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公开(公告)号：CN104402988A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410756203.3
申请日：2014-12-12
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C07K14/54
Abstract: 本发明提供了一种人白细胞介素-29(hIL-29)成熟肽第33位赖氨酸定点突变为精氨酸的重组hIL-29变异体(rhIL-29L)及其制备方法，属于生物工程领域。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工设计合成hIL-29成熟肽的上下游引物和定点突变引物；2)用上下游引物及突变引物对hIL-29成熟肽编码基因第98位碱基进行定点突变；3)构建含hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，转化毕赤酵母，获得重组酵母工程菌；4)培养重组酵母工程菌，于培养液添加1.5％(v/v)甲醇诱导其表达hIL-29变异体；5)采用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析从培养液上清纯化hIL-29变异体。本发明构建的重组酵母工程菌可进行高密度培养并分泌表达rhIL-29L，适用于工业化制备rhIL-29成熟肽变异体。
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公开(公告)号：CN101982773B
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201010281374.7
申请日：2010-09-15
Applicant: 江南大学
IPC: G01N33/533
Abstract: 本发明涉及免疫化学技术领域的一种庆大霉素液相芯片探针的制备方法，其通过采用碳化二亚胺法，以甘氨酸、3-氨基丙酸或4-氨基丁酸修饰羧基化聚苯乙烯荧光微球表面，再通过碳化二亚胺法将庆大霉素分子标记到荧光微球表面的方式，制成庆大霉素液相芯片探针。该庆大霉素液相芯片探针的制备方法简便操作，稳定性好，且产物具有优良的庆大霉素靶向性，可为庆大霉素的液相芯片测试技术开发提供了更为方便的途径。
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公开(公告)号：CN103224952A
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201310028218.3
申请日：2013-01-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种人白细胞介素29成熟肽第33位赖氨酸、35位精氨酸定点突变为精氨酸、赖氨酸的变异体(hIL-29Z)及其制备方法，属于生物工程领域。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工设计合成定点突变引物；2)用突变引物对hIL-29成熟肽编码基因第98位和104位碱基进行定点突变；3)构建含hIL-29变异体编码基因的重组真核表达载体，转化毕赤酵母，获得重组酵母工程菌；4)培养重组酵母工程菌，于培养液添加1.5％(v/v)甲醇诱导其表达hIL-29变异体；5)采用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析从培养液上清纯化hIL-29变异体。本发明构建的酵母工程菌可进行高密度培养并分泌表达第33位赖氨酸、35位精氨酸突变为精氨酸、赖氨酸的hIL-29变异体，适用于工业化制备人白细胞介素29成熟肽变异体。
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公开(公告)号：CN101413958B
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN200810234131.0
申请日：2008-11-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种用亲和素化的荧光量子标记的免疫印迹定量检测蛋白的方法，属于免疫检测技术领域。本发明首先将待测蛋白跑电泳，跑完电泳的凝胶进行半干式western blotting蛋白转移，将凝胶中的待测蛋白转移至聚偏二氟乙烯膜PVDF上，然后对转移完的PVDF膜进行封闭，加抗待测蛋白的一抗反应，加生物素标记的二抗反应，再加入亲和素标记的荧光量子团进行反应，最后进行结果鉴定；本发明在传统免疫印迹分析的基础上引入亲和素化的荧光量子点，简化了操作步骤，灵敏度很高，利于进行微量目标蛋白的检测分析。本法将微量蛋白量的信号转化为光信号，再将光信号转化为数字信号，通过建立标准曲线，达到定量分析微量蛋白的目的。
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公开(公告)号：CN101445816B
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN200810235854.2
申请日：2008-11-28
Abstract: 本发明属非水相酶促有机合成应用生物技术领域，具体涉及一种减压共沸连续除水的酯类酶法合成工艺。本工艺适用于生物催化剂(如Novozym 435)催化下的各种酯键的合成。它提供了一种普遍适用的酯类酶法合成新工艺，可在不影响生物催化剂的催化活性的前提下，通过减压共沸连续除水，使反应平衡向酯的合成的方向移动，从而能够大大提高酶促有机合成的转化率，确保反应趋于完成，彻底解决非水相酶促有机合成中的连续除水问题，提高产品的纯度和得率，降低生产成本，在医药、食品、材料和精细化工等领域具有广阔的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102559738A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110413185.5
