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公开(公告)号:CN118291540A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410395442.4
申请日:2024-04-02
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N7/01 , C12N15/66 , C07K16/08 , A61K39/235 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物基因工程疫苗领域,具体涉及禽腺病毒血清11型载体、采用该载体构建的重组病毒及其构建方法和应用。所述禽腺病毒血清11型载体为含有双选择标记筛选表达盒的FAdV‑11感染性克隆,所述禽腺病毒血清11型载体包含骨架载体p15A‑cm和FAdV‑11的病毒基因组序列,所述FAdV‑11的病毒基因组序列中的ORF0‑1‑2或ORF11基因缺失。本发明所建立的FAdV‑11反向遗传技术平台将为解析FAdV‑11的致病机理和防控FAdV‑11与其他病原的混合感染提供安全、有效的二联或多联疫苗,为研发基于FAdV‑11载体的多联多价疫苗提供技术支持。
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公开(公告)号:CN114213545B
公开(公告)日:2022-09-20
申请号:CN202111281147.9
申请日:2021-11-01
IPC: C07K19/00 , C07K14/08 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种新型水禽星状病毒重组融合蛋白、制备方法及其应用。本发明通过对新型水禽星状病毒CAP蛋白抗原表位密集区进行原核表达,得到免疫原性良好的重组蛋白,并用纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立新型水禽星状病毒抗体间接ELISA检测方法,与小鹅瘟病毒、禽流感病毒(H5+H7)、新城疫病毒、坦布苏病毒的阳性血清无交叉反应性,说明该方法具有良好的灵敏性和特异性;在临床样本检测时,该方法与Western Blot方法检测结果具有较好的一致性,能够为新型水禽星状病毒抗体阳性种水禽的监测及临床诊断提供一种有力的工具。
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公开(公告)号:CN114292823A
公开(公告)日:2022-04-08
申请号:CN202111550232.0
申请日:2021-12-17
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C07K14/125 , C12N9/24 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/64 , A61K39/17 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物基因工程疫苗领域,具体涉及携带基因VII型新城疫病毒F和HN基因的重组LaSota疫苗株及其构建方法和应用。所述重组LaSota疫苗株是用基因VII型NDV的HN基因和碱性蛋白酶裂解位点附近氨基酸序列突变的F基因分别替换LaSota疫苗株的HN和F基因后得到的。具体的,该重组LaSota疫苗株是在宿主菌中利用同源重组技术和反向筛选标记系统制备得到。该重组LaSota疫苗株为研制防控基因VII型NDV感染的新型、高效单联或多联的弱毒活苗和灭活疫苗提供制苗毒株和合适载体。
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公开(公告)号:CN105296506B
公开(公告)日:2020-03-20
申请号:CN201510744121.1
申请日:2015-11-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种人工合成的编码硫磺菌蘑菇凝集素N‑乙酰氨基乳糖胺结合域的LSL基因以及含有LSL基因的表达载体、宿主细胞,LSL基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。本发明还公开了一种以LSL作为融合标签的目标蛋白表达与纯化方法,该方法具体涉及LSL基因合成、含LSL基因和目标蛋白基因的表达载体构建、含LSL基因和蛋白酶基因的表达载体构建、融合蛋白的表达与纯化、LSL蛋白标签去除和目标蛋白纯化等步骤。本发明方法简单易行,实现了目标蛋白一步纯化,可获得高纯度的目标蛋白,降低了蛋白纯化成本,可广泛用于生物医药、兽药等领域的活性蛋白质以及生物制品行业中疫苗抗原的规模化制备,具有较高的实用价值。
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公开(公告)号:CN107576791A
公开(公告)日:2018-01-12
申请号:CN201710821996.6
申请日:2017-09-13
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒,所述猪胞内劳森菌ELISA检测试剂盒包括固相载体和包被在固相载体上的抗原,所述抗原为LsaA重组蛋白,所述LsaA重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该试剂盒具有灵敏度较高、特异性强、稳定性好等特点,而且,使用方便,操作简单,检测时间短,使用成本低,可用于猪群猪胞内劳森菌感染情况的血清学调查、抗体检测及疫苗免疫效果的评价等方面,适合大规模推广使用。
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公开(公告)号:CN107385110A
公开(公告)日:2017-11-24
申请号:CN201710652796.2
