一种耐辐射奇球菌DNA甲基转移酶
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109439636A

    公开(公告)日:2019-03-08

    申请号:CN201811290498.4

    申请日:2018-10-31

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N9/10

    摘要: 本发明公开了一种耐辐射奇球菌DNA甲基转移酶。所述DNA甲基转移酶来源于耐辐射奇球菌,其具有典型的DNA甲基转移酶保守结构域,从N端至C端依次为含“FxGxG”保守序列的AdoMet结合域、目标序列识别域(TRD序列)及含“TSPPY”保守序列的催化域,属α型N4-Cytosine DNA甲基转移酶;其所识别的底物DNA保守序列为5’-CCGCGG-3’,甲基化修饰的位置在第二个胞嘧啶C的N4位,产生4mC类型的修饰碱基;其甲基化反应的最适温度在25-37℃之间。本发明所涉及的DNA甲基转移酶能够特异性识别“CCGCGG”保守基序并甲基化修饰其第二个胞嘧啶C的N4位,产生4mC修饰碱基,为N4-Cytosine DNA甲基转移酶。

    耐辐射奇球菌蛋白酶PprI的酶活性启动和提高方法

    公开(公告)号:CN104212782A

    公开(公告)日:2014-12-17

    申请号:CN201410262937.6

    申请日:2014-06-13

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N9/52 C12R1/01

    CPC分类号: C12N9/52

    摘要: 本发明公开了一种蛋白酶PprI的酶活性启动和提高方法。所述蛋白酶PprI的酶活性启动需要2.0-5.0mM的Mn2+离子。酶切反应缓冲液为150-250mMNaCl、10-50mMTris-HCl8.0、1mMDTT、2.0-5.0mMMnCl2。基因dr2574和dr2340启动子片段与底物DdrO结合后,可提高蛋白酶PprI的酶切活性,缩短反应时间,对该酶的今后利用具有积极贡献。

    一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌的制备及其应用

    公开(公告)号:CN114990044A

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210754642.5

    申请日:2022-06-30

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌的制备及其应用。将源自Dechloromonas agitata CKB的降解高氯酸盐的基因cld,pcrA,pcrB,pcrC,pcrD融入耐辐射奇球菌Deinococcus radiodurans R1基因组,构建出新的基因工程菌DR‑agitata。所得菌株兼具辐射抗性和高氯酸盐降解能力,对于改良含有高浓度高氯酸盐的高辐射区和火星表面等土壤具有重要的应用前景。

    DNA甲基转移酶及其可溶性异源表达和分离纯化方法

    公开(公告)号:CN109486779B

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN201811291824.3

    申请日:2018-10-31

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种DNA甲基转移酶及其可溶性异源表达和分离纯化方法。本发明首次从耐辐射奇球菌中分离纯化出具有DNA甲基转移酶活性并且在缓冲液中可溶的N4‑Cytosine DNA甲基转移酶M.DraR1;同时还提供了该甲基转移酶的核苷酸序列和其克隆表达及分离纯化方法。本发明所提供的克隆表达及分离纯化方法可为其它DNA甲基转移酶或者限制性内切酶的开发应用提供方法学参考,对开发新型分子生物学的工具酶具有重要指导意义。

    耐辐射球菌在制备提高母猪繁殖力的饲料添加剂中的应用

    公开(公告)号:CN101326960B

    公开(公告)日:2010-12-15

    申请号:CN200810063099.4

    申请日:2008-07-10

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: A23K1/16 A23K1/18

    摘要: 本发明提供了耐辐射球菌(Deinococcus radiodyrans)在制备提高母猪繁殖力的饲料添加剂中的应用,以及利用耐辐射球菌制备的饲料添加剂。本发明的饲料添加剂经多次饲养试验及实验室检测表明:产品性状稳定,具有安全高效特性,在母猪配合饲料的基础上添加0.1~0.5%本发明的饲料添加剂进行饲喂,可明显提高母猪产活仔数、哺乳期泌乳量、断奶窝重和产后发情率,具有显著的经济效益和社会效益,市场前景广阔。

    基于FRET的DNA损伤检测方法及功能蛋白

    公开(公告)号:CN115046973A

    公开(公告)日:2022-09-13

    申请号:CN202210657900.8

    申请日:2022-06-12

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: G01N21/64 C07K19/00 C12N9/50

