一种菊糖蔗糖酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN110396512A

    公开(公告)日:2019-11-01

    申请号:CN201910682366.4

    申请日:2019-07-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种菊糖蔗糖酶突变体及其应用,属于酶工程领域。本发明首先对微生物Lactobacillus gasseri DSM 20604来源的菊糖蔗糖酶进行截断处理,在5’端和3’端分别截断411和702个核苷酸,得到氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的中间序列,然后在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的基础上,将第288位的天冬氨酸Asp突变为谷氨酸Glu后得到突变体酶D288E,突变体酶D288E的总酶活为326U/mg,与野生菊糖蔗糖酶(248U/mg)相比提高了31.45%,这一发现对于工业化制备菊糖具有重要的研究价值。

    一种合成双果糖酐III的方法

    公开(公告)号:CN105506034B

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201610053213.X

    申请日:2016-01-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高效合成双果糖酐III的方法,先使用菊糖蔗糖酶将蔗糖转化为菊糖,不分离聚糖,再使用菊糖果糖转移酶转化菊糖合成功能性双糖双果糖酐III。本发明的工艺简单,效率高,菊糖合成双果糖酐III的转化率能够达到40%‑54%。为了获得较为纯的双果糖酐III,用酵母除去反应液中的小分子单糖,最终所获得的较为纯的双果糖酐III容易分离纯化,具有广阔的市场应用前景。

    一株肉桂链霉菌及其生产磷脂酶D的方法

    公开(公告)号:CN107090416A

    公开(公告)日:2017-08-25

    申请号:CN201710280902.9

    申请日:2017-04-26

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12R1/465 C12N9/16 C12Y301/04004

    Abstract: 一株肉桂链霉菌及其生产磷脂酶D的方法,属于食品生物技术领域。本发明提供一株新的链霉菌,其可以生产磷脂酶D,其命名为肉桂链霉菌(Streptomyces cinnamoneus)SK43.002,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2017010。本发明对该肉桂链霉菌进行斜面、种子、发酵三级培养;从发酵液中分离纯化得到磷脂酶D酶粉。本发明利用链霉菌生产得到磷脂酶D工艺简单,成本较低;得到的磷脂酶D酶活较高,稳定性好,可以广泛应用在食品、生物等领域,具有广阔的市场前景。

    一种超声辅助双水相萃取白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105039426A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510351952.2

    申请日:2015-06-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种超声辅助双水相萃取白藜芦醇的方法,属于生物转化技术及植物中天然产物有效成分提取技术领域。本发明通过在粉碎的虎杖粉中加入β-葡萄糖苷酶,酶解后以乙醇/硫酸铵双水相体系作为提取剂,采用超声辅助双水相体系萃取酶解液中的白藜芦醇,取上相即得白藜芦醇粗产品,可直接进行后续纯化操作。本发明分相迅速,回收率高;多过程集成,双水相萃取既达到了纯化目的,又浓缩了料液,同时与体系中的多糖分离;所用双水相体系低毒,且利于回收;还易于工艺放大和连续操作,与后续纯化工序可直接相连,无需进行特殊处理。

    基于D-丙氨酸缺陷型筛选标记的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌的构建方法

    公开(公告)号:CN104894047A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510294626.2

    申请日:2015-06-02

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 基于D-丙氨酸缺陷型筛选标记的表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌的构建方法,属于酶基因工程技术领域。以枯草芽孢杆菌1A751为出发菌株,敲除其染色体上D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到D-丙氨酸缺陷型的1A751(dal-);将梭状芽胞杆菌ATCC?35704?的DPE酶基因作亲本,在其上游融合P43启动子构建成P43-DPE,将其构建至质粒pUB110?(NCBI-Gene?ID:9507338)中得到pUB-P43-DPE,将pUB-P43-DPE上的抗生素抗性基因Kan和Blm用dal替代,构建成pUB-P43-DPE-dal;再转化进1A751(dal-)中,得重组枯草芽孢杆菌1A751-pUB-P43-DPE-dal,命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus?subtilis)SK38.001,保藏编号CCTCC?NO:?M2015257。其发酵液总酶活达16U/mL,具有重要的工业应用价值。

