一种热稳定性与酶活提高的L-异亮氨酸羟化酶突变体

    公开(公告)号:CN110438097A

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201910750086.2

    申请日:2019-08-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种热稳定性与酶活提高的L-异亮氨酸羟化酶突变体,具体公开了一种热稳定性与酶活提高的L-异亮氨酸羟化酶突变体及其在4-羟基异亮氨酸生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提出的提高热稳定性的方法可用于其他羟化酶的改造,为生产其他高附加值羟化氨基酸提供了理论指导。利用本发明的的枯草芽孢杆菌工程菌生产得到的L-异亮氨酸羟化酶的比酶活可达2.4±0.08U/mg,全细胞重复5批次,连续转化45h,可以得到856.91mM(126.1g/L)的4-HIL,且5批次后,L-异亮氨酸羟化酶的转化能力仍为第一次转化的84.1%。

    一种空腔工程化技术提高酶热稳定性和催化活性的方法

    公开(公告)号:CN114330025B

    公开(公告)日:2025-01-24

    申请号:CN202210059055.4

    申请日:2022-01-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种空腔工程化技术提高酶热稳定性和催化活性的方法,属于生物信息学、计算化学、生物工程、生物物理及蛋白质工程等领域。本发明首先以分子动力学模拟(MD)蛋白运动,通过聚类分析挑选出代表性构象后通过AQUA‑DUCT分析模拟轨迹并筛选出蛋白内部关键空腔,再筛选出组成关键内部空腔附近的氨基酸残基同时排除结合活性位点一定范围的氨基酸残基,再结合多尺度自由能计算软件以能量为指标对上述残基位点执行饱和突变,经筛选获得潜在的阳性突变体。利用本发明方法得到的阳性突变率最高达到90%,酶的热稳定性和催化活性均得到增强,具有非常高的应用潜力。

    一种基于构象动力学设计提高酶稳定性和活性的方法

    公开(公告)号:CN116504320B

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202310337659.5

    申请日:2023-03-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于构象动力学设计提高酶稳定性和活性的方法,属于计算化学,生物信息学,基因工程以及蛋白质工程技术领域。该方法包括以下步骤:基于高压分子动力学模拟的等温压缩系数扰动筛选出与酶的性质和功能密切相关的高可塑性区域,然后对高可塑性区域的氨基酸进行动态柔性指数和动态耦合指数计算,筛选出高稳定性和活性的突变体。本发明实现了从区域到点的筛选,克服了现有技术实用性不强的问题,并且同时提高了酶的稳定性和活性,提高了酶在工业上的应用价值。

    一种基于人工脂滴和改性魔芋葡甘聚糖制备成块脂肪的方法

    公开(公告)号:CN116420791A

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202310241210.9

    申请日:2023-03-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于人工脂滴和改性魔芋葡甘聚糖制备成块脂肪的方法,属于食品油脂加工技术领域。本发明以脂肪组织结构出发,以卵磷脂为膜材、混合植物油为中性脂质核心,通过超声法制备人工脂滴乳液,并以羧基化改性魔芋葡甘聚糖、辛烯基琥珀酸淀粉酯以及海藻酸钠复配形成空间网络,分层多次叠加,辅以钙离子交联,将脂滴牢固结合在胶体层中,形成一种略带油质感和层次感的成块脂肪模拟物,使其具有与天然动物脂肪相似的脂肪组织结构和柔滑细嫩购得质地,也具有良好的保水、保油性能,食用时经口腔加工可以产生独特的油水混合口感,可以满足人们对脂肪营养价值和感官特性等方面的多样化需求,提升人造脂肪的可接受度。

    一种以脂质泡包埋肉味香精制备羊肉专用块状脂肪的方法

    公开(公告)号:CN114027458B

    公开(公告)日:2023-07-07

    申请号:CN202111410412.9

    申请日:2021-11-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种以脂质泡包埋肉味香精制备羊肉专用块状脂肪的方法,属于食品油脂加工领域。本发明以脂质泡为载体,对添加有4‑烷基支链脂肪酸组分的羊肉味香精进行包埋,采用溶剂注入法制备类脂囊泡体系;再将其与魔芋复配凝胶结合,添加乳化植物油,经过混合、均质、交联形成具有粘弹性的块状脂肪模拟物。本发明将脂质泡和魔芋复配凝胶结合制备了羊肉专用块状脂肪模拟物,弥补了羊肉脂肪模拟物研究的空缺。该块状脂肪具有与羊肉脂肪相似的细嫩质地以及稳定逼真的特征风味,提升脂肪食用时的滋味口感,可以替代羊肉脂肪应用到人造肉食品的加工中,增加人造肉产品的仿真度和可接受度。

