一种农药残留检测卡及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN117554358A

    公开(公告)日:2024-02-13

    申请号:CN202311238195.9

    申请日:2023-09-25

    申请人: 郑州大学

    IPC分类号: G01N21/78 G01N21/77

    摘要: 本发明属于农药残留检测技术领域,具体涉及一种农药残留检测卡及其制备方法与应用。本发明采用聚乙烯醇溶解膜来调控抑制反应、显色反应的发生,确保乙酰胆碱酯酶先与待测液发生抑制反应后再进行显色反应以提高农药残留检测卡的灵敏度。且本发明采用数字化方式制备农药残留检测卡,采用该制备方法能够制备出高通量、强稳定性的农药残留检测卡。同时本发明通过大量试验数据证明该农药残留检测卡具有操作简单、快捷,灵敏度高、重现性好、稳定性强等优势,适用于检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量。

    红林蚁AChE基因、红林蚁AChE及其制备方法

    公开(公告)号:CN104593393B

    公开(公告)日:2017-07-07

    申请号:CN201510004412.7

    申请日:2015-01-06

    申请人: 郑州大学

    IPC分类号: C12N15/55 C12N9/18 C12N15/81

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种红林蚁乙酰胆碱酯酶(AChE)基因、所编码的红林蚁乙酰胆碱酯酶(AChE)、制备该酶的方法。红林蚁AChE基因及所编码的红林蚁AChE,其碱基序列及氨基酸序列如序列表所示。该酶的制备方法包括以下步骤:(1)构建并PCR扩增红林蚁AChE基因全序列;(2)构建红林蚁AChE全序列构建真核重组表达载体;(3)转化毕赤酵母宿主细胞,培养,诱导表达;(4)纯化。本发明通过通过实验证明,所制备的红林蚁AChE相较于现有的果蝇AChE具有更高的活性和灵敏度,因而在未来的农药检测试剂制备技术领域具有较好的应用前景。

    红林蚁AChE基因、红林蚁AChE及其制备方法

    公开(公告)号:CN104593393A

    公开(公告)日:2015-05-06

    申请号:CN201510004412.7

    申请日:2015-01-06

    申请人: 郑州大学

    IPC分类号: C12N15/55 C12N9/18 C12N15/81

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种红林蚁乙酰胆碱酯酶(AChE)基因、所编码的红林蚁乙酰胆碱酯酶(AChE)、制备该酶的方法。红林蚁AChE基因及所编码的红林蚁AChE,其碱基序列及氨基酸序列如序列表所示。该酶的制备方法包括以下步骤:(1)构建并PCR扩增红林蚁AChE基因全序列;(2)构建红林蚁AChE全序列构建真核重组表达载体;(3)转化毕赤酵母宿主细胞,培养,诱导表达;(4)纯化。本发明通过实验证明,所制备的红林蚁AChE相较于现有的果蝇AChE具有更高的活性和灵敏度,因而在未来的农药检测试剂制备技术领域具有较好的应用前景。

    一种细胞膜纳米囊泡过滤收集装置

    公开(公告)号:CN112063503A

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN202010986001.3

    申请日:2020-09-18

    申请人: 郑州大学

    IPC分类号: C12M1/12 C12M1/00 C12N5/09

    摘要: 本申请属于医疗设备技术领域,具体涉及一种细胞膜纳米囊泡过滤收集装置专利申请事宜。该装置由膜过滤系统、循环反应系统和囊泡收集系统组成;膜过滤系统包括一个用于盛放过滤膜件的过滤罐体,和罐体内部设置的可拆卸的过滤膜件;循环反应系统包括:通过连接管道分别与过滤罐上原液进口、溢液出口连接的循环反应器,同时循环反应器与原液进口的连接管道上设有压滤动力装置;囊泡收集系统包括通过连接管道与囊泡滤出口连接的囊泡盛放容器。采用本申请所提供的细胞膜纳米囊泡过滤收集装置,可以用于不同来源囊泡(例如脂质体、红细胞、干细胞等)制备,具有囊泡产量、产率较高优点,对于确保后续应用具有较好的技术意义。

    重组乙酰胆碱酯酶在甲醇毕赤酵母中表达的中试发酵方法

    公开(公告)号:CN105296444B

    公开(公告)日:2020-02-18

    申请号:CN201510878108.5

    申请日:2015-12-04

    申请人: 郑州大学

    IPC分类号: C12N9/18 C12R1/84

    摘要: 本发明公开了一种重组乙酰胆碱酯酶在甲醇毕赤酵母中表达的中试发酵工艺:首先将活化的重组毕赤酵母菌株进行培养,制得发酵工作种子液,然后将该其转接到基础盐培养基中,氨水或磷酸调整发酵体系pH后接种,并加入适量微量元素溶液,生长至一定阶段后,加入甘油与微量元素的混合溶液,最后流加含微量元素的甲醇溶液进行蛋白诱导发酵,发酵过程中温度持续维持在29℃,DO维持在20%以上,甲醇诱导120h,整个发酵过程结束。本发明的发酵工艺简单,操作方便,蛋白可溶性表达且表达量高,酶活性高,但蛋白表达成本却较低。本发明首次在酵母表达系统内对乙酰胆碱酯酶进行了大规模的发酵罐表达,为AChE的大规模生产和最终应用奠定了基础。

    重组乙酰胆碱酯酶在甲醇毕赤酵母中表达的中试发酵工艺

    公开(公告)号:CN105296444A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201510878108.5

    申请日:2015-12-04

    申请人: 郑州大学

    IPC分类号: C12N9/18 C12R1/84

    摘要: 本发明公开了一种重组乙酰胆碱酯酶在甲醇毕赤酵母中表达的中试发酵工艺:首先将活化的重组毕赤酵母菌株进行培养,制得发酵工作种子液,然后将该其转接到基础盐培养基中,氨水或磷酸调整发酵体系pH后接种,并加入适量微量元素溶液,生长至一定阶段后,加入甘油与微量元素的混合溶液,最后流加含微量元素的甲醇溶液进行蛋白诱导发酵,发酵过程中温度持续维持在29℃,DO维持在20%以上,甲醇诱导120h,整个发酵过程结束。本发明的发酵工艺简单,操作方便,蛋白可溶性表达且表达量高,酶活性高,但蛋白表达成本却较低。本发明首次在酵母表达系统内对乙酰胆碱酯酶进行了大规模的发酵罐表达,为AChE的大规模生产和最终应用奠定了基础。