    一种基于固定化载体的β-半乳糖苷酶的固定化方法

    公开(公告)号:CN104774831A

    公开(公告)日:2015-07-15

    申请号:CN201510196113.8

    申请日:2015-04-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于固定化载体的β-半乳糖苷酶的固定化方法,属于生物工程技术领域。本发明步骤是:(1)β-半乳糖苷酶的制备;(2)氨基功能化磁性Fe3O4载体的制备;(3)氨基功能化磁性Fe3O4材料固定β-半乳糖苷酶。本发明具体制备方法包括:以FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O为铁源,氨水为碱,CH3COONa为阴离子表面活性剂,1,6-己二胺为氨基功能化试剂,利用化学共沉淀方法,一步合成表面带有氨基官能团的功能性磁性载体材料。借助该材料表面修饰的氨基官能团及良好的磁性,将其应用于β-半乳糖苷酶的固定化。

    一种菊糖果糖转移酶基因表达序列

    公开(公告)号:CN104087604A

    公开(公告)日:2014-10-08

    申请号:CN201410327010.6

    申请日:2014-07-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种菊糖果糖转移酶基因表达序列,属于食品生物技术领域。本发明涉及以微生物ArthrobacterchlorophenolicusSK33.001基因组为模版,设计一对特异性引物P1和P2,应用PCR技术扩增了特异性片段,测序后得到了全新的长度为1335bp的菊糖果糖转移酶基因核苷酸序列SEQIDNO:1和它对应的氨基酸序列SEQIDNO:2。获得的1335bp的核苷酸序列SEQIDNO:1可进一步用于基因克隆和异源表达,表达获得的菊糖果糖转移酶在较高的温度下具有较优的活性和稳定性,应用前景广泛。

    一种以高浓度磷酸二氢钾为缓冲盐的发酵生产γ-氨基丁酸的方法

    公开(公告)号:CN103509832A

    公开(公告)日:2014-01-15

    申请号:CN201310486474.7

    申请日:2013-10-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种以高浓度磷酸二氢钾为缓冲盐的发酵生产γ-氨基丁酸的方法,属于微生物发酵工程领域。本发明以一株产γ-氨基丁酸的乳酸乳球菌(LactococcuslactisSYFS1.009)为菌种,在含高浓度的磷酸二氢钾培养基中培养,其成份为:葡萄糖10~40g/L,酵母膏20~50g/L,磷酸二氢钾20~50g/L,谷氨酸钠5~20g/L,MgSO40~3g/L,MnSO4•H2O0~3g/L,吐温-800~5mL/L。在此培养基的基础上,流加氨水或氢氧化钠调控发酵液pH,并在发酵过程中添加一定量的葡萄糖和谷氨酸钠,培养40~60h即可得含高浓度γ-氨基丁酸的发酵液。本发明所用培养基及方法安全可靠、生产周期短,以磷酸二氢钾为缓冲盐及流加氨水或氢氧化钠调节发酵液pH,可有效缓解乳酸对乳酸乳球菌的抑制作用。

    一株产赤藓糖醇的菌株及用其生产赤藓糖醇的方法

    公开(公告)号:CN102703334B

    公开(公告)日:2013-10-30

    申请号:CN201210187067.1

    申请日:2012-06-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一株产赤藓糖醇的菌株及用其生产赤藓糖醇的方法,属于食品生物技术领域。本发明方法提供了一株产赤藓糖醇的菌株,其分类命名为假丝酵母(Candidasp.)SK25.001,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2011477。用其生产赤藓糖醇的方法包括:(a)在含葡萄糖的发酵培养基中利用该菌种进行发酵;(b)从所得发酵液中分离纯化赤藓糖醇。用本发明提供的假丝酵母(Candidasp.)CCTCC NO:M 2011477菌株,在以葡萄糖为碳源的发酵培养基中经4d的发酵,残糖可达到10%以下,发酵液中的赤藓糖醇浓度达到10%-13%,为赤藓糖醇的工业化制备提供了新的方法。

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