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公开(公告)号：CN106701724A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201611222644.0
申请日：2016-12-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种碱性果胶酶活性包涵体的制备及其应用，属于酶工程领域。本发明提供了一种碱性果胶酶突变体、表达该突变体的基因工程菌及应用该基因工程菌生产碱性果胶酶活性包涵体的方法。应用该方法制备的活性包涵体的酶活可达36.87±3.51U/mL，与对照相比提高了26倍。该碱性果胶酶活性包涵体易于分离及重复利用，性质稳定，在60℃下保温50min后仍然具有70％以上的酶活，具有重要的工业价值。
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公开(公告)号：CN106754848A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611222643.6
申请日：2016-12-27
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C07K2319/31 , C12Y402/02002
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的碱性果胶酶突变体，属于酶工程领域。本发明提供的碱性果胶酶突变体序列如SEQ ID NO.1所示，该突变体相对于现有的PGL而言，比酶活提高了3.4倍，在60℃的半衰期由原来的5.2min提高到19min，提高了3.6倍。本发明的碱性果胶酶可在碱性条件下催化通过反式消去作用聚半乳糖醛酸的α‑1,4糖苷键裂解，广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。
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公开(公告)号：CN116334169A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310286724.6
申请日：2023-03-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于液滴微流控和流式细胞仪联用的丝状真菌高通量筛选方法及应用，属于高通量筛选技术领域。本发明为了解决流式细胞术和微流体技术存在的技术缺陷，建立适应米曲霉等丝状真菌的体外筛选系统，同时加快异核体菌株后续的纯化分离，利用液滴微流控芯片生成均匀稳定的大液滴，为米曲霉孢子提供萌发、生长及产酶的封闭环境，同时将酶活力与荧光信号的强弱偶联，成功实现了高产淀粉酶米曲霉菌株的高通量筛选。此方法操作简便、筛选周期短、筛选效率高，极大地节省了人力、物力，为米曲霉菌的高通量筛选奠定基础。同时，此方法对丝状真菌的高通量筛选同样具有较高的参考价值。
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公开(公告)号：CN116121084A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211699644.5
申请日：2022-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种米曲霉基因组多位点编辑菌株的筛选方法，本发明建立了形态学基因(yA或wA)为筛选标记的多基因编辑系统。基于高效的遗传转化方法，在利用CRISPR/Cas9系统进行米曲霉多基因编辑时，可以通过颜色快速而精确地获得多基因编辑阳性菌株。且其双、三、四个基因的同时编辑效率分别为19.8％、9.9％、5.0％，为米曲霉多基因的快速编辑奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106754848B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201611222643.6
申请日：2016-12-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的碱性果胶酶突变体，属于酶工程领域。本发明提供的碱性果胶酶突变体序列如SEQ ID NO.1所示，该突变体相对于现有的PGL而言，比酶活提高了3.4倍，在60℃的半衰期由原来的5.2min提高到19min，提高了3.6倍。本发明的碱性果胶酶可在碱性条件下催化通过反式消去作用聚半乳糖醛酸的α‑1,4糖苷键裂解，广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109825495B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201910156087.4
申请日：2019-03-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量筛选红曲色素高产菌株的方法，属于高通量筛选技术领域。本发明利用固态发酵的方式表征液态发酵色素产量的高低，成功解决了孔板液态发酵溶氧偏低，菌丝发酵时容易长成球状而导致色价极低甚至发酵失败的问题。结合ARTP诱变技术、流式细胞仪高效分选技术，成功实现了高产红曲色素红曲霉的高通量快速筛选，且摇瓶验证效果极佳，且极大地节省了人力、物力，提高了筛选效率，为红曲霉菌的高通量筛选提供了一种有效的方法。
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公开(公告)号：CN106636049B
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201611222628.1
申请日：2016-12-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种分泌性能提高的碱性果胶酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供的碱性果胶酶突变体序列如SEQ ID NO.1所示。相对于现有的碱性果胶酶或碱性果胶酶突变体PGL‑S1而言，本发明的突变体PGL‑ADR的胞外酶活达919.88±82.64U/mL，相比于PGL‑S1提高了1.7倍(三次重复实验平均值)，且纯化后PGL‑ADR的比酶活为448.36U/mg，熔解温度提高了4.11℃，说明其热力学稳定性有明显提高。本发明的碱性果胶酶可在碱性条件下催化通过反式消去作用聚半乳糖醛酸的α‑1,4糖苷键裂解，广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。
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公开(公告)号：CN106701724B
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201611222644.0
申请日：2016-12-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种碱性果胶酶活性包涵体的制备及其应用，属于酶工程领域。本发明提供了一种碱性果胶酶突变体、表达该突变体的基因工程菌及应用该基因工程菌生产碱性果胶酶活性包涵体的方法。应用该方法制备的活性包涵体的酶活可达36.87±3.51U/mL，与对照相比提高了26倍。该碱性果胶酶活性包涵体易于分离及重复利用，性质稳定，在在60℃下保温50min后仍然具有70％以上的的酶活，具有重要的工业价值。
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公开(公告)号：CN109825495A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910156087.4
申请日：2019-03-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量筛选红曲色素高产菌株的方法，属于高通量筛选技术领域。本发明利用固态发酵的方式表征液态发酵色素产量的高低，成功解决了孔板液态发酵溶氧偏低，菌丝发酵时容易长成球状而导致色价极低甚至发酵失败的问题。结合ARTP诱变技术、流式细胞仪高效分选技术，成功实现了高产红曲色素红曲霉的高通量快速筛选，且摇瓶验证效果极佳，且极大地节省了人力、物力，提高了筛选效率，为红曲霉菌的高通量筛选提供了一种有效的方法。
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公开(公告)号：CN106636049A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611222628.1
申请日：2016-12-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种分泌性能提高的碱性果胶酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供的碱性果胶酶突变体序列如SEQ ID NO.1所示。相对于现有的碱性果胶酶或碱性果胶酶突变体PGL‑S1而言，本发明的突变体PGL‑ADR的胞外酶活达919.88±82.64U/mL，相比于PGL‑S1提高了1.7倍(三次重复实验平均值)，且纯化后PGL‑ADR的比酶活为448.36U/mg，熔解温度提高了4.11℃，说明其热力学稳定性有明显提高。本发明的碱性果胶酶可在碱性条件下催化通过反式消去作用聚半乳糖醛酸的α‑1,4糖苷键裂解，广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。
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