申请日:2017-08-02
Applicant: 河南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101 , C12Q2527/125 , C12Q2531/119 , C12Q2565/625
Abstract: 本发明公开了一种用于检测禽腺病毒血清4型的RPA引物,所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种用于检测禽腺病毒血清4型的RPA方法,该方法主要包括:引物合成、待测样品DNA提取、RPA扩增反应和RPA扩增产物分析等步骤。本发明的RPA引物特异性强,灵敏度高,检测结果准确。本发明的检测方法操作简单,稳定性好,为有效检测和鉴定鸡肝炎-心包积液综合征提供一种成本低、快速、特异的现场诊断方法。
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公开(公告)号:CN105695396A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201610286854.X
申请日:2016-05-03
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/071
CPC classification number: C12N5/0682 , C12N5/0625 , C12N2500/32 , C12N2500/34 , C12N2501/11 , C12N2501/33
Abstract: 本发明提供了一种鸡原代输卵管上皮细胞体外分离培养的方法,包括以下步骤:1)从产蛋鸡靠近卵泡的输卵管漏斗颈部无菌分离组织;2)使用胰酶和EDTA联合消化所述分离得到的组织,得到鸡输卵管上皮细胞;3)在37℃的温度下,孵育所述鸡输卵管上皮细胞2h;4)将所述步骤3)中孵育后的细胞进行细胞培养。所述的方法分离培养的原代鸡输卵管上皮细胞效果好,细胞生长速度快,状态良好;本发明消化时间短,结果良好,杂细胞少,避免成纤维细胞的污染,可得到健全的上皮样细胞群。
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公开(公告)号:CN105296506A
公开(公告)日:2016-02-03
申请号:CN201510744121.1
申请日:2015-11-04
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种人工合成的编码硫磺菌蘑菇凝集素N-乙酰氨基乳糖胺结合域的LSL基因以及含有LSL基因的表达载体、宿主细胞,LSL基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。本发明还公开了一种以LSL作为融合标签的目标蛋白表达与纯化方法,该方法具体涉及LSL基因合成、含LSL基因和目标蛋白基因的表达载体构建、含LSL基因和蛋白酶基因的表达载体构建、融合蛋白的表达与纯化、LSL蛋白标签去除和目标蛋白纯化等步骤。本发明方法简单易行,实现了目标蛋白一步纯化,可获得高纯度的目标蛋白,降低了蛋白纯化成本,可广泛用于生物医药、兽药等领域的活性蛋白质以及生物制品行业中疫苗抗原的规模化制备,具有较高的实用价值。
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公开(公告)号:CN102258777B
公开(公告)日:2012-09-26
申请号:CN201110180517.X
申请日:2011-06-30
Applicant: 河南农业大学禽病研究所
IPC: A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/14 , A61P31/20 , A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/235
Abstract: 本发明涉及一种用鸡胚源细胞系繁殖IBDV制备疫苗的方法。其主要包括:①制苗用细胞DF-1的传代与培养;②繁殖IBDV HQ株细胞毒种;③繁殖制苗用病毒液;④制苗用毒液的浓缩、灭活;⑤制备新-法、新-支-法、新-支-减-法联苗其它病毒液的制备与浓缩;⑥灭活联苗的配比、乳化与分装。本发明生产工艺简单、稳定、易操作;消除了常规疫苗生产中存在的生物安全隐患,克服了疫苗大量生产受制于鸡胚的供应,成本下降,批间差异降低,病毒毒价和疫苗质量提高,为疫苗行业利用悬浮培养技术大规模培养病毒液的革新奠定了基础;生产出的传染性法氏囊病灭活疫苗与联苗安全性好、免疫效力高,对IBDV强毒攻击具有完全的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN118308426A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410395658.0
申请日:2024-04-02
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N7/01 , C12N15/66 , C07K16/08 , A61K39/235 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物基因工程疫苗领域,具体涉及禽腺病毒血清8b型载体、采用该载体构建的重组病毒及其构建方法和应用。所述禽腺病毒血清8b型载体为含有双选择标记筛选表达盒的FAdV‑8b感染性克隆,所述禽腺病毒血清8b型载体包含骨架载体p15A‑cm和FAdV‑8b的病毒基因组序列,所述FAdV‑8b的病毒基因组序列中的ORF0‑1‑2或ORF19基因缺失。本发明所建立的FAdV‑8b反向遗传技术平台将为解析FAdV‑8b的致病机理和防控FAdV‑8b与其他病原的混合感染提供安全、有效的二联或多联疫苗,为研发基于FAdV‑8b载体的多联多价疫苗提供技术支持。
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