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公开(公告)号：CN109799345A
公开(公告)日：2019-05-24
申请号：CN201811492145.2
申请日：2018-12-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开一种采用C型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)制备的检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒的制备方法是将HRP直接标记在跟被检抗体同时作用的竞争性抗体上，其内酶标板包被的C型口蹄疫病毒样颗粒是由C型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP1和VP3组装而成。本发明采用的VLPs能高效组装，且不影响其诊断效率，有利于降低诊断制剂的成本。本发明方法相对现有技术的检测步骤有所减少，实验操作简单，工作量小，用时短，并可提高诊断试剂的特异性和敏感性。
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公开(公告)号：CN109799344A
公开(公告)日：2019-05-24
申请号：CN201811492103.9
申请日：2018-12-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开一种采用Asia I型口蹄疫病毒样颗粒（VLPs）制备的检测试剂盒及制备方法。本发明的Asia I型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒内包括有：包被Asia I型口蹄疫病毒样颗粒的酶标板，HRP标记的兔抗、含有吐温和磷酸盐缓冲液的样品稀释液和洗涤液、TMB底物、阳性对照血清、阴性对照血清、以及浓硫酸与水混合的终止液。本发明具有更高的敏感性、特异性和可重复性，而且由于VLPs不含有遗传物质，不能自我复制，因此该方法具有更好的安全性。
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公开(公告)号：CN109652593A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201910013717.2
申请日：2019-01-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测A型塞内卡病毒的荧光定量PCR引物及试剂盒，所述的引物是基于塞内卡病毒L/VP4区段基因序列设计的，其上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的试剂盒可以在加入TRIzol试剂将病毒灭活后在普通实验室进行检测，安全方便；对A型塞内卡病毒能定量检测，最低检出限浓度为6.4×10°拷贝/μL，灵敏度高；对A型口蹄疫病毒cDNA、O型口蹄疫病毒cDNA、猪瘟病毒cDNA无扩增反应，特异性好，可用于检测A型塞内卡病毒感染动物的样品如血液、组织中的病毒，也可用于A型塞内卡病毒的基础研究及疫苗研制、生产过程中病毒滴度的检测等，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN108761074A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810500891.5
申请日：2018-05-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/558
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/558 , G01N2333/09
Abstract: 本发明公开了一种塞内卡病毒ELISA抗体检测试剂盒及制备方法、应用，所述塞内卡病毒ELISA抗体检测试剂盒包括预包被塞内卡病毒VP1蛋白的酶标板、封闭液、样品稀释液、酶结合物、浓缩洗涤液、酶底物溶液和终止液。本发明首次用塞内卡病毒的VP1蛋白作为包被抗原，建立了可检测塞内卡病毒的试剂盒，可对血清中的塞内卡病毒的抗体水平进行快速检测；本发明检测试剂盒敏感性高、特异性和可重复性好，结果稳定。可应用于塞内卡病毒的抗体水平监测，了解整个猪群塞内卡病毒病抗体的状况；另外本发明检测试剂盒应用大肠杆菌表达系统，具有经济、廉价的优点。
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公开(公告)号：CN107475207A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710539048.3
申请日：2017-07-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 浙江大学
IPC: C12N7/04 , C07K19/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种矿化口蹄疫病毒样颗粒及其制备方法和应用。本发明利用口蹄疫VLPs大肠杆菌表达组装技术平台，通过基因工程手段，将三种能有效富集钙离子的矿化肽分别插入到口蹄疫病毒结构蛋白VP1的loop环中，结果表明，嵌合矿化肽的VP1与口蹄疫病毒的结构蛋白VP0以及VP3在大肠杆菌中能够成功表达并组装成完整的VLPs，且对组装效率并未造成影响，后用矿化剂成功实现了对病毒样颗粒的矿化，同时提高了口蹄疫病毒VLPs的组装效果。本发明的提出推动了蛋白类疫苗由冷链疫苗向常温疫苗转化的步伐，为常温疫苗的应用提供了新的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107261135A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710553111.9
