加入任何连接肽，得到的HSA－IL－11cDNA融合基因被整合到宿主的染色体中，在宿主系统中进行表达。本发明的融合蛋白包括与人血清白蛋白至少85％序列同源的第一区和与人白介素－11至少85％序列同源的第二区，两区直接连接，中间不加入任何连接肽，该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入。本发明的融合蛋白在保持了人白介素－11的生理特性的基础上，延长其在体内的半衰期，改善其溶解度，在药学领域有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN1877332A

公开(公告)日：2006-12-13

申请号：CN200610088261.9

申请日：2006-07-06

申请人： 江南大学

发明人： 张莲芬 ,  金坚 ,  许赣荣 ,  许泓瑜

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N21/17

摘要： 一种检测赭曲霉毒素A的酶联免疫分析试剂盒及其检测方法，属于酶联免疫分析(ELISA)技术领域，用于对粮食，饲料及其食品中赭曲霉毒素A(OTA)含量的检测。本试剂盒采用ELISA检测OTA，测定的基础是标记免疫反应。微孔板包被有OTA－BSA，加入OTA标准或样品，再加入OTA抗体。游离的OTA与微孔板上的OTA－BSA竞争OTA抗体，没有连接的OTA抗体被洗涤除去，加入HRP－羊抗兔抗体，标记免疫反应后没有连接的HRP－羊抗兔抗体被洗涤除去。加显色液、终止液后，用酶标仪测定其吸光度，吸光度的值与样品中的OTA浓度成反比，对照标准曲线即可确定被测样品中OTA的含量。本试剂盒结构简单，使用方便、廉价、灵敏度高，可以达到1ng/ml以上。

公开(公告)号：CN1831123A

公开(公告)日：2006-09-13

申请号：CN200610038790.8

申请日：2006-03-10

申请人： 江南大学

发明人： 金坚 ,  雷楗勇 ,  杨健良 ,  张莲芬 ,  窦文芳 ,  徐钰 ,  李洁

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C12N15/22 ,  C12N15/14 ,  C07K19/00 ,  C07K14/565 ,  C07K14/765 ,  C12N1/19

摘要： 人β干扰素与人血清白蛋白的融合蛋白的制备方法及产品，属于长效融合蛋白药物技术领域。本发明利用重叠PCR技术，连接IFNβcDNA和HSA cDNA，中间不加入任何连接肽，得到的IFNβ－HSA cDNA融合基因被整合到宿主的染色体中进行表达；本发明的融合蛋白包括与人β干扰素至少85％序列同源的第一区和与人血清白蛋白至少85％序列同源的第二区，两区直接连接，中间不加入任何连接肽，该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入；宿主表达系统可以是细菌、酵母、昆虫细胞、动物细胞、植物细胞等。本发明的融合蛋白在保持了人β干扰素的生理特性的基础上延长其在体内的半衰期，在药学领域有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN1793927A

公开(公告)日：2006-06-28

申请号：CN200510097304.5

申请日：2005-12-31

申请人： 江南大学

发明人： 金坚 ,  时瑾 ,  黄飚 ,  张莲芬 ,  许赣荣 ,  宓晓黎

IPC分类号： G01N33/543 ,  G01N33/532 ,  G01N21/76

摘要： 一种检测盐酸克伦特罗的试剂盒及其检测方法，属于时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术领域，用于对动物性食品、血液及尿液中盐酸克伦特罗(CBL)含量的检测。本发明配制的试剂盒，微孔板包被有CBL－OVA，加入CBL标准或样品，再加入CBL抗体。游离的CBL与微孔板上的CBL－OVA竞争CBL抗体，没有连接的CBL抗体被洗涤除去，加入EU3+－羊抗兔抗体，标记免疫反应后没有连接的EU3+－羊抗兔抗体被洗涤除去。加增强液后，用时间分辨荧光仪测定其荧光强度cps，荧光强度与样品中的CBL浓度成反比，对照标准曲线即可确定被测样品中CBL的含量。本发明提供的检测CBL试剂盒结构简单，使用方便、廉价、灵敏度高，最低检测浓度为小于0.05ng/ml，相应的最低检测量为小于25ng/kg。

