-
公开(公告)号：CN107828710B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201711328979.5
申请日：2017-12-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种无标记多位点整合表达谷氨酰胺酶菌株及其构建方法，属于基因工程领域。本发明的是将谷氨酰胺酶基因在16S rDNA、nprB、nprE、aprE、spo0A、epr、bpr 7个位点整合表达，最终得到了多位点无抗性整合表达谷氨酰胺酶菌株BSM7。本发明得到的BSM1和BSM7，摇瓶发酵24h后，酶活分别为40.5U/mL和85.6U/mL，突变酶活提高了111.4％。BSM7菌株分批补料发酵，在32h左右达到最高酶活，为375.6U/mL。通过遗传稳定性分析发现，BSM7的遗传稳定性远远大于改基因的质粒表达的稳定性。该发明提高了谷氨酰胺酶酶在食品工业的应用潜力。
-
公开(公告)号：CN111304139A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN202010107525.0
申请日：2020-02-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种过表达PII信号转导蛋白的重组钝齿棒杆菌，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产L-精氨酸的重组钝齿棒杆菌SYPA5-5/pXMJ19-glnK，将此重组钝齿棒杆菌SYPA5-5/pXMJ19-glnK接种至发酵培养基中发酵96h，即可使发酵液中L-精氨酸的产量高达49.53g/L，较野生型钝齿棒杆菌SYPA5-5提高了28.65％。
-
公开(公告)号：CN110846339A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201910993862.1
申请日：2019-10-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高粘质沙雷氏菌抗酸胁迫能力的方法，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在粘质沙雷氏菌中过量表达DNA结合蛋白XrpA显著提高了粘质沙雷氏菌的抗酸胁迫能力；将利用本发明的方法制备得到的重组粘质沙雷氏菌在pH为4.0的环境下培养12h后的存活率为野生型粘质沙雷氏菌的1.4倍。
-
公开(公告)号：CN110734899A
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201911056382.9
申请日：2019-10-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种酶活提高的蔗糖磷酸化酶突变体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明所述突变体是在肠膜明串珠菌来源的蔗糖磷酸化酶的基础上，进行定点突变实现蔗糖磷酸化酶酶活的提高的，将突变体在谷氨酸棒杆菌中表达，并用作全细胞催化剂生产2-O-α-D-甘油葡糖苷，在5L发酵罐水平，实现短时间内高效生产大量的2-O-α-D-甘油葡糖苷，这有利于扩大蔗糖磷酸化酶生产2-O-α-D-甘油葡糖苷工业化应用前景，实现大规模工业化应用。
-
公开(公告)号：CN106190942B
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201610592588.3
申请日：2016-07-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过敲除黄素还原酶提高L‑精氨酸产量的方法，属于微生物发酵生产氨基酸技术领域。本发明通过将钝齿棒杆菌SDNN403中编码假定NADPH‑依赖型FMN还原酶基因frd1和frd2在E.coli BL21中过表达并纯化出目标蛋白Frd181和Frd188，对其功能进行鉴定，结果表明Frd181和Frd188蛋白均为产H2O2NAD(P)H‑依赖型黄素还原酶。以钝齿棒杆菌SDNN403基因组为模板，通过重叠延伸PCR获取frd1和frd2基因缺失片段，并连接pK18mobsacB，得到敲除质粒pK18mobsacB‑Δfrd1和pK18mobsacB‑Δfrd2，通过电击转化钝齿棒杆菌SDNN403，二次筛选得到重组菌株403Δfrd1和403Δfrd2。摇瓶发酵发现，通过敲除frd1和frd2基因，L‑精氨酸产量明显提高。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104531746B
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201410748156.8
