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公开(公告)号：CN116334049B
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202310357181.2
申请日：2019-11-20
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种人工设计的赖氨酰内切酶及编码序列和发酵方法。该人工设计的赖氨酰内切酶是将野生型赖氨酰内切酶中的第167位、第193位和第207位中的至少一个氨基酸进行如下突变得到：第167位的缬氨酸突变为亮氨酸或异亮氨酸；第193位的丝氨酸突变为丙氨酸或甘氨酸；第207位的甘氨酸突变为缬氨酸或亮氨酸。本发明提供的赖氨酰内切酶酶活高，可达到8000U/L以上，且具有稳定性高的优点。
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公开(公告)号：CN113969280B
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202010708371.0
申请日：2020-07-22
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/70
摘要： 本发明公开一种CHO细胞内源性冷诱导RNA‑结合蛋白启动子核心序列及其应用。该核心序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过生物信息学方法分析了CIRP基因翻译起始位点上游1500bp的DNA序列，选择置信度较高的基因片区作为假想启动子；设计引物，从CHO细胞基因组中分别克隆获得目标基因序列，再亚克隆入适合的载体中使其驱动目的基因在CHO细胞中表达，比较在37℃和32℃温度条件下不同启动子的活性，获得最优启动子序列，分析其元件组成，获得核心序列。具有该核心序列的启动子在亚生理低温条件下培养48小时后表达强度分别为CMV启动子的0.8倍和1.2倍，是37℃条件下表达强度的4.5倍和4.6倍。
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公开(公告)号：CN112824527B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN201911139993.X
申请日：2019-11-20
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种人工设计的赖氨酰内切酶及编码序列和发酵方法。该人工设计的赖氨酰内切酶是将野生型赖氨酰内切酶中的第167位、第193位和第207位中的至少一个氨基酸进行如下突变得到：第167位的缬氨酸突变为亮氨酸或异亮氨酸；第193位的丝氨酸突变为丙氨酸或甘氨酸；第207位的甘氨酸突变为缬氨酸或亮氨酸。本发明提供的赖氨酰内切酶酶活高，可达到8000U/L以上，且具有稳定性高的优点。
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公开(公告)号：CN110343668B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN201910668173.3
申请日：2019-07-23
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种敲除GS基因的CHO细胞株及其制备方法与应用。该CHO细胞株无GS蛋白表达且无嘌呤霉素抗性、无Cas9基因及sgRNA序列整合入细胞基因组中。本发明利用CRISPR/Cas9方法敲除GS基因，通过优化筛选方法，得到该CHO细胞株。本发明提供的制备方法能快速实现CHO细胞GS‑/‑编辑，筛选出GS基因敲除且无嘌呤霉素抗性、无Cas9基因及sgRNA序列整合的CHO GS‑/‑细胞株。该细胞株应用于重组蛋白表达，无需MSX介导的基因扩增过程，大大加快了高产细胞株筛选效率。
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公开(公告)号：CN112760342A
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201911070125.0
申请日：2019-11-05
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/65 , C12N5/10 , C12Q1/02
摘要： 本发明公开一种用于GLP‑1及其类似物活性测定的慢病毒载体及细胞株。该载体包括复制缺陷型慢病毒载体骨架、CRE‑Mini promoter元件和编码GFP的基因。本发明通过将该重组载体与表达RFP的重组载体分别通过病毒液形式感染表达GLP‑1R的细胞株，筛选分离，得到用于GLP‑1及其类似物活性测定的细胞株。本发明采用GFP作为报告基因，检测GLP‑1及其类似物活性时，无需裂解细胞等繁琐步骤，可直接检测活细胞，从而检测成本低，不需要专门配套检测试剂盒；所得到的细胞株拥有内参RFP矫正数据，检测结果更准确，稳定可信；所构建的细胞株检测药物范围广，通用性好。