    一种利用重组谷氨酸棒杆菌发酵生产L-谷氨酸的方法

    公开(公告)号:CN111394291B

    公开(公告)日:2022-03-15

    申请号:CN202010227468.X

    申请日:2020-03-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用重组谷氨酸棒杆菌发酵生产L‑谷氨酸的方法,属于生物技术领域。本发明提供了一种可低产L‑丙氨酸、L‑酪氨酸、L‑缬氨酸、L‑胱氨酸和L‑甲硫氨酸等副产物的重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum G01/pXMJ19‑cg2115,将此菌株接种至5‑L发酵罐中发酵48h所获得的发酵液中L‑丙氨酸、L‑酪氨酸、L‑缬氨酸、L‑胱氨酸和L‑甲硫氨酸的含量分别仅有0.15g/L、0.185g/L、0.369g/L、0.02g/L和0.277g/L,分别较野生型谷氨酸棒杆菌G01降低了98.1%、96.1%、86.1%、99.4%和91.4%。

    一种热稳定性与酶活提高的L-异亮氨酸羟化酶突变体

    公开(公告)号:CN110438097B

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201910750086.2

    申请日:2019-08-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种热稳定性与酶活提高的L‑异亮氨酸羟化酶突变体,具体公开了一种热稳定性与酶活提高的L‑异亮氨酸羟化酶突变体及其在4‑羟基异亮氨酸生产中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提出的提高热稳定性的方法可用于其他羟化酶的改造,为生产其他高附加值羟化氨基酸提供了理论指导。利用本发明的的枯草芽孢杆菌工程菌生产得到的L‑异亮氨酸羟化酶的比酶活可达2.4±0.08U/mg,全细胞重复5批次,连续转化45h,可以得到856.91mM(126.1g/L)的4‑HIL,且5批次后,L‑异亮氨酸羟化酶的转化能力仍为第一次转化的84.1%。

    一种耐热、耐碱的木聚糖酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN116445455B

    公开(公告)日:2024-07-09

    申请号:CN202310420629.0

    申请日:2023-04-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种耐热、耐碱的木聚糖酶突变体及其应用,利用基于高压的分子动力学模拟,结合多种热稳定性算法组合预测计算改进木聚糖酶的热稳定性,进一步基于表面偶联方法,利用Rosetta supercharge对木聚糖酶的表面电荷进行计算和设计,以提高酶的耐碱性,筛选得到一系列突变体。本发明的木聚糖酶突变体的耐热性和耐碱性大大提高,尤其是显著延长了在高温、强碱条件下酶的半衰期,并且酶活在一定程度上也有所提高,解决了目前工业环境中木聚糖酶的半衰期短、稳定性差以及蛋白质的储存与实际催化反应条件相矛盾的局限。

    一种基于人工脂滴和改性魔芋葡甘聚糖制备成块脂肪的方法

    公开(公告)号:CN116420791B

    公开(公告)日:2024-02-27

    申请号:CN202310241210.9

    申请日:2023-03-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于人工脂滴和改性魔芋葡甘聚糖制备成块脂肪的方法,属于食品油脂加工技术领域。本发明以脂肪组织结构出发,以卵磷脂为膜材、混合植物油为中性脂质核心,通过超声法制备人工脂滴乳液,并以羧基化改性魔芋葡甘聚糖、辛烯基琥珀酸淀粉酯以及海藻酸钠复配形成空间网络,分层多次叠加,辅以钙离子交联,将脂滴牢固结合在胶体层中,形成一种略带油质感和层次感的成块脂肪模拟物,使其具有与天然动物脂肪相似的脂肪组织结构和柔滑细嫩购得质地,也具有良好的保水、保油性能,食用时经口腔加工可以产生独特的油水混合口感,可以满足人们对脂肪营养价值和感官特性等方面的多样化需求,提升人造脂肪的可接受度。

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