申请日：2017-07-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
IPC: A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14
CPC classification number: A61K39/39 , A61K39/12 , A61K2039/5258 , A61K2039/552 , A61K2039/55505 , C12N2770/32134
Abstract: 本发明公开了金纳米颗粒作为佐剂在制备病毒样颗粒疫苗中的应用。本发明尝试将金纳米颗粒作为佐剂用于制备病毒样颗粒(VLPs)疫苗，其中，所述金纳米颗粒优选为金纳米笼或金纳米星。结果显示，金纳米颗粒与VLPs结合产物注射进入动物体内后，能有效的释放运载的VLPs，最终诱导特异的抗体免疫反应与T-淋巴细胞免疫反应。这些结果表明，金纳米颗粒可以作为VLPs的佐剂在动物机体内有效刺激机体产生特异的免疫反应。本发明的提出为VLPs疫苗的制备提供了一种能够有效的提高口蹄疫病毒VLPs的免疫效果，更好的促进VLPs疫苗产生细胞免疫与体液免疫的佐剂。
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公开(公告)号：CN105785037B
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201610190933.0
申请日：2016-03-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒优势抗原表位肽建立快速检测层析试纸条及制备方法，可用于快速检测猪血液或血清中的抗体。试纸条包括支撑层，以及在所述支撑层上依次设置的加样层、金标蛋白释放垫、检测层和吸收层。金标抗体释放垫包埋有胶体金标记的重组G蛋白，检测层上设置有检测带和质控带，检测带固定有猪圆环病毒2型核衣壳蛋白上的优势抗原表位肽，质控带固定有ProteinG免疫兔血清纯化后的IgG。本发明的试纸条操作简单、重复性好、灵敏度高，结果快速直观、工艺简单可大量制备，成本低廉，适合基层大批量现场检测并可用于猪群PCV2感染的早期快速诊断。
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公开(公告)号：CN107029226A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201610929291.1
申请日：2016-10-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , A61K48/00 , A61P31/14
CPC classification number: A61K39/12 , A61K48/0025 , A61K48/005 , A61K2039/552 , C12N2770/32134
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)在作为重组质粒运载载体中的应用。本发明尝试将口蹄疫VLPs作为质粒运载载体，应用其潜在的运载能力和控释特性，将Asia1型口蹄疫病毒重组质粒成功运载并能在动物体内释放，最终刺激机体产生有效免疫应答反应。结果显示，口蹄疫VLPs可以运载质粒DNA进入细胞并有效释放，在注射进动物体内后，能够有效释放承载的外源质粒DNA，最终诱导特异的抗体免疫反应和显著的T‑淋巴细胞免疫反应。这些结果表明，VLPs可以作为载体运载质粒进入细胞并成功释放，且能在动物机体内有效刺激机体产生特异的免疫反应。本发明为扩展口蹄疫VLPs的生物学应用进行了一次新的尝试和创新。
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公开(公告)号：CN103642759B
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201310573277.9
申请日：2013-11-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/70 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种嵌合IBV 4/91株纤突蛋白膜外区基因片段的重组传染性支气管炎病毒及其构建方法和应用。本发明的重组病毒是通过以下方法构建得到：将适应细胞培养的骨架病毒IBV Beaudette毒株的纤突蛋白膜外区基因片段置换成IBV 4/91株的纤突蛋白膜外区基因片段来构建重组病毒，经病毒拯救过程后在Vero细胞上盲传3-5代，直至特定细胞病变—合胞体现象出现，即获得了嵌合IBV 4/91株纤突蛋白膜外区基因片段的重组传染性支气管炎病毒。将本发明构建得到的重组传染性支气管炎病毒接种鸡只后表明，本发明重组病毒不仅对各种鸡只均安全、无副反应，而且能够诱导接种鸡只产生抵抗野生型毒株49/1攻击的免疫力。
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公开(公告)号：CN104560898A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510037803.9
申请日：2015-01-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种用病毒样颗粒包被量子点的方法，以及用这种方法制备的物质。本发明的方法中，CdSe/ZnS油溶性量子点修饰方法为：将商品化的CdSe/ZnS正己烷溶液，加入到的无水乙醇中，超声处理后，离心弃上清后加入氯仿进行溶解，然后加入2-巯基乙酸（MAA）或3-巯基丙酸（MPA）混匀，经离心处理弃上清，将沉淀用氯仿洗涤，再用硼酸盐溶液溶解沉淀。本发明可降低量子点的生物毒性作用，并可选择性的侵染正常细胞，在侵染细胞的方式上具有特异性，能提高QD进入细胞的靶向性。
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