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42 条记录 (耗时 0.014 秒)

    Verfahren zur Isolierung von Mutanten, mutierten Genen sowie der entsprechenden Wildtyp-Gene
    13.
    发明公开
    Verfahren zur Isolierung von Mutanten, mutierten Genen sowie der entsprechenden Wildtyp-Gene 失效
    分离突变体，突变基因和相应的野生型基因的方法

    公开(公告)号：EP0243856A3

    公开(公告)日：1989-12-06

    申请号：EP87105865.7

    申请日：1987-04-22

    申请人： HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT

    发明人： Wohlleben, Wolfgang, Dr. ,  Muth, Günter ,  Pühler, Alfred, Prof. Dr.

    IPC分类号： C12N15/00

    CPC分类号： C12N15/102 ,  C12N15/00 ,  C12N15/76 ,  C12N15/90

    摘要： Mutanten lassen sich sehr einfach dadurch gewinnen, daß man aus dem zu mutierenden Stamm die gesamte DNA isoliert, diese nach Spalten in kleine Fragmente in ein temperatursensitives Plasmid mit einem weiteren Selektionsmarker integriert, die so erhaltene Hybridplasmid-Population in den Ausgangsstamm transformiert, durch Selektion auf den Marker die Transformanten selektiert, durch Erhöhung der Temperatur über den Schwellenwert des temperatursensitiven Plasmids die Hybridplasmide eliminiert und durch erneute Selektion auf den Marker die Mutanten selektiert. Da auf diese Weise das mutierte Gen markiert ist, kann dieses leicht isoliert und durch Hybridisierung aus einer Genbank des Wildtyps das nicht mutierte Gen isoliert werden.

    Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte
    14.
    发明公开
    Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte 失效
    Verfahren zur Selektion grosser DNA-Abschnitte。

    公开(公告)号：EP0334283A2

    公开(公告)日：1989-09-27

    申请号：EP89105013.0

    申请日：1989-03-21

    申请人： HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT

    发明人： Wohlleben, Wolfgang, Dr. ,  Muth, Günter, Dr. ,  Pühler, Alfred, Prof. Dr.

    IPC分类号： C12N15/10

    CPC分类号： C12N15/76 ,  C12N15/1034 ,  C12N15/90

    摘要： DNA-Abschnitte aus Mutanten lassen sich sehr einfach dadurch gewinnen, daß man aus dem zu mutierenden Stamm die gesamte DNA isoliert, diese nach Spalten in kleine Fragmente in ein temperatursensitives Plasmid mit einem weiteren Selektionsmarker, der in E. coli selektierbar ist, integriert, die so erhaltene Hybridplasmid-Population in den Ausgangsstamm transformiert, durch Selektion auf den Marker die Transformanten selektiert, durch Erhöhung der Temperatur über den Schwellenwert des temperatursensitiven Plasmids die Hybridplasmide eliminiert und durch erneute Selektion auf den Marker die Mutanten selektiert. Legt man nun mit der DNA dieser Mutanten eine Cosmid-Genbank an, so erhält man durch Selektion auf den eingeführten, in E. coli selektionierbaren Marker und den Cosmid-eigenen Marker direkt Cosmide, die das mutierte Gen enthalten.

    摘要翻译： 从突变体的DNA片段可以非常直观地获得，通过从待突变的菌株分离总DNA，将其切成小片段，并将其与在大肠杆菌中可选择的另一个选择标记整合到温度敏感质粒中，转化杂交体 以这种方式获得的质粒群体进入起始菌株，通过选择标记选择转化体，通过将温度升高到高于温度敏感质粒的阈值来消除杂交质粒，并通过重新选择标记来选择突变体。 通过选择已经引入并可在大肠杆菌中选择的标记物和粘粒 - 内在标记，直接在含有突变基因的粘粒中构建具有这些突变体的DNA的粘粒基因库。