申请日：2011-12-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种重组刀额新对虾原肌球蛋白的制备方法及表达重组刀额新对虾原肌球蛋白的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从刀额新对虾肌肉匀浆经反转录PCR得到原肌球蛋白的编码基因；3)构建含有刀额新对虾原肌球蛋白编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达刀额新对虾原肌球蛋白；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化重组刀额新对虾原肌球蛋白。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达重组刀额新对虾原肌球蛋白，适用于工业化制备重组刀额新对虾原肌球蛋白。
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公开(公告)号：CN102533840A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201110413183.6
申请日：2011-12-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种人白细胞介素29(hIL-29)成熟肽的制备方法及表达hIL-29成熟肽的毕赤酵母工程菌。本发明的具体制备方法包括以下步骤：1)人工合成引物；2)从健康人外周血单个核细胞经反转录PCR得到hIL-29成熟肽的编码基因；3)构建含有hIL-29成熟肽编码基因的重组真核表达载体，融合于毕赤酵母表达调控元件获得重组毕赤酵母工程菌；4)培养重组毕赤酵母工程菌，于培养液添加甲醇诱导毕赤酵母工程菌表达hIL-29成熟肽；5)采用离子交换层析和分子筛层析从培养液上清纯化hIL-29成熟肽。本发明构建的重组毕赤酵母工程菌可进行高密度培养并且分泌型表达天然型hIL-29成熟肽，适用于工业化制备人白细胞介素29。
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公开(公告)号：CN101315371B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200810022033.0
申请日：2008-06-23
Applicant: 江南大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/532
Abstract: 一种3-甲基-喹啉-2-羧酸的免疫荧光猝灭检测方法，属于免疫分析化学技术领域。本发明包括免疫源、包被原、和抗体的制备，包被原的固定，磁性纳米粒子的修饰，磁性纳米粒子与包被原的偶联，金纳米粒子的制备，金纳米探针的制备，流动注射系统中的免疫反应，荧光酶标板的包被和流动注射荧光猝灭的检测。本发明大大提高了3-甲基-喹啉-2-羧酸检测的灵敏度，且操作更加简便，达到了高通量的目的，而且以磁性粒子作为固相载体，具有清洗和分离方便，操作简单的优点，用DNA修饰的金纳米粒子作为探针代替传统的HRP进行免疫反应，简化了反应的条件，提高了检测的灵敏度，达到国际领先水平。
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公开(公告)号：CN101445794B
公开(公告)日：2011-11-02
申请号：CN200810234125.5
申请日：2008-11-24
Applicant: 江苏省江大绿康生物工程技术研究有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明属生物活性物质的分离提取技术领域。具体涉及一种以动物肝脏为原料同时制备过氧化氢酶和肝肽的工艺。本工艺适用于以经过自溶处理的动物肝脏为原料的过氧化氢酶的加工生产。它提供了一种过氧化氢酶与肝肽联产的新工艺，可同时得到氧化氢酶和肝肽，并且能够确保整个加工生产过程的废渣废水零排放，彻底根除现行过氧化氢酶加工生产工艺的环境污染问题。肝肽为动物肝脏提取了过氧化氢酶后剩余部分的酶水解产物，可作为新型天然药物原料、功能保健食品原料广泛应用于药品、保健品、食品等领域。按照本发明进行操作，以猪肝为例，每加工1kg猪肝能够获得50,000U/ml的过氧化氢酶液2kg，同时获得蛋白含量达到70％的肝肽粉200g，水的耗用量降低至2.2kg以下。
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公开(公告)号：CN101716484B
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN200910264974.X
申请日：2009-12-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种荧光量子点编码聚己内酯微球的制备方法，属于材料技术领域。本发明将聚己内酯PCL溶解在CH2CL2中配置成非连续相，通过控制不同发射波长量子点的种类和比例的油溶性的QDs，均匀分散在非连续相中，以2％的聚乙烯醇PVA作为连续相和收集相，非连续相在连续相中形成微球，待两相流速均连续时，收集微球。本发明采用微流体的方法制备，替代传统的化学合成法，该方法操作简单，微球结构均一，形状规则，而且可以一步合成荧光编码微球。制备的微球荧光强度高，通过控制量子点的种类和比例可以得到具有不同荧光强度和亮度特征的微球，实现多元光学编码微球。
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