公开(公告)号：CN1614422A

公开(公告)日：2005-05-11

申请号：CN200410065382.2

申请日：2004-11-27

申请人： 江南大学

发明人： 陶文沂 ,  金坚 ,  黄飚 ,  张莲芬 ,  时瑾

IPC分类号： G01N33/547 ,  G01N33/569 ,  G01N33/533 ,  G01N21/64

摘要： 一种检测赭曲霉毒素A的试剂盒及其检测方法，属于时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术领域，用于对粮食，饲料及其食品中赭曲霉毒素A(OTA)含量的检测。本发明配制的试剂盒，采用TRFIA检测OTA，测定的基础是标记免疫反应。微孔板包被有OTA－BSA，加入OTA标准或样品，再加入OTA抗体。游离的OTA与微孔板上的OTA－BSA竞争OTA抗体，没有连接的OTA抗体被洗涤除去，加入EU3+－羊抗兔抗体，标记免疫反应后没有连接的EU3+－羊抗兔抗体被洗涤除去。加增强液后，用时间分辨荧光仪测定其荧光强度cps，荧光强度与样品中的OTA浓度成反比，对照标准曲线即可确定被测样品中OTA的含量。本发明提供的检测OTA试剂盒结构简单，使用方便、廉价、灵敏度高，可以达到1ng/ml以上。

公开(公告)号：CN101239093A

公开(公告)日：2008-08-13

申请号：CN200810020496.3

申请日：2008-03-10

申请人： 江南大学

发明人： 金坚 ,  花慧 ,  张莲芬 ,  冯磊 ,  陆核 ,  李红

IPC分类号： A61K36/48 ,  A61K31/704 ,  A61K8/60 ,  A61K47/26 ,  A23L1/30 ,  A61P35/00 ,  A61P29/00 ,  A61P27/02 ,  A61P27/06 ,  A61P19/02 ,  A61P17/10 ,  A61P17/06 ,  A61P17/02 ,  A61P17/00 ,  A61P9/10 ,  C07J63/00 ,  A61K125/00 ,  A61K127/00 ,  A61K129/00 ,  A61K131/00 ,  A61K133/00 ,  A61K135/00

摘要： 本发明涉及合欢皮中具有抑制血管生成作用的活性成份。所述活性成份为皂甙类化合物。其有抗肿瘤血管生成及其它与血管生成有关疾病治疗、预防的用途；其可以在抑制血管生成的药物中使用；或者用作常规药用载体和/或赋形剂；或者在制备抑制血管生成的保健食品中的应用；或者在制备抑制血管生成的化妆品中的应用，为此，本发明还提供了所述活性成份的制备方法，用有机溶剂、含水有机溶剂或水提取合欢皮的干燥树皮、茎皮、叶、花、种子、豆荚或根，并将提取液过滤、浓缩成浸膏；所得的浸膏采用D－101型大孔树脂洗脱分离，收集有效组份进行硅胶层析柱洗脱分离，再收集有效组份进行反相苯乙烯色谱柱分离，得有效组份，回收溶剂成浸膏，冷冻干燥制成干粉。

公开(公告)号：CN101063125A

公开(公告)日：2007-10-31

申请号：CN200710020892.1

申请日：2007-04-17

申请人： 江南大学

发明人： 沈微 ,  金坚 ,  诸葛健 ,  王俊 ,  张莲芬

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12N1/19

摘要： 人甲状旁腺激素(PTH)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白的制备方法及产品，属于长效重组融合蛋白药物技术领域。本发明利用重叠PCR技术，将HAS cDNA和PTH cDNA进行拼接，中间不加入任何连接肽，得到的PTH－HSA cDNA融合基因被整合到宿主的染色体中，在宿主系统中进行表达。本发明的融合蛋白包括与人血清白蛋白至少85％序列同源的第一区和与人甲状旁腺激素至少85％序列同源的第二区。该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入。本发明的融合蛋白在保持了人甲状旁腺激素生理特性的基础上，延长其在体内的半衰期，改善其溶解度，在药学领域有良好的应用前景。