申请日：2014-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用重组Corynebacterium crenatum全细胞转化AD生成ADD的方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明首先获得新金色分枝杆菌中3‑甾酮‑△1‑脱氢酶(KSDD)的基因扩增，然后利用pXMJ19质粒，实现了该基因在模式菌株钝齿棒杆菌SYPA5‑5中的过量表达,首次成功的纯化出有活性的来源于金色分枝杆菌中的KSDD酶，并首次对其酶学性质进行了研究。本发明构建以4‑AD为底物全细胞转化为方法的高产ADD的枯草芽孢杆菌工程菌株，对该菌株的酶活力及发酵性能进行研究发现3‑甾酮‑△1‑脱氢酶的活力较出发菌株有了明显提高，以1％(w/v)4‑AD为底物，全细胞转化12h，底物摩尔转化率达到83.87％,是出发菌株相对转化率的23倍。
-
公开(公告)号：CN104894078B
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201510252442.X
申请日：2015-05-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及通过基因工程改造获得的链霉菌酪氨酸酶。本发明所述的一种定点突变改造的基因工程酪氨酸酶，其特征在于所述定点突变的基因工程链霉菌酪氨酸酶氨基酸序列相对于天然的链霉菌酪氨酸酶氨基酸序列的第7位谷氨酰胺突变为赖氨酸，第234位甘氨酸突变为脯氨酸。本发明所述的基因工程链霉菌酪氨酸酶最适温度相对于天然的链霉菌酪氨酸酶提高了10℃，在60℃下的半衰期提高了3倍，为其高效合成黑色素奠定了基础。
-
公开(公告)号：CN107955827B
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201711352434.8
申请日：2017-12-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0073 , C12N15/70 , C12P33/06 , C12Y114/13142
Abstract: 本发明公开了一种酶法转化生产9α‑羟基雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮的方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明将来源于Mycobacterium sp.Strain VKMAc‑1817D的3‑甾酮9α‑羟基化酶的氧化亚基KshA，还原亚基KshB，及未知活性亚基KshC成功在E.coliBL21中表达，并鉴定出KshC为氧化亚基，且酶活远高于KshA。利用本实验室已构建的BL21/pET‑28a(+)‑fdh表达甲酸脱氢酶FDH，以KSH(KshB+KshC)和FDH工程菌的粗酶液作为生物催化剂，以甾体化合物AD为底物，同时确定了最佳反应温度为30℃，pH7.0。在最优条件下转化AD生成产物9‑OH‑AD，在20小时内，9‑OH‑AD的产量为4.7g/L，摩尔转化率达到96.7％。本发明产生9‑OH‑AD实现了3‑甾酮9α‑羟基化酶羟化系统与辅酶循环体系的偶联，具有效率高，成本低，绿色环保等优点。
-
公开(公告)号：CN105062941B
公开(公告)日：2019-03-05
申请号：CN201510526416.1
申请日：2015-08-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用重组枯草芽孢杆菌全细胞转化生产L‑鸟氨酸的方法，属于生物工程和生物技术领域。本发明将来源于Bacillus cereus的精氨酸酶成功在Bacillus subtilis 168中表达。酶活测定结果表明，重组工程菌的精氨酸酶酶活比原始菌提高了近27倍。以此工程菌作为生物催化剂，以L‑精氨酸作为底物，进行转化法生产L‑鸟氨酸，采用分批补加底物L‑精氨酸的方法在5‑L发酵中进行转化法生产L‑鸟氨酸。12h后可以得到378.9g/L的L‑鸟氨酸，底物L‑精氨酸的摩尔转化率达到99.9％。本发明方法生产L‑鸟氨酸具有效率高，专一性强，能耗低等优点。
-
公开(公告)号：CN109370993A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811430826.6
申请日：2018-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的苯乙烯单加氧酶突变体及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。此突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的苯乙烯单加氧酶的第305位氨基酸由天冬氨酸突变为甘氨酸得到的；此突变体的酶活可达99.12±1.5U/mL、Kcat/Km可达268.2±19.5mM-1·min-1，分别较野生型提高了1.7倍、3.4倍；此突变体的温度稳定性以及pH稳定性较野生型有了明显的提高，将此突变体在60℃下保持24h依旧可残留59％的酶活，在pH5.0的状态下保持12h依然可残留71％的酶活。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
380
records
(took 0.023 seconds)