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公开(公告)号：CN112759653A
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201911075149.5
申请日：2019-11-06
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种PKEK融合蛋白及其制备方法与应用。该融合蛋白通过将若干柔性连接肽与PKEK依次串联构成；其在微生物细胞内以包涵体蛋白的形式表达，同时通过将若干柔性连接肽与美白多肽PKEK依次串联构成融合蛋白，能够有效减少酶切过程中产生的错切杂质，进而高效获得高纯度美白多肽PKEK，且纯度可达95.4％。此外，利用本申请所述基因工程技术生产美白多肽PEKE的制备方法，在12h内即可大量获得PKEK融合蛋白包涵体，且表达量最高可达41.5g/L，工艺简单高效且易于放大，有利于工业化生产。
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公开(公告)号：CN107308020B
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN201710545139.8
申请日：2017-07-06
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
IPC分类号： A61K8/64 , A61Q19/00 , A61K38/08 , A61K38/07 , A61P17/00 , A61K8/34 , A61K8/37 , A61K8/42 , A61K8/44 , A61K8/46 , A61K8/67 , A61K8/63 , A61K8/23 , A61K47/02 , A61K47/10 , A61K47/18 , A61K47/20 , A61K47/22 , A61K47/46 , A61K8/35
摘要： 本发明公开了一种稳定的多肽组合物及其应用。该多肽组合物由含巯基多肽、难溶于水的多肽、增溶剂、稳定剂、防腐剂、水和pH值调节剂组成。本发明是本发明发明人意外发现的成果：稳定剂和防腐剂同时存在时，很好地解决了含巯基多肽和难溶性多肽混合水溶液原料放置过程中易产生杂质的问题，制备出的多肽组合物原料质量好、对光稳定、可在室温下长期放置，易于制备后续制剂。
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公开(公告)号：CN108338934A
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201710057895.6
申请日：2017-01-23
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种用于眼部护理的多肽组合物及其应用。该多肽组合物包含以下成分：乙酰基六肽-8、乙酰基四肽-5、促进胶原蛋白生成的多肽、透皮吸收促进剂、保湿剂、防腐剂；其中透皮吸收促进剂由如下成分组成：龙脑、精油、乳化剂、乙醇、水。本发明中，龙脑和精油复合形成的透皮吸收促进剂在保湿剂存在的情况下有效地促进生物活性肽的吸收，极大发挥了生物活性肽的作用。从而，本发明提供的用于眼部护理的多肽组合物具有去除黑眼圈、消除水肿、去皱和紧致的作用。
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公开(公告)号：CN103275210A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310256421.6
申请日：2013-06-25
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种脂肪酸单酰化胰岛素的色谱纯化方法。该色谱纯化方法利用中低压色谱系统对脂肪酸单酰化胰岛素进行分离，使用有机聚合物反相色谱材料为固定相，洗脱的流动相为含有至少一种可与水混溶的有机溶剂和至少一种缓冲剂物质、pH值为2～4。该色谱纯化方法步骤简单，可以一步将样品从初始纯度50～60%提高到纯度为98%，且易于放大，经济成本低。
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公开(公告)号：CN101041693A
公开(公告)日：2007-09-26
申请号：CN200710026759.7
申请日：2007-02-06
申请人： 珠海联邦制药股份有限公司
摘要： 本发明涉及人胰高血糖素样肽－1(GLP－1)类似物，具体本发明涉及GLP－1改构多肽，该多肽在体内有促进胰岛素分泌，降低血糖的作用，可用于治疗II型糖尿病。本发明提供的一组GLP－1类似物多肽序列，该多肽具有式I的通式：HX1EGTFTSDX2SSYLEGQAAKX3FIX4WLVKGR(式I)，其中，X1：Ala，Gly或Val，X2：Val，Leu或Ala，X3：Leu或Ser，X4：Glu或Asn。体内试验证明，本发明多肽在体内半衰期更长，能刺激胰岛素的产生，降低血糖值，优于天然GLP－1的功效。
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