公开(公告)号：US20100311116A1

公开(公告)日：2010-12-09

申请号：US12478558

申请日：2009-06-04

申请人： Florian M. Wurm ,  Markus Hildinger ,  Maria De Jesus ,  Mattia Matasci ,  David Hacker

发明人： Florian M. Wurm ,  Markus Hildinger ,  Maria De Jesus ,  Mattia Matasci ,  David Hacker

IPC分类号： C12N15/87 ,  C40B50/06 ,  C12P21/00

CPC分类号： C12P21/02 ,  C12N9/22 ,  C12N15/85 ,  C12N2800/40 ,  C12N2800/90

摘要： The present invention provides a novel method for the fast generation of high expression stable cell lines for the production of recombinant proteins with high efficacy of stable integration while using low selective pressure for only a short period of time. The method uses transiently expressed piggybac transposase to mediate stable integration of a transgene of interest flanked by the PB transposon termini.

摘要翻译： 本发明提供了一种用于快速产生高表达稳定细胞系的新方法，用于生产具有稳定整合的高效力的重组蛋白质，同时在短时间内使用低选择压力。 该方法使用瞬时表达的piggybac转座酶介导侧翼为PB转座子末端的感兴趣的转基因的稳定整合。

公开(公告)号：US20080145893A1

公开(公告)日：2008-06-19

申请号：US11309732

申请日：2006-09-17

申请人： Markus Hildinger ,  Sarah Wulhfard ,  Gaurav Backliwal ,  David Hacker ,  Maria De Jesus ,  Florian Maria Wurm

发明人： Markus Hildinger ,  Sarah Wulhfard ,  Gaurav Backliwal ,  David Hacker ,  Maria De Jesus ,  Florian Maria Wurm

IPC分类号： C12P21/06 ,  C12N15/09 ,  C12N5/06 ,  C07K14/50

CPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/67 ,  C12N2500/36 ,  C12N2500/40 ,  C12N2500/90 ,  C12N2500/92 ,  C12N2501/113 ,  C12N2510/02

摘要： Recombinant proteins are of great commercial interest. Yet, most current production methods in mammalian cells involve the time- and labor-consuming step of creating stable cell lines. Production methods based on transient gene expression are advantageous in terms of speed and versatility, yet, thus far, those methods have not shown the specific productivity, batch yield and volumetric yield to be an economic alternative to stable cell lines. The inventors improved on the methodology of transient transfection and achieved commercially relevant yields in terms of specific productivity (exceeding 35 pg per cell per day), batch yield (exceeding 700 mg/l) and volumetric yield.

摘要翻译： 重组蛋白具有很大的商业利益。 然而，哺乳动物细胞中目前的大多数生产方法涉及创建稳定细胞系的耗时和耗时的步骤。 基于瞬时基因表达的生产方法在速度和多功能性方面是有利的，但是到目前为止，这些方法尚未显示比生产力，分批产量和体积产量作为稳定细胞系的经济替代物。 本发明人改进了瞬时转染的方法，并且在比生产率（每个细胞每天超过35pg），批产量（超过700mg / l）和体积产量方面获得了商业上相关的产量。

公开(公告)号：US20090103772A1

公开(公告)日：2009-04-23

申请号：US12227184

申请日：2007-04-24

申请人： Reinhard Baumfalk ,  Oscar-Werner Reif ,  Florian Wurm ,  Maria De Jesus ,  Martin Jordan ,  Matthieu Stettler ,  Stefan Obermann

发明人： Reinhard Baumfalk ,  Oscar-Werner Reif ,  Florian Wurm ,  Maria De Jesus ,  Martin Jordan ,  Matthieu Stettler ,  Stefan Obermann

IPC分类号： G06K9/00

CPC分类号： G01N21/0303 ,  G01N2021/0367

摘要： The invention relates to a device for detecting a sample in a longitudinal sample container (10), comprising a sample container holder (30) for holding the sample container in a housing. Said sample container holder comprises a side viewing window in the region of at least one longitudinal side of the sample container, and a front viewing window (35) in the region at least one front side of the sample container. Said device also comprises a first illumination arrangement for illuminating the sample container through the front viewing window, a second illumination arrangement for illuminating the sample container through the side viewing window, and an imaging photodetector for detecting a first image of the sample illuminated by means of the first illumination arrangement, and a second image of the sample illuminated by means of the second illumination arrangement. Said detection takes place through the side viewing window. Said device further comprises a digital data processing unit for overlaying the first and second images and for representing the resulting overlay image on a display device connected to the data processing unit.

摘要翻译： 本发明涉及一种用于检测纵向样品容器（10）中的样品的装置，包括用于将样品容器保持在壳体中的样品容器保持器（30）。 所述样品容器保持器包括在样品容器的至少一个纵向侧区域中的侧视窗和位于样品容器的至少一个正面的区域中的前视窗（35）。 所述装置还包括用于通过前视窗照亮样本容器的第一照明装置，用于通过侧视窗照射样本容器的第二照明装置，以及用于检测通过以下方式照射的样本的第一图像的成像光电检测器： 第一照明装置和通过第二照明装置照亮的样本的第二图像。 所述检测通过侧视窗进行。 所述设备还包括数字数据处理单元，用于覆盖第一和第二图像，并用于在连接到数据处理单元的显示设备上表示所得覆盖图像。

公开(公告)号：US20090263848A1

公开(公告)日：2009-10-22

申请号：US12227186

申请日：2007-04-24

申请人： Stefan Obermann ,  Reinhard Baumfalk ,  Oscar-Werner Reif ,  Florian Wurm ,  Maria De Jesus ,  Matthieu Stettler ,  Martin Jordan

发明人： Stefan Obermann ,  Reinhard Baumfalk ,  Oscar-Werner Reif ,  Florian Wurm ,  Maria De Jesus ,  Matthieu Stettler ,  Martin Jordan

IPC分类号： C12Q1/02

CPC分类号： G01N33/58 ,  G01N1/30 ,  G01N15/042 ,  G01N33/5005 ,  Y10T436/25375

摘要： The invention relates to a method for determining the viability of cells in cell cultures, said method comprising the steps of: colouring the sample with a dye which can penetrate into individual cells depending on the viability of the latter, determining the proportions of cells which are coloured to differing extents. The invention is distinguished by virtue of the fact that a cell suspension of the coloured cells is centrifuged as a sample in a sample vessel (10) until the solid content present in the sample has settled as a compressed cell cake (13), and, in order to determine the proportions, the volumes of differently coloured sections (131, 132, 133) of the compressed cell cake (13) are determined as a measure of the proportions of cells of different viability.

摘要翻译： 本发明涉及一种用于确定细胞培养物中细胞存活率的方法，所述方法包括以下步骤：根据染色体的活力来染色样品，所述染料可渗透到单个细胞中，确定细胞的比例 彩色到不同的程度。 本发明的区别在于，将着色细胞的细胞悬浮液作为样品在样品容器（10）中离心直到样品中存在的固体含量作为压缩细胞饼（13）沉降， 为了确定比例，压缩细胞饼（13）的不同颜色的部分（131,132,133）的体积被确定为不同存活力的细胞比例的量度。