    摘要: 本发明公开了一种基于FRET的DNA损伤检测方法及功能蛋白。利用耐辐射奇球菌中的阻遏蛋白DdrO,将黄色荧光蛋白eYFP和青色荧光蛋白eCFP分别连接于其N端和C端,构建出具有荧光能量转移特性的功能蛋白YDC;同时利用能特异性切割DdrO的耐辐射奇球菌损伤响应调控因子PprI蛋白,将PprI蛋白的91号位点的天冬氨酸(D)突变为丙氨酸(A)后得到蛋白PprI‑D91A,以降低其不存在单链DNA时的酶切活性;当体系中存在损伤产生的单链DNA时,PprI‑D91A能够快速地酶切YDC,在440 nm激发光的作用下,YDC发射光的480 nm峰升高且530 nm峰下降;同时还提供了YDC和PprI‑D91A的氨基酸序列以及检测DNA损伤的反应体系。本发明对开发新型分子生物学的工具具有重要指导意义。

    一种缺口DNA偏好性高保真聚合酶及其应用

    公开(公告)号:CN111849939A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010687851.3

    申请日:2020-07-16

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种缺口DNA偏好性高保真聚合酶及其应用。本发明公开了源自耐辐射奇球菌DNA聚合酶I的Klenow片段(KlenDr)的高保真聚合特性具有非3’-5’校正外切活性依赖的特点,且具有结合缺口DNA的偏好性,不同于现有的商用高保真聚合酶。由于KlenDr对缺口DNA底物特异的亲和性,不会切除上游引物的3’末端,且很少替换下游核苷酸链,结合其高保真聚合特性,本发明提出KlenDr在核酸扩增,DNA缺口填充等基因工程操作以及测序文库的构建中将具有十分广阔的应用前景。

    一种耐辐射奇球菌转录抑制因子

    公开(公告)号:CN104211788A

    公开(公告)日:2014-12-17

    申请号:CN201410262939.5

    申请日:2014-06-13

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C07K14/195

    CPC分类号: C07K14/195

    摘要: 本发明公开了一种耐辐射奇球菌转录抑制因子。所述转录抑制因子可以在体外结合耐辐射奇球菌内含RDRM位点的DNA损伤应急响应与修复基因启动子。结合反应缓冲液成分为100-200mMNaCl、10-50mMTris-HCl8.0、5-10mMMgCl2,反应温度为30℃。该转录抑制因子可以在体内抑制DNA损伤应急响应与修复基因的转录表达。本发明发现了一种迄今为止未曾被报道过的转录抑制因子,对DNA损伤修复的研究具有重要意义。

    一种植物源活性饲料添加剂及应用

    公开(公告)号:CN103907753A

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201410093246.8

    申请日:2014-03-13

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: A23K1/14 A23K1/16

    CPC分类号: Y02A40/78 Y02P60/877

    摘要: 本发明公开了一种植物源活性饲料添加剂及在制备畜禽饲料中的应用,所述饲料添加剂由发芽大豆粉、茶末培养物、肉桂挥发油和菊粉以质量比1:0.5~1:0.01~0.05:0.01~0.03组成;本发明所述植物源活性饲料添加剂用于制备畜禽饲料,能改善饲料的适口性,促进采食,促进畜禽生长;能提高畜禽免疫力和抗应激能力,减少畜禽疾病的发生率、有效缓解夏季的热应激;提高商品瘦肉率与改善肉质,明显降低粪污臭气排放,具有很好的市场前景。

    一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌的制备及其应用

    公开(公告)号:CN114990044B

    公开(公告)日:2024-04-23

    申请号:CN202210754642.5

    申请日:2022-06-30

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌的制备及其应用。将源自Dechloromonas agitata CKB的降解高氯酸盐的基因cld,pcrA,pcrB,pcrC,pcrD融入耐辐射奇球菌Deinococcus radiodurans R1基因组,构建出新的基因工程菌DR‑agitata。所得菌株兼具辐射抗性和高氯酸盐降解能力,对于改良含有高浓度高氯酸盐的高辐射区和火星表面等土壤具有重要的应用前景。