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公开(公告)号：CN110656136A
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201911023800.4
申请日：2019-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效利用淀粉生产甲萘醌-7的方法，属于生物催化技术领域。本发明通过温度诱导适应性进化，诱导最适温度为50℃的芽孢杆菌，以50g/L可溶性淀粉为唯一碳源时，50℃下摇瓶培养6d后MK-7产量达到37.1±2.1mg/L，MK-7合成效率大大提高，将有利于提高淀粉的利用率和降低MK-7生产成本。
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公开(公告)号：CN109554410A
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201811535465.1
申请日：2018-12-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用于锁掷酵母高密度发酵的流加补料方法，属于微生物发酵技术领域。本发明的氮源采用流加补料的方式加入，并降低初糖浓度，达到降低发酵液中蛋白质浓度和粘度的目的，来减少泡沫的产生量和其稳定性。与原有分批发酵工艺相比，本发明有效的改善了锁掷酵母高密度发酵过程中由严重起泡引起的逃液现象，且消泡剂的加入量降低67％，放罐体积增加了77％，显著提高了单位产量，降低了单位成本。本发明的流加补料分批发酵方法在有效控制泡沫的同时显著提高了菌体产量，菌体干重由58g/L增长为68g/L，油脂产量由29g/L增长为34g/L，且菌体转化率和油脂转化率有所提高，在工业化发酵中具有降本增效作用，给其他酵母的高密度发酵技术工艺提供相关启示。
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公开(公告)号：CN108441525A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810313578.0
申请日：2018-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种赖氨酸产量提高的谷氨酸棒杆菌及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明应用基因工程方法，替换谷氨酸棒杆菌RG中IDH编码基因icdCg为变异链球菌中IDH编码基因icdSm，从而调节其对不同氧化还原辅因子的亲和力，解决L-赖氨酸合成过程中胞内氧化还原失衡问题，提高菌株积累L-赖氨酸能力。重组菌经上罐实验(5L发酵罐)，L-赖氨酸积累量达121.4g/L。此发明成功改变了谷氨酸棒杆菌中IDH的氧化还原辅因子亲和力，解决了L-赖氨酸合成过程中胞内氧化还原失衡问题，为选育L-赖氨酸高产菌株提供崭新的思路。
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公开(公告)号：CN112481288B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202011395743.5
申请日：2020-12-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种促进谷氨酸棒杆菌发酵生产目标产物的方法，属于基因工程技术领域。本发明以谷氨酸棒杆菌为宿主，敲除了其葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶编码基因zwf和苹果酸酶基因malE，同时将其NADP+依赖型异柠檬酸脱氢酶编+码基因icdcg替换为变形链球菌的NAD依赖性异柠檬酸脱氢酶编码基因icdsm，获得了一株NADPH营养缺陷型谷氨酸棒杆菌。接着，在上述菌株中使用不同强度的启动子过表达大肠杆菌中烟酰胺核苷酸转氢酶PntAB编码基因pntAB，得到不同NADPH再生强度的重组菌株，筛选得到高产目标产物的重组菌，可实现目标产物合成途径的精细化调控。
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公开(公告)号：CN112481244B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202011423170.2
申请日：2020-12-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种天冬氨酸酶突变体及其编码基因、载体、重组菌与应用。本发明通过对来自Bacillus sp.YM55‑1的天冬氨酸酶进行突变，将318位Ser突变成Thr，能够使天冬氨酸脱氨反应效率极大降低，也使富马酸胺化反应变化不大，这可能解决工业上富马酸转化率低的问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111500614A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010426816.6
申请日：2020-05-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效催化L-苏氨酸合成2,5-DMP的质粒及其构建与应用，属于基因工程技术领域。本发明构建了包含不同微生物来源L-苏氨酸脱氢酶(TDH)的重组pRSFDuet-tdhX质粒，以筛选出最高活性的TDH。然后，引入来源于Lactococcus cremoris的NADH氧化酶(NoxE)，并筛选出TDH和NoxE在pRSF-Duet1质粒中的最佳构建方式。最终得到高效催化L-苏氨酸合成2,5-二甲基吡嗪的质粒pRSFDuet-tdhEcnoxELc。将该质粒转入大肠杆菌BL21中进行全细胞转化实验，在含有5g/L L-苏氨酸的转化体系中于37℃、200r/min孵化24h，可积累605.1±56.4mg/L的2,5-DMP。此发明通过筛选不同来源的TDH酶和优化不同基因共表达方式，从而获得了一种能高效催化L-苏氨酸合成2,5-二甲基吡嗪的质粒，为构建2,5-二甲基吡嗪高效催化质粒提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN109402038A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201811526205.8
申请日：2018-12-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产L-脯氨酸的重组菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明通过在棒杆菌属的L-脯氨酸生产菌中L-脯氨酸合成途径关键酶TA编码基因ilvE启动子后插入终止子以及过表达脯氨酸生物合成的关键基因proB，在棒杆菌属的L-脯氨酸生产菌中构建了高效的L-脯氨酸合成途径，获得了高产L-脯氨酸且降低副产物含量的重组菌株。
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公开(公告)号：CN109182239A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811074264.6
申请日：2018-09-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明应用基因工程方法，敲除基因zwf、malE，替换谷氨酸棒杆菌基因icdCg为变形链球菌Streptococcus mutans JH 1005中基因icdSm，达到重组菌胞内NADPH水平精确调控的目的。重组菌经LBG液体培养基摇瓶实验，重组菌胞内NADH含量由出发菌的1.97μmol(g DCW)-1增加到2.73μmol(g DCW)-1，胞内NADPH含量降低至0.15μmol(g DCW)-1，明显低于出发菌胞内NADPH含量1.43μmol(g DCW)-1。此发明成功阻断了谷氨酸棒杆菌中NADPH合成的相关途径，为构建可精确调控胞内NADPH水平的菌株提供崭新的思路。
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公开(公告)号：CN103710375A
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201310742881.X
申请日：2013-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在谷氨酸棒杆菌基因组中同时实现基因敲除与过表达并不带有任何抗性标记的新新型质粒，属于基因工程领域。本发明中所公开的新型质粒，能在谷氨酸棒杆菌基因组中同一时间内实现基因敲除和另一基因的过表达而不带有任何抗性标记。插入在谷氨酸棒杆菌基因组中的过表达的基因在宿主中能够稳定的遗传并表达。另一方面，该方法运用双交换同源重组原理获得目的重组菌株，这克服了单交换同源重组过程中低重组效率的缺点，从而大大提高获得目的重组菌株的机率。该方法的提出，将有利于对谷氨酸棒杆菌的基因工程改造，减少了因引入抗性标记基因的影响。
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公开(公告)号：CN112481288A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011395743.5
申请日：2020-12-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种促进谷氨酸棒杆菌发酵生产目标产物的方法，属于基因工程技术领域。本发明以谷氨酸棒杆菌为宿主，敲除了其葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶编码基因zwf和苹果酸酶基因malE，同时将其NADP+依赖型异柠檬酸脱氢酶编码基因icdcg替换为变形链球菌的NAD+依赖性异柠檬酸脱氢酶编码基因icdsm，获得了一株NADPH营养缺陷型谷氨酸棒杆菌。接着，在上述菌株中使用不同强度的启动子过表达大肠杆菌中烟酰胺核苷酸转氢酶PntAB编码基因pntAB，得到不同NADPH再生强度的重组菌株，筛选得到高产目标产物的重组菌，可实现目标产物合成途径的精细化调控。
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